蔡靜清

(承德市第三醫(yī)院，河北 承德 067000)

合理使用腫瘤標(biāo)志物有助于原發(fā)性肝癌(PLC)的臨床診斷〔1，2〕，但鑒于不同腫瘤的特異性標(biāo)志物有差異，故探討針對(duì)PLC診斷效能較高的腫瘤標(biāo)志物已成為目前的研究熱點(diǎn)。血清組織多肽特異性抗原(TPS)、α-L-巖藻苷酶(AFU)和神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)是常見的血清腫瘤標(biāo)志物，在多種惡性腫瘤的診斷中有較高的臨床價(jià)值〔3～5〕。目前，將這3項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用到PLC的診斷及化療監(jiān)測(cè)，國內(nèi)尚無相關(guān)報(bào)道。本研究擬檢測(cè)PLC患者血清TPS、AFU和NSE水平，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 本院2009年2月至2012年7月接受化療的65例PLC患者，其中男39例，女26例；年齡33～75〔平均(57.2±14.8)〕歲，≤50歲者26例，>50歲者39例；TNM分期為Ⅱ～Ⅳ期，Ⅱ期21例，Ⅲ期25例，Ⅳ期19例；腫瘤單發(fā)19例，多發(fā)46例；分化程度：低分化18例，中分化24例，高分化23例；腫瘤最大直徑≤5 cm者30例，>5 cm者35例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均經(jīng)肝穿刺活檢或病理組織學(xué)確診；(2)未接受過放化療或術(shù)前新輔助化療；(3)預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月；(4)有明確可測(cè)量的病灶；(5)ECOG評(píng)分0～1分。另選取同期72例肝良性疾病患者和81例健康體檢者為對(duì)照。肝良性疾病組：男42例，女30例；年齡29～76〔平均(58.4±15.6)〕歲，肝囊腫44例，肝血管瘤28例；健康體檢組：男46例，女35例；年齡28～73〔平均(57.9±17.2)〕歲。

1.2血清標(biāo)本采集 待患者入院病情穩(wěn)定后，分別于化療前、化療第1、2個(gè)周期后采用真空采血管采集前臂靜脈血5 ml(空腹)，靜置30 min后，離心分離血清(2 300 r/min×5 min)，將血清保存于-80℃低溫冰箱內(nèi)，備測(cè)。

1.3檢測(cè)方法 分別采用ELISA法、速率法和電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)TPS、AFU和NSE水平，所有操作完全按照試劑盒說明書完成。TPS ELISA試劑盒購于瑞典IDL公司；AFU試劑購買于上海藍(lán)怡科技有限公司；NSE試劑盒購買于Roche公司。

1.4評(píng)價(jià)指標(biāo) 分析化療前總體及不同臨床病理參數(shù)〔性別、年齡、TNM分期、甲胎蛋白(AFP)水平、腫瘤數(shù)目、腫瘤最大直徑和分化程度〕的三個(gè)指標(biāo)濃度并評(píng)價(jià)不同化療周期三個(gè)指標(biāo)的濃度變化情況。采用受試者工作特征曲線(ROC)分析三個(gè)指標(biāo)用于診斷PLC的臨界值、敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及曲線下面積(AUC)。

2 結(jié) 果

2.1不同組別血清三指標(biāo)的濃度 PLC組的TPS、AFU和NSE水平均高于健康體檢組和肝良性疾病組(P<0.05)，健康體檢組和肝良性疾病組三個(gè)指標(biāo)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 不同組別血清三個(gè)指標(biāo)水平比較

2.2PLC患者不同臨床病理參數(shù)的三個(gè)指標(biāo)水平 PLC患者中三個(gè)指標(biāo)在性別、年齡上的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但不同AFP、TNM分期、腫瘤數(shù)目、腫瘤最大直徑和分化程度的TPS、AFU和NSE水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 PLC患者不同臨床病理參數(shù)的三個(gè)指標(biāo)水平

2.3ROC曲線分析三個(gè)指標(biāo)用于診斷PLC的臨界值和效能 以健康體檢組和肝良性疾病組為非PLC對(duì)照，分別以65.71 U/L(TPS)、35.48 U/L(AFU)和19.33 μg/L(NSE)作為臨界值，用于診斷PLC的敏感度、特異度、AUC、約登指數(shù)見表3。而TPS+AFU+NSE聯(lián)合檢測(cè)的敏感度和特異度分別為89.3%和84.7%，約登指數(shù)為74.0%，提示三個(gè)指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用均具有較高的檢測(cè)效能。

2.4PLC患者化療前后的三個(gè)指標(biāo)水平 PLC患者化療后TPS、AFU和NSE水平均低于化療前(P<0.05)，且化療第2個(gè)周期后的三個(gè)指標(biāo)水平低于化療第1個(gè)周期后(P<0.05)，見表4。

表3 ROC曲線分析三個(gè)指標(biāo)診斷PLC的效能

表4 PLC患者化療前后的三個(gè)指標(biāo)水平

3 討 論

PLC是我國常見的肝臟部位高發(fā)腫瘤，惡性程度高，預(yù)后差〔1〕。由于缺少理想的早期篩查手段，多數(shù)PLC患者確診時(shí)已處于中晚期，喪失了手術(shù)治療時(shí)間，因此早診斷、早治療是降低PLC死亡率的關(guān)鍵。血清腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤的診斷及治療效果評(píng)價(jià)上具有重要意義，但某些腫瘤標(biāo)志物由于敏感性和特異性較低，臨床價(jià)值受到一定影響〔6〕，因此篩選敏感度、特異度均較高的腫瘤標(biāo)志物對(duì)早期診斷尤為重要。

TPS是一種組織抗原的可溶性片段，廣泛存在于各類上皮細(xì)胞中，可反映細(xì)胞增殖狀況，高表達(dá)于惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤，尤其在腫瘤細(xì)胞活躍期間其表達(dá)水平升高并釋放至血液，其水平高低可反映腫瘤的生物學(xué)行為〔7〕。

目前，該指標(biāo)被用于乳腺癌、小細(xì)胞肺癌及胰腺癌的診斷〔7～9〕。AFU是哺乳動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的一種溶酶體酸性水解酶，其主要作用為水解含巖藻糖基的生物活性大分子，肝癌患者可產(chǎn)生該酶的抑制劑，可導(dǎo)致底物堆積并引起其水平代償性升高，故可用于PLC的診斷和治療監(jiān)測(cè)〔10〕。NSE是烯醇化酶的一種同工酶，在正常神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，但在多種腫瘤中其水平異常升高，在小細(xì)胞肺癌、胃癌及大腸癌的診斷中應(yīng)用較廣〔5,11〕。

本研究發(fā)現(xiàn)，PLC患者三者的水平升高，主要原因?yàn)槟[瘤細(xì)胞可直接或間接地促進(jìn)以上物質(zhì)的合成并釋放至血液中，導(dǎo)致其水平升高，與PLC中腫瘤負(fù)荷較高有關(guān)。本研究進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，除性別、年齡外，三者的水平與AFP、TNM分期、腫瘤數(shù)目、腫瘤最大直徑和分化程度有關(guān)，且病情嚴(yán)重程度較高者，其水平也越高，提示該指標(biāo)可用于PLC的病情預(yù)測(cè)，為治療方案的制定提供依據(jù)。腫瘤標(biāo)志物的主要作用是用于診斷腫瘤，對(duì)靈敏度和特異性的要求較高。本研究采用ROC曲線分析了三者用于PLC診斷的效能，發(fā)現(xiàn)單獨(dú)采用TPS診斷時(shí)，敏感性最高，提示有助于PLC的臨床診斷，而單獨(dú)采用NSE診斷時(shí)，特異性最高，提示有助于PLC與其他惡性腫瘤的鑒別診斷；將三者聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，敏感度和特異性也均較高。敏感度和特異度在評(píng)價(jià)診斷效能上各有側(cè)重，而約登指數(shù)可較直接的反映檢驗(yàn)效能〔12〕，該三個(gè)指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合診斷PLS的約登指數(shù)均在70.0%以上，提示具有較好的檢測(cè)效能。

在腫瘤治療過程中由于腫瘤負(fù)荷減輕，腫瘤標(biāo)志物水平可降低，因此可用于療效的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。本研究發(fā)現(xiàn)化療后三者的水平均降低，而不同化療周期間的水平也有差異，提示三者除用于PLC診斷外，還可用于化療監(jiān)測(cè)，具有重要的臨床價(jià)值。腫瘤治療過程中，癌細(xì)胞活性降低及腫瘤負(fù)荷減小是導(dǎo)致腫瘤標(biāo)志物水平變化的基礎(chǔ)，但要求標(biāo)志物敏感性要高。

綜上所述，PLC患者的TPS、AFU和NSE水平升高，且與臨床病理學(xué)參數(shù)有關(guān)；三個(gè)指標(biāo)在PLC診斷上具有較高的效能，同時(shí)其水平變化可用于監(jiān)測(cè)化療效果。

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