蘇信斌，袁 菲，袁 艷，文流勇，楊洪芬，鈕 瓊 (.貴州省貴陽市第二人民醫(yī)院檢驗科，貴州 貴陽 55008;.貴州省貴陽市白云區(qū)醫(yī)院兒科，貴州 貴陽 55004)

小兒肺炎是0～6歲兒童的常見病，據(jù)統(tǒng)計全球每年有超過400萬的兒童死于急性肺炎，是兒童死亡的主要原因。隨著自然環(huán)境的惡化、人口流動的日益頻繁、氣候變化等諸多因素的影響，我國小兒急性肺炎的患病率逐漸上升，居住環(huán)境不良、低出生體重兒以及先天性心臟病、佝僂病、免疫缺陷等均可誘發(fā)小兒肺炎。病毒、細菌、非典型病原體是三大類主要致病源［1］。為了降低小兒急性肺炎的死亡率，為防治疾病提供依據(jù)，應(yīng)加強呼吸道病原體的檢測。呼吸道病原體一般感染人體1～2周后，血清中特異IgM抗體急劇升高，3～4周后可達到高峰。因此，檢測血清中特異IgM抗體可作為急性感染期的主要指標［2］。選用間接免疫熒光法(IFA)檢測呼吸道常見的九種病原體的IgM抗體，明確小兒急性肺炎的致病源，為兒科醫(yī)生臨床治療及合理用藥提供可靠的理論依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象:為2012年1月～2012年12月期間，在貴陽市第二人民醫(yī)院兒科就診的0～6歲肺炎患兒284例。包括門診及住院兒童，按年齡1個月～6歲，分三組:嬰兒組(≤1歲)，幼兒組(1～3歲)，學(xué)齡前組(3～6歲)，均存在呼吸道感染的臨床表現(xiàn)。抽取空腹靜脈血，分離血清，當天完成檢測。

1.2 試驗材料及儀器

1.2.1 試劑盒:九種呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒(鄭州安圖科技發(fā)展有限公司)。

1.2.2 儀器:LDZ5－2型自動平衡離心機(金壇市恒豐儀器廠)，恒溫培養(yǎng)箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠)，熒光顯微鏡以及制造商推薦的濾光片(上海光學(xué)儀器六廠)。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗原理:間接免疫熒光法(IFA)是基于待測樣本中的抗體與吸附在載玻片上的抗原發(fā)生的反應(yīng)。樣本中存在的特異性抗體和抗原發(fā)生的反應(yīng)。樣本中存在的特異性抗體和抗原反應(yīng)，未與抗原結(jié)合的免疫球蛋白在洗滌步驟中除去。在下一步驟中，抗原－抗體復(fù)合物與熒光素標記的抗人球蛋白反應(yīng)。用免疫熒光顯微鏡觀察結(jié)果。

1.3.2 試驗步驟:嚴格按試劑盒說明書操作，每次試驗都設(shè)立陽性和陰性對照，以確保試驗和試劑盒的有效性。

2 結(jié)果

在284例0～6歲兒童患者中，總的呼吸道病原體陽性率為38.03%，其中陽性率最高的是MP(16.2%)，中等陽性率的病原體有 RSV(7.04%)、INFB(6.34%)、PIVs(3.52%)、ADV(2.11%)、LP1(1.76%)，陽性率最小的病原體為 CPn(0.35%)和QFR(0.00%)。見表1。

表1 呼吸道九種病原體檢測結(jié)果

在284例0～6歲兒童患者中，按年齡1個月～6歲，分三組:嬰兒組(≤1歲)，幼兒組(1～3歲)，學(xué)齡前組(3～6歲)?？偟暮粑啦≡w陽性率分別為41.38%、36.96%和20%。多組樣本間九聯(lián)檢陽性率采用χ2檢驗，由表2可知，嬰兒組(≤1歲)與幼兒組(1～3歲)病原體檢出率無顯著性差異(χ2=0.305＜3.84，P＞0.05);幼兒組(1～3歲)與學(xué)齡前組(3～6歲)病原體檢出率無顯著性差異(χ2=2.74＜3.84，P＞0.05);嬰兒組(≤1歲)與學(xué)齡前組(3～6歲)病原體檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.77＞3.84，P ＜0.05)。

表2 不同年齡組患兒陽性率分布情況

在284例0～6歲兒童患者中，同時感染兩種以上抗體病例為4例，占總陽性例數(shù)的3.70%。其中0～1歲患兒混合感染病例3例，占總陽性率的2.78%;1～3歲患兒混合感染病例1例，占總陽性率的0.93%。主要為MP合并其他病原體混合感染。見表3。

表3 不同年齡組患兒混合感染陽性數(shù)分布情況

3 討論

小兒急性肺炎是兒童時期尤其是嬰幼兒時期最重要的常見病和多發(fā)病。嬰幼兒急性肺炎占我國住院小兒死亡的第一位，嚴重威脅兒童的身體健康，而且年齡越小感染率越高，病情越嚴重［3］。小兒急性肺炎的發(fā)生是多種因素共同作用的結(jié)果，大致包括病原體、年齡、免疫、飲食、環(huán)境、心理等諸多因素，其中病原體感染是其主要發(fā)病因素。近年來隨著各種抗生素的廣泛應(yīng)用，呼吸道細菌感染有所降低，但呼吸道其他病原體感染呈上升趨勢［4］。

本次研究顯示，非典型病原體感染52例，占18.21%;呼吸道病毒感染56例19.72%?；旌喜≡w感染4例，占3.70%。284例患兒中，陽性率嬰兒組高于幼兒組，幼兒組高于學(xué)齡前組，多組樣本間九聯(lián)檢陽性率采用χ2檢驗，由表2可知，嬰兒組(≤1歲)與幼兒組(1～3歲)病原體檢出率無顯著性差異(χ2=0.305＜3.84，P ＞0.05);幼兒組(1～3歲)與學(xué)齡前組(3～6歲)病原體檢出率無顯著性差異(χ2=2.74＜3.84，P＞0.05);嬰兒組(≤1歲)與學(xué)齡前組(3～6歲)病原體檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.77＞3.84，P＜0.05)。

在實施特異性病原檢測治療的284例急性肺炎患兒中，呼吸道病原體陽性率38.03%，混合感染陽性率3.70%，明顯低于國內(nèi)同類研究的報道［5］，與劉麗等人報道的陽性率58.2%也低［6］，說明小兒病毒性肺炎檢出率具有地區(qū)差異性。據(jù)研究對比得知，不同地區(qū)的病原流行情況存在一定的差異［7］，我國幅員遼闊，各地生活條件、地理環(huán)境、經(jīng)濟水平、藥源供應(yīng)差別較大，病原的流行分布不盡相同，因此藥物的選用應(yīng)該有針對性。

綜上所述，呼吸道九聯(lián)檢病原譜有地區(qū)差異，3歲以上的兒童隨著機體免疫功能不斷增強，病原體檢出率與嬰幼兒相比明顯下降，說明嬰幼兒期仍為本地區(qū)小兒病毒性肺炎好發(fā)年齡，嬰幼兒期應(yīng)是病原體感染的重點防御時期。因此快速檢測呼吸道感染的病原體，特別是對已確診為急性肺炎的患兒，明確其引起肺炎的病原體，對臨床正確診斷及合理用藥顯得十分重要。

［1］薛辛東.兒科學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2009:291.

［2］吳 華.843例兒童急性呼吸道感染血清IgM測定與分析［J］. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7(1):25.

［3］韓曉華，劉立云，敬 宏，等.小兒肺炎支原體肺炎合并全身炎性反應(yīng)綜合征時炎性相關(guān)因素的變化及臨床意義［J］.中國當代兒科雜志，2007，9(4):347.

［4］王 梅.小兒急性呼吸道感染的病原學(xué)研究［J］.中國兒童保健雜志，2003，11(2):117.

［5］孫海平，唐朝貴，杜順華.383例呼吸道感染血清肺炎支原體抗體檢測結(jié)果分析［J］.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2002，23(9):979.

［6］劉 麗，鄒映雪，于凌云，等.長春地區(qū)兒童急性呼吸道感染的病原趨勢［J］. 吉林醫(yī)學(xué)，2004，2(25):46.

［7］武 悅，張洪珠.對兒童肺炎支原體特異性抗體的實驗室檢測及方法學(xué)分析［J］.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2008，16(2):116.