謝莉莉

[摘要] 目的 對母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)的相關(guān)性進行分析與探討。方法 選取30例在該院接受治療的早產(chǎn)孕婦先兆早產(chǎn)孕婦，將其劃分為實驗組，并選取30例爭產(chǎn)孕周孕婦，將其劃分為對照組，對應(yīng)實驗組孕婦孕周取其血液標(biāo)本。所有標(biāo)本都為Y染色體中的SRY位點，熒光定量PCR男性胎兒的DNA，對其中帶有SRY基因胎兒的DNA濃度進行檢測。結(jié)果 與實驗組孕婦相比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.6±52.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.5±57.4）拷貝/mL，實驗組與對照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。早產(chǎn)組孕婦平均宮頸長度是（29.10±6.7）mm，而假性早產(chǎn)組孕婦平均宮頸長度則為（41.9±6.3）mm，此外，對照組產(chǎn)婦平均宮頸長度為（42.3±5.7）mm.對照組與早產(chǎn)組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05；假性早產(chǎn)組和爭產(chǎn)孕婦組之間P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。母血母血胎兒DNA與孕婦宮頸長度呈負相關(guān)。結(jié)論 研究表明，母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)存在相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞] 先兆早產(chǎn)；母血胎兒DNA；熒光定量PCR；相關(guān)性

[中圖分類號] R4 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）07（b）-0045-02

現(xiàn)階段，早產(chǎn)在產(chǎn)科領(lǐng)域被稱為最具挑戰(zhàn)性的婦科問題，而且是導(dǎo)致新生兒死亡與疾病的首要因素，所以，早產(chǎn)在始終備受醫(yī)學(xué)界的關(guān)注[1]。一些研究人員致力于對孕婦早產(chǎn)的預(yù)測，對真、假性早產(chǎn)進行區(qū)分，對早產(chǎn)臨產(chǎn)與先兆早產(chǎn)的間隔時間進行有效掌握，適當(dāng)與及時用藥，確保早產(chǎn)兒成活率的提高，同時有效降低早產(chǎn)兒發(fā)病率[2]。為了對母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)的相關(guān)性進行分析與探討，確保孕婦與新生兒生命健康，該院選取30例2012年8月—2013年7月在該院接受治療的早產(chǎn)孕婦先兆早產(chǎn)孕婦，和30例初次妊娠正常孕婦，對母血母血胎兒DNA進行熒光定量PCR檢測，結(jié)果表明母血母血胎兒DNA與孕婦宮頸長度呈負相關(guān)，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取30例在該院接受治療的早產(chǎn)孕婦先兆早產(chǎn)孕婦，將其劃分為實驗組，對其進行B超檢測結(jié)果為男胎，其中早產(chǎn)孕婦平均年齡為（26.4±1.2）歲，平均孕周為（28±3.5）周，先兆早產(chǎn)孕婦平均年齡為（25.1±2.6）歲，平均孕周為（29±3.1）周。再選取所懷男胎的30例初次妊娠正常孕婦，作為對照組，平均年齡為（27.1±1.8）歲，平均孕周為（29±2.5）周。先兆早產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)為，孕婦妊娠滿7個月后，孕婦出現(xiàn)10 min/次的宮縮，而且孕婦宮頸管縮短。孕婦早產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)為，孕婦妊娠在28周以上，37周以下，規(guī)律性宮縮，宮頸擴張超過2 cm。兩組孕婦年齡、孕周等一般資料P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

所選用儀器設(shè)備為可調(diào)式微量移液儀，iCycler-IQ定量PCR儀，低溫高速TGL-16C臺式離心機以及恒溫水浴鍋。主要試劑為德國生產(chǎn)的DNA提取試劑盒，中山大學(xué)達安基因公司生產(chǎn)的PCR檢測SRY熒光定量試劑盒、國產(chǎn)的無水酒精以及中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生產(chǎn)的淋巴細胞分離液[3]。

通過抗凝管對所有先兆早產(chǎn)孕婦進行3 mL的外周血抽取，3 000 r/min離心10 min，將孕婦血漿吸取在離心小管中。依照孕婦先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，將其具體分為真假性早產(chǎn)孕婦。

1.2.1 胎兒DNA提取 在1.5 mL的離心管中加入20 L的蛋白酶，并將分離出來的白細胞與200 L血漿置于離心管中，在56 ℃下進行10 min的溫育，瞬時離心去上清。再于離心管中加入酒精200 L，進行15 s的混勻，瞬時離心去上清。最后將QIAamp spin column加入到混合物中，助于2 mL的收集管中，將存廢液的收集管去除掉，置換一個新的收集管。

1.2.2 熒光定量PCR 所有標(biāo)本都為Y染色體中的SRY位點，熒光定量PCR男性胎兒的DNA，對其中帶有SRY基因胎兒的DNA濃度進行檢測。

1.3 判斷與評價標(biāo)準(zhǔn)

依照IAMS所描述的具體措施對宮頸長度進行測量，反復(fù)測量3次，宮頸長度取最短者。用單因素方差分析進行顯著性檢驗，判斷胎兒游離DNA濃度與先兆早產(chǎn)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 10.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示結(jié)果，通過q檢驗進行兩兩對比。

2 結(jié)果

2.1 對比正常孕婦與真假性早產(chǎn)母血中胎兒的DNA濃度

實驗組孕婦對比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.6±52.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.5±57.4）拷貝/mL，實驗組與對照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 對比正常孕婦與真假性早產(chǎn)母血中胎兒的DNA濃度

注：對比真性早產(chǎn)和假性早產(chǎn)，*P<0.01，對比對照組與假性早產(chǎn)組，**P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.2 母血胎兒DNA和宮頸長度相關(guān)性分析

通過回歸系數(shù)假設(shè)檢驗，采用方差進行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，母血胎兒DNA和產(chǎn)婦宮頸長度相關(guān)性非常大， P<0.05（P=0.012），r=-0.676，呈現(xiàn)負相關(guān)性。

3 討論

3.1 游離母血胎兒DNA和早產(chǎn)的關(guān)系

相關(guān)研究結(jié)果表明[4]，母血母血胎兒DNA會由孕婦妊娠的上升而呈現(xiàn)增加的趨勢，到晚孕時會出現(xiàn)明顯升高的趨勢，此現(xiàn)象在很大程度上和孕婦分娩期逐漸臨近有關(guān)，也就是說，早產(chǎn)孕婦血漿中的胎兒DNA會呈現(xiàn)高濃度的情況[5-6]。endprint

孫陽等[7]對母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)相關(guān)性研究結(jié)果表明，孕婦在孕周為35周時，胎兒DNA平均濃度為74拷貝/mL，在晚孕的情況下，母血胎兒DNA和孕周呈現(xiàn)正相關(guān)性，而且每周呈29.3%的增加趨勢，同時胎兒血漿中總DNA濃度和產(chǎn)婦孕周并沒有相關(guān)關(guān)系，然而，總的來說，母血胎兒DNA與總DNA濃度呈正相關(guān)性，由此表明，母血母血胎兒DNA可以作為早產(chǎn)的重要指標(biāo)。對比12位足月產(chǎn)孕婦與早產(chǎn)孕婦血漿中母血胎兒DNA，結(jié)果顯示，發(fā)生自發(fā)性早產(chǎn)前，就在孕婦血漿中檢測到母血胎兒DNA比較高，對其進行相應(yīng)保胎治療后，母血胎兒DNA出現(xiàn)一定程度的下降情況，在該研究中，實驗組孕婦對比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.6±52.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.5±57.4）拷貝/mL，實驗組與對照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與孫陽等[7]人研究結(jié)果具有一致性。所以，母血胎兒DNA可當(dāng)做篩查早產(chǎn)的重要指標(biāo)。

3.2 宮頸長度和母血胎兒DNA的關(guān)系

對于正常孕周的孕婦而言，其宮頸長度會隨著其孕周時間的增加出現(xiàn)宮頸長度縮短的情況，而對于早產(chǎn)孕婦而言，其宮頸縮短的情況相比于正常孕婦，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[8]。此外，隨著先兆早產(chǎn)孕婦宮頸的不斷縮短，其母血胎兒DNA會呈現(xiàn)不斷升高的情況，由此可見，母血胎兒DNA和宮頸長度呈現(xiàn)負相關(guān)性。

無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷在近些年始終是我國學(xué)者進行研究的探索途徑與主要思路。而由孕婦血中將胎兒細胞分離出來屬于無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的范疇，然而，因為胎兒細胞量比較少，而且分離和富集技術(shù)操作比較復(fù)雜，診斷所需的價格也比較昂貴，所以不適合常規(guī)臨床應(yīng)用。隨著近些年分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展與完善，為母血母血胎兒DNA檢測成為可能，同時也為妊娠并發(fā)癥篩查與無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷開辟新途徑。

研究表明，母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)存在相關(guān)性，而且宮頸長度也和胎兒早產(chǎn)呈現(xiàn)相關(guān)性，隨著宮頸長度的縮短，母血胎兒DNA會逐漸增加。

[參考文獻]

[1] 梁峰冰.先兆早產(chǎn)孕婦牙周病、血清細胞因子水平與妊娠結(jié)局的關(guān)系[D].杭州：浙江大學(xué)，2005：120-121.

[2] 琚竹梅.妊娠早期孕婦外周血中胎兒游離DNA的定量分析[D].太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2005：1369-1370.

[3] 張春利.脂代謝相關(guān)基因ADRP和LPL在妊娠高血壓綜合征胎盤組織中的表達及意義[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2005：184-186.

[4] 陶紅.母外周血母血胎兒DNA與子癇前期的相關(guān)性研究[D].青島：青島大學(xué)，2005：148-149.

[5] 羅軼楠.硫酸鎂防治妊高征的臨床分析[J].醫(yī)學(xué)信息，2011（7上旬刊）：120-121.

[6] 張倩.母血母血胎兒DNA及宮頸變化與早產(chǎn)的相關(guān)性研究[D].青島：青島大學(xué)，2007：154-155.

[7] 孫陽，楊茵.多胎妊娠妊娠期并發(fā)癥及臨床處理分析[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2004（5）：158-159.

[8] 張怡梅.孕婦外周血胎兒DNA定量檢測及其在臨產(chǎn)、早產(chǎn)預(yù)測中的臨床意義[D].青島：青島大學(xué)，2008：179-180.

（收稿日期：2014-04-15）endprint

孫陽等[7]對母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)相關(guān)性研究結(jié)果表明，孕婦在孕周為35周時，胎兒DNA平均濃度為74拷貝/mL，在晚孕的情況下，母血胎兒DNA和孕周呈現(xiàn)正相關(guān)性，而且每周呈29.3%的增加趨勢，同時胎兒血漿中總DNA濃度和產(chǎn)婦孕周并沒有相關(guān)關(guān)系，然而，總的來說，母血胎兒DNA與總DNA濃度呈正相關(guān)性，由此表明，母血母血胎兒DNA可以作為早產(chǎn)的重要指標(biāo)。對比12位足月產(chǎn)孕婦與早產(chǎn)孕婦血漿中母血胎兒DNA，結(jié)果顯示，發(fā)生自發(fā)性早產(chǎn)前，就在孕婦血漿中檢測到母血胎兒DNA比較高，對其進行相應(yīng)保胎治療后，母血胎兒DNA出現(xiàn)一定程度的下降情況，在該研究中，實驗組孕婦對比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.6±52.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.5±57.4）拷貝/mL，實驗組與對照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與孫陽等[7]人研究結(jié)果具有一致性。所以，母血胎兒DNA可當(dāng)做篩查早產(chǎn)的重要指標(biāo)。

3.2 宮頸長度和母血胎兒DNA的關(guān)系

對于正常孕周的孕婦而言，其宮頸長度會隨著其孕周時間的增加出現(xiàn)宮頸長度縮短的情況，而對于早產(chǎn)孕婦而言，其宮頸縮短的情況相比于正常孕婦，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[8]。此外，隨著先兆早產(chǎn)孕婦宮頸的不斷縮短，其母血胎兒DNA會呈現(xiàn)不斷升高的情況，由此可見，母血胎兒DNA和宮頸長度呈現(xiàn)負相關(guān)性。

無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷在近些年始終是我國學(xué)者進行研究的探索途徑與主要思路。而由孕婦血中將胎兒細胞分離出來屬于無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的范疇，然而，因為胎兒細胞量比較少，而且分離和富集技術(shù)操作比較復(fù)雜，診斷所需的價格也比較昂貴，所以不適合常規(guī)臨床應(yīng)用。隨著近些年分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展與完善，為母血母血胎兒DNA檢測成為可能，同時也為妊娠并發(fā)癥篩查與無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷開辟新途徑。

研究表明，母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)存在相關(guān)性，而且宮頸長度也和胎兒早產(chǎn)呈現(xiàn)相關(guān)性，隨著宮頸長度的縮短，母血胎兒DNA會逐漸增加。

[參考文獻]

[1] 梁峰冰.先兆早產(chǎn)孕婦牙周病、血清細胞因子水平與妊娠結(jié)局的關(guān)系[D].杭州：浙江大學(xué)，2005：120-121.

[2] 琚竹梅.妊娠早期孕婦外周血中胎兒游離DNA的定量分析[D].太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2005：1369-1370.

[3] 張春利.脂代謝相關(guān)基因ADRP和LPL在妊娠高血壓綜合征胎盤組織中的表達及意義[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2005：184-186.

[4] 陶紅.母外周血母血胎兒DNA與子癇前期的相關(guān)性研究[D].青島：青島大學(xué)，2005：148-149.

[5] 羅軼楠.硫酸鎂防治妊高征的臨床分析[J].醫(yī)學(xué)信息，2011（7上旬刊）：120-121.

[6] 張倩.母血母血胎兒DNA及宮頸變化與早產(chǎn)的相關(guān)性研究[D].青島：青島大學(xué)，2007：154-155.

[7] 孫陽，楊茵.多胎妊娠妊娠期并發(fā)癥及臨床處理分析[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2004（5）：158-159.

[8] 張怡梅.孕婦外周血胎兒DNA定量檢測及其在臨產(chǎn)、早產(chǎn)預(yù)測中的臨床意義[D].青島：青島大學(xué)，2008：179-180.

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孫陽等[7]對母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)相關(guān)性研究結(jié)果表明，孕婦在孕周為35周時，胎兒DNA平均濃度為74拷貝/mL，在晚孕的情況下，母血胎兒DNA和孕周呈現(xiàn)正相關(guān)性，而且每周呈29.3%的增加趨勢，同時胎兒血漿中總DNA濃度和產(chǎn)婦孕周并沒有相關(guān)關(guān)系，然而，總的來說，母血胎兒DNA與總DNA濃度呈正相關(guān)性，由此表明，母血母血胎兒DNA可以作為早產(chǎn)的重要指標(biāo)。對比12位足月產(chǎn)孕婦與早產(chǎn)孕婦血漿中母血胎兒DNA，結(jié)果顯示，發(fā)生自發(fā)性早產(chǎn)前，就在孕婦血漿中檢測到母血胎兒DNA比較高，對其進行相應(yīng)保胎治療后，母血胎兒DNA出現(xiàn)一定程度的下降情況，在該研究中，實驗組孕婦對比，先兆早產(chǎn)轉(zhuǎn)歸，其中真性早產(chǎn)患者有20例，胎兒DNA平均濃度值是（625.6±52.3）拷貝/mL，假性早產(chǎn)患者有10例，胎兒DNA平均濃度值是（220.5±57.4）拷貝/mL，實驗組與對照組產(chǎn)婦相比，假性早產(chǎn)升高比較明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與孫陽等[7]人研究結(jié)果具有一致性。所以，母血胎兒DNA可當(dāng)做篩查早產(chǎn)的重要指標(biāo)。

3.2 宮頸長度和母血胎兒DNA的關(guān)系

對于正常孕周的孕婦而言，其宮頸長度會隨著其孕周時間的增加出現(xiàn)宮頸長度縮短的情況，而對于早產(chǎn)孕婦而言，其宮頸縮短的情況相比于正常孕婦，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[8]。此外，隨著先兆早產(chǎn)孕婦宮頸的不斷縮短，其母血胎兒DNA會呈現(xiàn)不斷升高的情況，由此可見，母血胎兒DNA和宮頸長度呈現(xiàn)負相關(guān)性。

無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷在近些年始終是我國學(xué)者進行研究的探索途徑與主要思路。而由孕婦血中將胎兒細胞分離出來屬于無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的范疇，然而，因為胎兒細胞量比較少，而且分離和富集技術(shù)操作比較復(fù)雜，診斷所需的價格也比較昂貴，所以不適合常規(guī)臨床應(yīng)用。隨著近些年分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展與完善，為母血母血胎兒DNA檢測成為可能，同時也為妊娠并發(fā)癥篩查與無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷開辟新途徑。

研究表明，母血母血胎兒DNA與早產(chǎn)存在相關(guān)性，而且宮頸長度也和胎兒早產(chǎn)呈現(xiàn)相關(guān)性，隨著宮頸長度的縮短，母血胎兒DNA會逐漸增加。

[參考文獻]

[1] 梁峰冰.先兆早產(chǎn)孕婦牙周病、血清細胞因子水平與妊娠結(jié)局的關(guān)系[D].杭州：浙江大學(xué)，2005：120-121.

[2] 琚竹梅.妊娠早期孕婦外周血中胎兒游離DNA的定量分析[D].太原：山西醫(yī)科大學(xué)，2005：1369-1370.

[3] 張春利.脂代謝相關(guān)基因ADRP和LPL在妊娠高血壓綜合征胎盤組織中的表達及意義[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2005：184-186.

[4] 陶紅.母外周血母血胎兒DNA與子癇前期的相關(guān)性研究[D].青島：青島大學(xué)，2005：148-149.

[5] 羅軼楠.硫酸鎂防治妊高征的臨床分析[J].醫(yī)學(xué)信息，2011（7上旬刊）：120-121.

[6] 張倩.母血母血胎兒DNA及宮頸變化與早產(chǎn)的相關(guān)性研究[D].青島：青島大學(xué)，2007：154-155.

[7] 孫陽，楊茵.多胎妊娠妊娠期并發(fā)癥及臨床處理分析[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2004（5）：158-159.

[8] 張怡梅.孕婦外周血胎兒DNA定量檢測及其在臨產(chǎn)、早產(chǎn)預(yù)測中的臨床意義[D].青島：青島大學(xué)，2008：179-180.

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