孫紅兵 樊秀婷 龔莉華 (復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院眼科，上海 201700)

腫瘤進(jìn)展中血管新生明顯，對(duì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖及腫瘤分化有重要作用〔1，2〕。SOX18是編碼轉(zhuǎn)錄因子的發(fā)育基因，可以和其他轉(zhuǎn)錄因子或配體形成復(fù)合體，調(diào)控靶基因的表達(dá)，SOX18可能對(duì)腫瘤細(xì)胞的脈管生成和增殖有一定價(jià)值〔3，4〕。整合素αvβ3是細(xì)胞黏附分子的重要成員，不僅對(duì)細(xì)胞黏附起重要調(diào)控作用，還對(duì)細(xì)胞分化、凋亡和血管生成有一定價(jià)值〔5〕。白細(xì)胞分化抗原34(CD34)被認(rèn)為是血管的重要標(biāo)志物，其特異性強(qiáng)〔6〕。本研究關(guān)注眼瞼基底細(xì)胞癌患者術(shù)后組織SOX18、整合素αvβ3表達(dá)對(duì)CD34陽性血管生成的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 我院手術(shù)治療的眼瞼基底細(xì)胞癌患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織為研究組，樣本均經(jīng)病理醫(yī)師再次確診，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，共105例，男55例，女50例，年齡56～86歲，平均71.2歲。術(shù)前均未進(jìn)行放療和化療。55例基底細(xì)胞乳頭狀瘤術(shù)后組織為對(duì)照組，其中男30例，女25例，年齡57～84歲，平均65.2歲。兩組一般臨床特征無明顯差別，具有可比性。

1.2 SOX18、整合素 αvβ3和CD34蛋白的表達(dá) SOX18、整合素αvβ3和CD34的濃縮液，正式檢測(cè)前均進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇染色強(qiáng)度最理想、背景最干凈的配比濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。應(yīng)用免疫組化SABC法，采用DAB染色。操作由病理科主管技師完成，嚴(yán)格質(zhì)量控制，努力減少誤差。

1.3 SOX18、整合素αvβ3和CD34蛋白表達(dá)的判定 CD34以血管內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)染成棕黃色進(jìn)行判斷，以3個(gè)以上連續(xù)的內(nèi)皮細(xì)胞或分支的血管認(rèn)定為腫瘤間質(zhì)的血管，選擇5個(gè)密度最高的區(qū)域(400倍)進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值計(jì)為微血管密度(MVD)。SOX18以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃的顆粒為陽性反應(yīng)細(xì)胞，整合素αvβ3以細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。SOX18、整合素αvβ3均計(jì)數(shù)5個(gè)400倍視野的細(xì)胞總數(shù)，計(jì)算陽性率的平均值。SOX18和整合素αvβ3以陽性細(xì)胞≥5%為陽性，以＜5%為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或線性相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組 SOX18、整合素 αvβ3和 MVD的比較 研究組SOX18、整合素αvβ3陽性率，MVD值明顯高于對(duì)照組(P均＜0.001)。見表1。

2.2 研究組SOX18、整合素αvβ3和MVD與臨床特征的關(guān)系研究組SOX18、整合素αvβ3和MVD的表達(dá)均與腫瘤最大徑、脈管累犯、TNM分期和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)指數(shù)密切相關(guān)(P均＜0.05)。見表2。

表1 兩組SOX18、整合素αvβ3陽性表達(dá)和MVD比較〔n(%)〕

表2 研究組SOX18、整合素αvβ3陽性表達(dá)和MVD與臨床特征的關(guān)系〔n(%)〕

2.3 研究組SOX18、整合素αvβ3和MVD相關(guān)性分析 研究組 SOX18和整合素 αvβ3(r=0.48，P=0.025 4)、SOX18 和MVD(r=0.58，P=0.008 3)、整合素 αvβ3 和 MVD(r=0.54，P=0.011 3)均具有正相關(guān)性。

3 討論

基底細(xì)胞癌主要發(fā)生于老年人，眼瞼是重要的好發(fā)部位。臨床特征為具有珍珠樣形態(tài)伴毛細(xì)血管擴(kuò)張，表面為丘疹或結(jié)節(jié)，可伴有糜爛或潰瘍〔7，8〕。部分類型可以表現(xiàn)為片狀紅斑，類似于皮炎〔9〕。近來人們發(fā)現(xiàn)基底細(xì)胞癌是基因?qū)W異常和遺傳學(xué)改變相關(guān)的腫瘤〔10〕?；准?xì)胞癌在形成和進(jìn)展過程中常出現(xiàn)間質(zhì)血管的新生。而對(duì)于實(shí)性基底細(xì)胞癌常伴有明顯的血管擴(kuò)張，由于血管過多的生長(zhǎng)及腫瘤對(duì)其破壞，局部可以出現(xiàn)典型的出血性改變〔11，12〕?；准?xì)胞癌的生長(zhǎng)依賴于血管生成，此時(shí)腫瘤中癌基因和血管生成對(duì)促進(jìn)腫瘤進(jìn)展有重要價(jià)值〔13〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)對(duì)腫瘤間質(zhì)血管生成具有重要促進(jìn)作用。而CD34是重要的血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物〔14〕。VEGF對(duì)CD34陽性的血管密度有明顯促進(jìn)作用。此時(shí)腫瘤間質(zhì)中CD34陽性的血管生成多，腫瘤局部供應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)豐富，腫瘤生成和代謝快，侵襲能力增加，轉(zhuǎn)移潛能增強(qiáng)〔15〕。SOX18作為轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)的基因，具有一個(gè)HMG基序保守區(qū)〔16〕，其功能有:①參與組織的發(fā)育、血細(xì)胞的生成，神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育等〔17〕。②SOX18是維持干細(xì)胞全能性的重要基因〔18〕。③SOX18參與血細(xì)胞的生成和心血管發(fā)育，④SOX18是T細(xì)胞和B細(xì)胞發(fā)生過程中的轉(zhuǎn)錄因子〔19〕。因此，SOX18的功能多樣，其對(duì)腫瘤的作用也可能與血管的生成有關(guān)〔20〕。整合素αvβ3由αv亞基和β3亞基形成的跨膜異二聚體糖蛋白，其能識(shí)別配體分子中的精-甘-天冬序列，這類配體包括 FN、VN、TSP-1 和 vWF 等〔21〕。整合素αvβ3參與多種細(xì)胞的活動(dòng)過程，同時(shí)對(duì)腫瘤間質(zhì)血管生成、侵襲性生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及傷口愈合等有重要作用〔22〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示SOX18、整合素αvβ3可以有效促進(jìn)CD34陽性的腫瘤間質(zhì)血管的生成。SOX18、整合素αvβ3的促癌作用類似癌基因，其常與相關(guān)配體結(jié)合后發(fā)揮作用。由于基底細(xì)胞癌的生長(zhǎng)過程中常依賴血管的生成，因此促進(jìn)腫瘤血管生成因素同樣具有促進(jìn)癌進(jìn)展的作用。聯(lián)合檢測(cè)SOX18、整合素αvβ3和MVD的表達(dá)可能預(yù)示著基底細(xì)胞癌的進(jìn)展。即SOX18、整合素αvβ3和MVD高表達(dá)腫瘤生長(zhǎng)加快、侵犯脈管和增殖活性強(qiáng)等。SOX18和整合素αvβ3具有直接促進(jìn)CD34陽性血管生成的作用。SOX18和整合素αvβ3均能引起腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生多種多樣的血管生成的信號(hào)或因子，此時(shí)腫瘤血管伸長(zhǎng)，管腔擴(kuò)張。SOX18、整合素αvβ3引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，并通過內(nèi)皮細(xì)胞前體細(xì)胞分化后形成內(nèi)皮依賴性血管，此時(shí)腫瘤體積增大的速度明顯加快〔23，24〕。

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