王玉寶

(安徽省蚌埠市第一人民醫(yī)院，安徽蚌埠 233000)

韓信草S.indica為唇形科黃芩屬植物，具有祛風(fēng)，活血，解毒，止痛功效。主治跌打損傷，吐血，咳血，癰腫，疔毒，喉風(fēng)，牙痛，在安徽省境內(nèi)有廣泛分布［1］。韓信草中主要活性成分為黃酮類化合物［2］，為了更好地開發(fā)利用韓信草的資源，筆者對韓信草中黃酮類成分進行了研究，從中分離并鑒定了5個黃酮類化合物，分別為芹菜素(1)、木犀草素(2)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(3)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(4)和 hemipholin(5)，其中化合物3～5首次從該植物中分離得到，現(xiàn)報道如下。

1 材料

Bruker AV-400、500型核磁共振儀，LCQ DecaXP Plus ESI-MS型液/質(zhì)聯(lián)用儀(Thermo Finnigan公司)，Büchi B-540熔點儀，ODS(十八烷基硅烷鍵合硅膠 40～60 μm，美國 Sepax公司)，Sephadex LH-20(羥丙基葡聚糖凝膠，瑞典 GE公司)，MCI Gel樹脂(70～150 μm，日本三菱公司)，氘代試劑為美國CIL公司產(chǎn)品;薄層色譜、柱色譜硅膠及硅膠GF254薄層色譜硅膠板均為青島海洋化工廠產(chǎn)品。藥材提取用試劑為工業(yè)純，柱色譜試劑均為分析純。

藥材于2012年采自安徽黃山，由安徽中醫(yī)藥大學(xué)王成永教授鑒定為唇形科黃芩屬植物韓信草Scutellaria indica L.

2 提取與分離

干燥的韓信草全草8 kg粉碎成粗粉，95%乙醇加熱回流提取3次，每次3 h，提取液減壓濃縮得浸膏386 g，與硅藻土(1∶1)拌樣，依次用石油醚、乙酸乙酯、甲醇抽提，分別得到石油醚萃取浸膏98 g，乙酸乙酯萃取浸膏89 g，甲醇萃取浸膏126 g。取乙酸乙酯浸膏，經(jīng)硅膠(100～200目)柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)梯度洗脫(100∶1～1∶1)，得到粗分流分，石油醚-乙酸乙酯 (20∶1，15∶1)洗脫流份再經(jīng)硅膠、Sephadex LH-20反復(fù)柱色譜得到化合物1(200 mg)，2(100 mg);取甲醇部位浸膏經(jīng)MCI Gel柱層析，以甲醇-水(3∶2)洗脫，得粗流分、再經(jīng) ODS、Sephadex LH-20反復(fù)柱色譜得到化合物3(20 mg)，4(25 mg)和5(15 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

圖1 韓信草中分離得到的黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)式

化合物 1:黃色粉末 (二氯甲烷)。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δH:12.96(1H，s，5-OH)，7.03(2H，d，J=9Hz，H-2'，6')，6.94(2H，d，J=8.5 Hz，H-3'，5')，6.77(1H，s，H-3)，6.49(1H，d，J=2Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=2 Hz，H-6)。13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δC:181.7(C-4)，164.2(C-2)，163.8(C-7)，161.5(C-2)，161.2(C-4')，157.3(C-4)，128.7(C-2'，C-6')，121.2(C-1')，115.9(C-3'，C-5')，103.7(C-10)，102.8(C-3)，98.9(C-6)，93.9(C-8)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道［3］數(shù)據(jù)基本一致，鑒定化合物為芹菜素(apigenin)。

化合物2:淡黃色粉末(甲醇)。TLC鑒別在254 nm紫外光照下有暗斑，在365nm紫外光照射下有黃色熒光，10%H2SO4-C2H5OH溶液顯色后為黃色。用三種不同展開系統(tǒng)鑒別，其Rf值與木犀草素對照品一致，故鑒定化合物為木犀草素(luteolin)。

化合物3:黃色粉末(水)。1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δH:5.13(1H，d，J=7.4 Hz，H-1'')，6.79 H，s，H-3)，6.92(2H，d，J=8.6 Hz，H-3'，H-5')，7.89(2H，d，J=8.6 Hz，H-2'，H-6')。13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δC:182.1(C-4)，173.4(C-6'')，163.1(C-7)，161.9(C-4')，157.1(C-9)，128.6(C-2'，C-6')，120.8(C-1')，116.2(C-3'，C-5')，103.1(C-3)，99.6(C-1'')，94.9(C-8)，76.5(C-3'')，74.5(C-5'')，73.1(C-2'')，72.1(C-4'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道［4］數(shù)據(jù)基本一致，鑒定化合物為芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(apigenin-7-O-β-D-pyranglycuronide)。

化合物4:黃色粉末(水)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δH:12.98(1H，s，5-OH)，7.42(2H，d，J=8.2Hz，H-6'，2')，6.89(1H，d，J=8.1Hz，H-5')，6.77(1H，s，H-8)，6.71(1H，s，H-3)，6.42(1H，s，H-6)，5.14(1H，d，J=7.32Hz，H-1'')，3.75(1H，d，J=9.6Hz，H-5'')。13C NMR(DMSO-d6，100MHz)δC:182.0(C-4)，173.1(C-6'')，164.7(C-2)，163.1(C-7、C-9)，157.1(C-5)，150.8(C-4')，146.2(C-3')，121.1(C-6')，119.3(C-1')，116.2(C-5')，113.6(C-2')，103.1(C-10)，99.7(C-1''、C-6)，94.2(C-8)，76.4(C-3'')，74.5(C-5'')，73.1(C-2'')，72.1(C-4'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道［5］數(shù)據(jù)基本一致，鑒定化合物為:木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(luteolin-7-O-β-D-pyranglycuronide)。

化合物 5:黃色粉末(水)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δH:7.31(2H，d，J=8.5Hz，H-2'，H-6')，6.81(2H，d，J=8.5Hz，H-3'，H-5')，5.95(1H，s，H-8)，5.36(1H，dd，J=2.8，12.5Hz，H-2)，4.13(1H，m，H-2'')，3.86(1H，dd，J=1.8，12.0Hz，H-6'')，3.72(1H，dd，J=5.3，12.1Hz，H-6'')，3.41-3.44(2H，m，H-3''，H-5'')，3.15(1H，dd，J=12.6，17.1 Hz，H-3)，2.76(1H，dd，J=2.1，14.0Hz，H-3)。13C NMR(CD3OD，100MHz)δC:198.0(C-4)，167.5(C-7)，164.2(C-5、C-9)，159.1(C-4')，131.0(C-1')，129.0(C-2'、C-6')，116.4(C-3'、C-5')，106.0(C-6)，103.2(C-10)，96.5(C-8)，82.5(C-5'')，80.5(C-2)，80.2(C-3'')，75.2(C-1'')，72.7(C-2'')，71.8(C-4')，62.9(C-6')，43.9(C-3)。鑒定化合物為:hemipholin。

［1］ 歐金梅，邵 徐，楊青山.安徽太湖山常用藥用植物資源調(diào)查［J］.安徽醫(yī)藥，2012，16(1):139 －140.

［2］ Kim SW，Cuong TD，Hung TM，et al.Arginase II inhibitory activity of flavonoid compounds from Scutellaria indica［J］.Arch Pharm Res，2013，36(8):922 －926.

［3］ 張 祎，鄧 屾，李曉霞，等.益母草化學(xué)成分的分離與結(jié)構(gòu)鑒定 II［J］.中國藥物化學(xué)雜志，2013，23(6):480 －485.

［4］ 程戰(zhàn)立，時巖鵬，種小桃，等.藏紫菀化學(xué)成分的研究(Ⅱ)［J］.中草藥，2011，42(1):42 －45.

［5］ 孫 苙，馬曉斌，劉建勛.野菊花心血管活性部位化學(xué)成分的研究［J］.中國中藥雜志，2012，37(1):61 －64.