寧欣

[摘要] 目的 探討吸煙對大鼠血清CD3、CD4、CD8 T淋巴細胞和IgA、IgG、IgM及補體含量影響的時間效應(yīng)。 方法 雄性健康清潔級Wistar大鼠30只，隨機分為對照組和煙草煙霧暴露組，每組15只大鼠。對照組暴露于正常飼養(yǎng)環(huán)境，煙草煙霧暴露組每日暴露于煙草煙霧環(huán)境30 min，每日2次。兩組大鼠分別于煙草煙霧暴露時（T0）、煙草煙霧暴露1個月（T1）、煙草煙霧暴露2個月（T2）、煙草煙霧暴露3個月（T3）、煙草煙霧暴露4個月（T4）、煙草煙霧暴露5個月（T5）和煙草煙霧暴露6個月（T6）時采內(nèi)眥靜脈血，檢測血清CD3、CD4、CD8 T淋巴細胞的含量，測定IgA、IgG、IgM、C4、C3含量。 結(jié)果 煙草煙霧暴露組CD3、CD4 T淋巴細胞自T3時逐漸下降（P < 0.05），CD8 T淋巴細胞自T4時逐漸上升（P < 0.05），對照組各指標各時點間均無明顯差異。與對照組比較，煙草煙霧暴露組T3～T6時CD3和CD4 T淋巴細胞含量均明顯減少（P < 0.05），CD8 T淋巴細胞含量均明顯增多（P < 0.05）。T4～T6時，對照組IgG、IgM和C4含量均明顯高于煙草煙霧暴露組（P < 0.05）。煙草煙霧暴露組IgG、IgM和C4、C3自T4時逐漸下降；對照組各指標各時間點間均無明顯差異。 結(jié)論 煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月。短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損，具體機制尚需進一步研究證實。

[關(guān)鍵詞] 吸煙；細胞免疫；體液免疫

[中圖分類號] R562.25 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）11（c）-0004-04

Influence of smoking on rats' immune system function

NING Xin

Jinqiu Hospital of Liaoning Province， Liaoning Province， Shenyang 110015， China

[Abstract] Objective To explore the effect of smoking on the time effect of rats' serum CD3， CD4， CD8 T lymphocytes and IgA， IgG， IgM and complement content. Methods Thirty male healthy Wistar rats of clean grade were randomly divided into control group and tobacco smoke exposure group， with 15 rats in each group. The control group were exposed to normal feeding environment， tobacco smoke exposure group were daily exposed to environmental tobacco smoke for 30 minutes， 2 times a day. Two groups of rats were exposed to tobacco smoke （T0）， exposure to tobacco smoke for 1 month （T1）， exposure to tobacco smoke for 2 months （T2）， exposure to tobacco smoke for 3 months （T3）， exposure to tobacco smoke for 4 months （T4）， exposure to tobacco smoke for 5 months （T5） and tobacco smoke exposure for 6 months （T6） by inside canthus vein blood， them serum CD3， CD4， CD8 content of T lymphocytes and IgA， IgG， IgM， C4， C3 content were detected. Results CD3， CD4 T lymphocytes in tobacco smoke exposure group showed gradually decreased from T3 （P < 0.05）， CD8 T lymphocytes gradually increased from T4 （P < 0.05）， those in control group showed no significant difference. At T3 to T6， compared with those in the control group， CD3 and CD4 T lymphocyte content of tobacco smoke exposure group were less significantly （P < 0.05）， CD8 were more （P < 0.05）. At T4 to T6， IgG， IgM and C4 content in control group were significantly higher than those in tobacco smoke exposure group （P< 0.05）. From T4， IgG， IgM and C4， C3 in tobacco smoke exposure group showed decreased gradually； the differences of each index in control group at each time point showed no significance. Conclusion Tobacco smoke exposure time window of damage cellular immunity is 3 months. The impact of short-term smoking on humoral immune function is little， long-term can cause humoral immune function gradually damaged， the specific mechanism still needs further study to confirm.

[Key words] Smoking； Cellular immunity； Humoral immunity

吸煙是人體將煙草燃燒后的氣體經(jīng)過口腔吸入機體內(nèi)，對機體各部位均會產(chǎn)生危害。研究發(fā)現(xiàn)，吸煙導(dǎo)致腦部血管痙攣出現(xiàn)中風(fēng)現(xiàn)象，導(dǎo)致血液中的血小板黏性增高，出現(xiàn)冠脈血栓的形成，進一步增加心肌梗死的發(fā)病率；吸煙能引致肺部支氣管上皮細胞的不規(guī)則變化及運動出現(xiàn)障礙，同時導(dǎo)致上皮細胞纖毛變短，使肺部支氣管抵抗力下降，導(dǎo)致感染甚至發(fā)生肺癌[1]；煙草中的尼古丁及燃燒后產(chǎn)生的一氧化碳使骨骼的再生進度延緩，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松加速；煙草還可使胃、腸道、肝臟、眼及生殖系統(tǒng)等各器官受到不同程度的損傷。吸煙不但是一種不健康的自身生活習(xí)慣，同時也會對周圍環(huán)境產(chǎn)生污染，吸煙時噴出的煙霧是一種非常強烈的刺激物質(zhì)，這種物質(zhì)可散發(fā)4000余種氣體和粒子，這些氣體和粒子中不但至少有40種會使機體致癌[2]，而且這些粒子在吸煙停止無煙霧噴出時仍能在空氣中停留數(shù)小時，期間這些氣體和粒子可被周圍非吸煙人士吸入機體內(nèi)，亦可能和氡氣的衰變產(chǎn)物混合一起，造成周圍人群的更大傷害。長期處于這種環(huán)境下同樣可導(dǎo)致氣管炎、癌癥等不治之癥的發(fā)生[3]。吸煙已成為社會公共衛(wèi)生問題，雖然有各種疾病的患病風(fēng)險[4]，但是中國吸煙人群仍超過3億，煙草消耗量占世界的33.34%[5]。吸煙時煙草燃燒都會產(chǎn)生使人體免疫力受損的有毒物質(zhì)，這些物質(zhì)在吸煙產(chǎn)生的主流煙霧和環(huán)境煙霧中存在，目前對煙霧會使對機體免疫力下降的相關(guān)因素還沒有明確闡明[6]。本研究通過將大鼠分不同時間段暴露于吸煙產(chǎn)生的煙霧中，觀察大鼠的免疫系統(tǒng)變化（細胞免疫和體液免疫），進一步研究吸煙的時間效應(yīng)對機體免疫功能改變影響，為探討如何降低煙草對機體的危害提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

選取由中國醫(yī)科大學(xué)實驗中心提供的雄性Wistar大鼠30只為實驗動物，大鼠月齡2個月，平均體重為（230±10）g，屬健康清潔級實驗動物。大鼠均先進行1周的順應(yīng)性養(yǎng)殖，養(yǎng)殖過程中嚴密監(jiān)控大鼠的活動及飲食情況；依據(jù)大鼠自身的重量，隨機分為對照組及煙草煙霧暴露組，每組各15只。給予標準飼料進行常規(guī)喂養(yǎng)，室溫設(shè)置為（22.50±2.40）℃，相對濕度在50%～65%，自然光線下喂養(yǎng)。于煙草煙霧暴露即刻（T0）、1個月（T1）、2個月（T2）、3個月（T3）、4個月（T4）、5個月（T5）和6個月（T6）等不同時間段分別對兩組大鼠乙醚麻醉，采內(nèi)眥靜脈血，進行檢測。

1.2 主要實驗試劑及設(shè)備

選擇每支煙焦油含量12 mg，煙氣煙堿量1.2 mg的沈陽煙廠生產(chǎn)的市售某香煙作為染毒用煙，采用PE標記的CD4、CD8單克隆抗體（美國，BD Pharmingen.）；FITC標記的抗CD3單克隆抗體（美國，Invitrogen Corp.）；EPICS XL型流式細胞儀（美國，Beckman Coulter Inc.）；選用由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所的DWRD-2型號的動式氣體染毒裝置。

1.3 染毒方法

將15只煙草煙霧暴露組大鼠全部置于動式氣體染毒裝置中暴露，對染毒物質(zhì)進行燃燒，使燃燒后產(chǎn)生的煙霧接連泵入該裝置中的染毒室內(nèi)，染毒時需具備如下條件：染毒室內(nèi)煙霧濃度（泵入染毒裝置內(nèi)煙霧體積占整個箱體空氣體積的百分比）達到50%，氧氣濃度達到（21.0±0.5）%，室內(nèi)溫度達到（22±2）℃，室內(nèi)相對濕度達到（58±1）%，室內(nèi)壓力達到 （101 325±40）Pa。染毒時間為每周5 d，每天進行2次，每次持續(xù)30 min[7]。煙草煙霧暴露組大鼠在非染毒時期與對照組大鼠在同一環(huán)境下飼養(yǎng)，運動及進食飲水等活動自由。

1.4 采集樣本及檢測

采集大鼠外周靜脈血（內(nèi)眥靜脈血）2 mL，給予二乙胺四乙酸（EDTA）抗凝，要求室溫下保存，在標本中加入CD3、CD4或CD8等單克隆抗體，將其震蕩并混和均勻，再存入4℃下冰箱內(nèi)保存30 min，加入適量紅細胞進行溶解；反復(fù)給予離心、棄上清等操作，直至試管底部無紅色為止；應(yīng)用多聚甲醛固定液進行標本固定，應(yīng)用EPICS XL型流式細胞儀（美國，Beckman Coulter Inc）檢測[8]。每個標本進行計數(shù)，數(shù)量為10 000個細胞，然后對陽性細胞百分比進行計算。按試劑盒說明書測定IgA、IgG、IgM、C4、C3含量。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

將所得數(shù)據(jù)輸入SPSS 16.0統(tǒng)計學(xué)軟件，以均數(shù)±標準差（x±s）表示計量資料，相同時間點的兩組間比較及不同時間比較分別采用兩樣本t檢驗或t′檢驗（方差不齊時）及重復(fù)測量方差分析，當Mauchly球形檢驗假設(shè)資料不滿足時，采用Greenhouse-Geisser ε校正系數(shù)作為校正自由度；以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

煙草煙霧暴露組CD3、CD4 T淋巴細胞自T3時逐漸下降（P < 0.05），CD8 T淋巴細胞自T4時逐漸上升（P < 0.05），對照組各指標各時點間均無明顯差異。與對照組比較，煙草煙霧暴露組T3～T6時CD3和CD4 T淋巴細胞含量均減少（P < 0.05），CD8 T淋巴細胞含量均明顯增多（P < 0.05）。T4～T6時，對照組IgG、IgM和C4含量均明顯高于煙草煙霧暴露組（P < 0.05）。煙草煙霧暴露組IgG、IgM和C4、C3自T4時逐漸下降；對照組各指標各時間點間均無明顯差異。見表1。

3 討論

通過對統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析并研究，結(jié)果表明，大鼠在煙草煙霧暴露3個月時間內(nèi)，大鼠的細胞免疫功能損害程度不顯著，大鼠在煙草煙霧暴露3個月時間后，大鼠的細胞免疫功能開始受損明顯并逐漸下降，從這一結(jié)果分析可見：煙草煙霧暴露對機體免疫系統(tǒng)的細胞免疫損害程度是在煙草煙霧暴露累計到一定時間后產(chǎn)生明顯作用，并呈現(xiàn)逐步蓄積繼而嚴重的過程。

研究顯示，人類發(fā)生各種呼吸系統(tǒng)及各器官的疾病均與煙草煙霧有關(guān)。目前已被國際癌癥研究機構(gòu)評價并確認的致癌物中明確表示，煙草中含有的致癌物有60余種[10]，因此，長期生活在煙草煙霧環(huán)境中，發(fā)生各種呼吸系統(tǒng)及各器官疾病的機會顯著增高[11]，職業(yè)緊張因素如工作關(guān)系、工作難度以及決定自由度等與吸煙關(guān)系密切。為了防止由于主動及被動吸煙而導(dǎo)致的疾病發(fā)生，WHO早已制訂了“反吸煙”的主要行動策略及實現(xiàn)的目標[12]。

本研究的開展更加確定了機體細胞免疫功能破壞程度與主動或被動吸入煙草煙霧的時間長短的關(guān)系，在煙草煙霧暴露3個月后，將CD3、CD4和CD8 T淋巴細胞含量進行對照組與暴露組比較，暴露組出現(xiàn)顯著改變，其中發(fā)生顯著改變的T淋巴細胞還包括：總T淋巴細胞、細胞毒性T淋巴細胞和輔助性T淋巴細胞，打破了細胞免疫的平衡狀態(tài)，提示機體細胞免疫功能在短時期吸煙內(nèi)受損傷程度不明顯，主動或被動吸入煙草煙霧的時間長短與機體細胞免疫功能破壞程度成正比，即時間越長，機體破壞越嚴重。這也預(yù)示著吸煙時間越長，對機體的危害越嚴重。

本研究將大鼠分兩組進行實驗，且在煙草煙霧暴露的不同時間段進行動態(tài)觀察，即從煙草煙霧暴露即刻（T0）開始，每小時進行1次監(jiān)測，至煙草煙霧暴露6個月（T6）止，分別進行7次各相關(guān)指標的記錄，此研究雖只對大鼠進行了6個月的動態(tài)監(jiān)測，與長期吸煙人群所接觸的環(huán)境無法模擬，但可促進有益健康的生產(chǎn)、生活方式的形成，減少和控制職業(yè)相關(guān)疾病與行為的發(fā)生[13]。

煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月，具體損傷機制尚需進一步探討闡述證明。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，大鼠機體體液免疫功能受損在煙草煙霧暴露3個月內(nèi)不明顯，在煙草煙霧暴露3個月后大鼠的機體體液免疫功能開始逐步降低，提示在煙草煙霧中暴露的時間長短與機體細胞免疫功能破壞程度成正比，且呈現(xiàn)逐步蓄積繼而嚴重的進程。煙霧中有毒物質(zhì)可對機體免疫系統(tǒng)造成廣泛的影響，其中尼古丁不僅可導(dǎo)致免疫反應(yīng)抑制，而且可引起T細胞免疫失衡[14]。IgA、IgG、IgM水平降低，是一種免疫功能降低的表現(xiàn)[15-16]。本研究通過7個時間點，觀察被動吸煙對免疫功能的損傷過程，結(jié)果明確了煙草煙霧暴露對體液免疫損傷的時間效應(yīng)，IgG、IgM和C4在暴露3個月后明顯降低，C3及IgA分別在暴露第5個月及第6個月后發(fā)生改變，提示短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損，具體機制尚需進一步研究證實[17]。

綜上所述，煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月，短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損。

[參考文獻]

[1] Leuraud K，Billon S，Bergot D，et al. Lung cancer risk associated to exposure to radon and smoking in a case-control study of French uranium miners [J]. Health Phys，2007，82（4）：371-378.

[2] Tchounwou PB，Patlolla AK，Centeno JA. Carcinogenic and systemic health effects associated with arsenic exposure：a critical review [J]. Toxicol Pathol，2003，31（6）：575-588.

[3] Hoffmann D，Hoffmann I，Bayoumy K. The less harmful cigarette：a controversial issue [J]. Chem Res Toxicol，2001， 14（7）：767-780.

[4] 李愛蘭，黃悅勤，王燕玲，等.我國青少年學(xué)生吸煙行為及其影響因素的初步分析[J].中國公共衛(wèi)生，2001，17（1）：752-771.

[5] 楊愛紅，胡慶東，李光武，等.小鼠被動吸煙引發(fā)成癮性及對免疫指標影響[J].中國公共衛(wèi)生，2008，25（1）：77-78.

[6] 周巖，羅廷光，毛文，等.云南省云縣不同性別人群吸煙及被動吸煙調(diào)查[J].中國公共衛(wèi)生，2008，25（10）：1188-1181.

[7] 李景姝，宮建，陳麗萍，等.吸煙對大鼠T淋巴細胞免疫時間效應(yīng)影響[J].中國公共衛(wèi)生，2013，6（10）：826-827.

[8] 朱永超，宮建，鄭剛，等.重度燒傷休克患者早期炎癥因子的改變[J].遼寧中醫(yī)雜志，2013，8（18）：1615-1616.

[8] 王昆鵬，宮建，白宇.丙泊酚和異氟醚對顱內(nèi)腫瘤患者抗炎性因子的影響[J].天津醫(yī)藥，2012，8（15）：831-832.

[10] 傅濤，郝選明，劉智強.運動應(yīng)激對小鼠T淋巴細胞亞群和周期的影響[J].內(nèi)蒙古體育科技，2010，（3）：46-48.

[11] 李廣群.Rosiglitazone防治慢性支氣管炎肺氣腫的作用機制研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，4（8）：108-111.

[12] 靳如芳，郭舜，張金曉，等.甘草次酸衍生物TY501對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（2）：22-24.

[13] 張金山，趙潔，李臻，等.模擬失重降低大鼠血清和下頜下腺Ghrelin水平[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（15）：28-31.

[14] Goyal N，Shukla G. Probiotic Lactobacillus rhamnosus GG Modulates the Mucosal Immune Response in Giardia intestinalis-Infected BALB/c Mice[J]. Dig Dis Sci，2012，58（5）：1218-1225.

[15] 劉芳，楊華，周文江，等.氣霧攻擊法感染結(jié)核病小鼠模型的建立及其綜合評價[J].中國實驗動物學(xué)報，2012，20（1）：30-33.

[16] 宮建.亞慢性過量氟暴露對大鼠CRP、C3、C4及Lc影響的研究[D].沈陽：中國醫(yī)科大學(xué)，2007.

[17] 羅千古，周玖瑤，李毓祺，等.黃芪丹參提取液對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，8（2）：23-24.

（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：蘇 暢）

研究顯示，人類發(fā)生各種呼吸系統(tǒng)及各器官的疾病均與煙草煙霧有關(guān)。目前已被國際癌癥研究機構(gòu)評價并確認的致癌物中明確表示，煙草中含有的致癌物有60余種[10]，因此，長期生活在煙草煙霧環(huán)境中，發(fā)生各種呼吸系統(tǒng)及各器官疾病的機會顯著增高[11]，職業(yè)緊張因素如工作關(guān)系、工作難度以及決定自由度等與吸煙關(guān)系密切。為了防止由于主動及被動吸煙而導(dǎo)致的疾病發(fā)生，WHO早已制訂了“反吸煙”的主要行動策略及實現(xiàn)的目標[12]。

本研究的開展更加確定了機體細胞免疫功能破壞程度與主動或被動吸入煙草煙霧的時間長短的關(guān)系，在煙草煙霧暴露3個月后，將CD3、CD4和CD8 T淋巴細胞含量進行對照組與暴露組比較，暴露組出現(xiàn)顯著改變，其中發(fā)生顯著改變的T淋巴細胞還包括：總T淋巴細胞、細胞毒性T淋巴細胞和輔助性T淋巴細胞，打破了細胞免疫的平衡狀態(tài)，提示機體細胞免疫功能在短時期吸煙內(nèi)受損傷程度不明顯，主動或被動吸入煙草煙霧的時間長短與機體細胞免疫功能破壞程度成正比，即時間越長，機體破壞越嚴重。這也預(yù)示著吸煙時間越長，對機體的危害越嚴重。

本研究將大鼠分兩組進行實驗，且在煙草煙霧暴露的不同時間段進行動態(tài)觀察，即從煙草煙霧暴露即刻（T0）開始，每小時進行1次監(jiān)測，至煙草煙霧暴露6個月（T6）止，分別進行7次各相關(guān)指標的記錄，此研究雖只對大鼠進行了6個月的動態(tài)監(jiān)測，與長期吸煙人群所接觸的環(huán)境無法模擬，但可促進有益健康的生產(chǎn)、生活方式的形成，減少和控制職業(yè)相關(guān)疾病與行為的發(fā)生[13]。

煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月，具體損傷機制尚需進一步探討闡述證明。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，大鼠機體體液免疫功能受損在煙草煙霧暴露3個月內(nèi)不明顯，在煙草煙霧暴露3個月后大鼠的機體體液免疫功能開始逐步降低，提示在煙草煙霧中暴露的時間長短與機體細胞免疫功能破壞程度成正比，且呈現(xiàn)逐步蓄積繼而嚴重的進程。煙霧中有毒物質(zhì)可對機體免疫系統(tǒng)造成廣泛的影響，其中尼古丁不僅可導(dǎo)致免疫反應(yīng)抑制，而且可引起T細胞免疫失衡[14]。IgA、IgG、IgM水平降低，是一種免疫功能降低的表現(xiàn)[15-16]。本研究通過7個時間點，觀察被動吸煙對免疫功能的損傷過程，結(jié)果明確了煙草煙霧暴露對體液免疫損傷的時間效應(yīng)，IgG、IgM和C4在暴露3個月后明顯降低，C3及IgA分別在暴露第5個月及第6個月后發(fā)生改變，提示短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損，具體機制尚需進一步研究證實[17]。

綜上所述，煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月，短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損。

[參考文獻]

[1] Leuraud K，Billon S，Bergot D，et al. Lung cancer risk associated to exposure to radon and smoking in a case-control study of French uranium miners [J]. Health Phys，2007，82（4）：371-378.

[2] Tchounwou PB，Patlolla AK，Centeno JA. Carcinogenic and systemic health effects associated with arsenic exposure：a critical review [J]. Toxicol Pathol，2003，31（6）：575-588.

[3] Hoffmann D，Hoffmann I，Bayoumy K. The less harmful cigarette：a controversial issue [J]. Chem Res Toxicol，2001， 14（7）：767-780.

[4] 李愛蘭，黃悅勤，王燕玲，等.我國青少年學(xué)生吸煙行為及其影響因素的初步分析[J].中國公共衛(wèi)生，2001，17（1）：752-771.

[5] 楊愛紅，胡慶東，李光武，等.小鼠被動吸煙引發(fā)成癮性及對免疫指標影響[J].中國公共衛(wèi)生，2008，25（1）：77-78.

[6] 周巖，羅廷光，毛文，等.云南省云縣不同性別人群吸煙及被動吸煙調(diào)查[J].中國公共衛(wèi)生，2008，25（10）：1188-1181.

[7] 李景姝，宮建，陳麗萍，等.吸煙對大鼠T淋巴細胞免疫時間效應(yīng)影響[J].中國公共衛(wèi)生，2013，6（10）：826-827.

[8] 朱永超，宮建，鄭剛，等.重度燒傷休克患者早期炎癥因子的改變[J].遼寧中醫(yī)雜志，2013，8（18）：1615-1616.

[8] 王昆鵬，宮建，白宇.丙泊酚和異氟醚對顱內(nèi)腫瘤患者抗炎性因子的影響[J].天津醫(yī)藥，2012，8（15）：831-832.

[10] 傅濤，郝選明，劉智強.運動應(yīng)激對小鼠T淋巴細胞亞群和周期的影響[J].內(nèi)蒙古體育科技，2010，（3）：46-48.

[11] 李廣群.Rosiglitazone防治慢性支氣管炎肺氣腫的作用機制研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，4（8）：108-111.

[12] 靳如芳，郭舜，張金曉，等.甘草次酸衍生物TY501對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（2）：22-24.

[13] 張金山，趙潔，李臻，等.模擬失重降低大鼠血清和下頜下腺Ghrelin水平[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（15）：28-31.

[14] Goyal N，Shukla G. Probiotic Lactobacillus rhamnosus GG Modulates the Mucosal Immune Response in Giardia intestinalis-Infected BALB/c Mice[J]. Dig Dis Sci，2012，58（5）：1218-1225.

[15] 劉芳，楊華，周文江，等.氣霧攻擊法感染結(jié)核病小鼠模型的建立及其綜合評價[J].中國實驗動物學(xué)報，2012，20（1）：30-33.

[16] 宮建.亞慢性過量氟暴露對大鼠CRP、C3、C4及Lc影響的研究[D].沈陽：中國醫(yī)科大學(xué)，2007.

[17] 羅千古，周玖瑤，李毓祺，等.黃芪丹參提取液對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，8（2）：23-24.

（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：蘇 暢）

研究顯示，人類發(fā)生各種呼吸系統(tǒng)及各器官的疾病均與煙草煙霧有關(guān)。目前已被國際癌癥研究機構(gòu)評價并確認的致癌物中明確表示，煙草中含有的致癌物有60余種[10]，因此，長期生活在煙草煙霧環(huán)境中，發(fā)生各種呼吸系統(tǒng)及各器官疾病的機會顯著增高[11]，職業(yè)緊張因素如工作關(guān)系、工作難度以及決定自由度等與吸煙關(guān)系密切。為了防止由于主動及被動吸煙而導(dǎo)致的疾病發(fā)生，WHO早已制訂了“反吸煙”的主要行動策略及實現(xiàn)的目標[12]。

本研究的開展更加確定了機體細胞免疫功能破壞程度與主動或被動吸入煙草煙霧的時間長短的關(guān)系，在煙草煙霧暴露3個月后，將CD3、CD4和CD8 T淋巴細胞含量進行對照組與暴露組比較，暴露組出現(xiàn)顯著改變，其中發(fā)生顯著改變的T淋巴細胞還包括：總T淋巴細胞、細胞毒性T淋巴細胞和輔助性T淋巴細胞，打破了細胞免疫的平衡狀態(tài)，提示機體細胞免疫功能在短時期吸煙內(nèi)受損傷程度不明顯，主動或被動吸入煙草煙霧的時間長短與機體細胞免疫功能破壞程度成正比，即時間越長，機體破壞越嚴重。這也預(yù)示著吸煙時間越長，對機體的危害越嚴重。

本研究將大鼠分兩組進行實驗，且在煙草煙霧暴露的不同時間段進行動態(tài)觀察，即從煙草煙霧暴露即刻（T0）開始，每小時進行1次監(jiān)測，至煙草煙霧暴露6個月（T6）止，分別進行7次各相關(guān)指標的記錄，此研究雖只對大鼠進行了6個月的動態(tài)監(jiān)測，與長期吸煙人群所接觸的環(huán)境無法模擬，但可促進有益健康的生產(chǎn)、生活方式的形成，減少和控制職業(yè)相關(guān)疾病與行為的發(fā)生[13]。

煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月，具體損傷機制尚需進一步探討闡述證明。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，大鼠機體體液免疫功能受損在煙草煙霧暴露3個月內(nèi)不明顯，在煙草煙霧暴露3個月后大鼠的機體體液免疫功能開始逐步降低，提示在煙草煙霧中暴露的時間長短與機體細胞免疫功能破壞程度成正比，且呈現(xiàn)逐步蓄積繼而嚴重的進程。煙霧中有毒物質(zhì)可對機體免疫系統(tǒng)造成廣泛的影響，其中尼古丁不僅可導(dǎo)致免疫反應(yīng)抑制，而且可引起T細胞免疫失衡[14]。IgA、IgG、IgM水平降低，是一種免疫功能降低的表現(xiàn)[15-16]。本研究通過7個時間點，觀察被動吸煙對免疫功能的損傷過程，結(jié)果明確了煙草煙霧暴露對體液免疫損傷的時間效應(yīng)，IgG、IgM和C4在暴露3個月后明顯降低，C3及IgA分別在暴露第5個月及第6個月后發(fā)生改變，提示短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損，具體機制尚需進一步研究證實[17]。

綜上所述，煙草煙霧暴露損傷細胞免疫的時間窗為3個月，短期吸煙對體液免疫功能影響不大，長期可致體液免疫功能逐漸受損。

[參考文獻]

[1] Leuraud K，Billon S，Bergot D，et al. Lung cancer risk associated to exposure to radon and smoking in a case-control study of French uranium miners [J]. Health Phys，2007，82（4）：371-378.

[2] Tchounwou PB，Patlolla AK，Centeno JA. Carcinogenic and systemic health effects associated with arsenic exposure：a critical review [J]. Toxicol Pathol，2003，31（6）：575-588.

[3] Hoffmann D，Hoffmann I，Bayoumy K. The less harmful cigarette：a controversial issue [J]. Chem Res Toxicol，2001， 14（7）：767-780.

[4] 李愛蘭，黃悅勤，王燕玲，等.我國青少年學(xué)生吸煙行為及其影響因素的初步分析[J].中國公共衛(wèi)生，2001，17（1）：752-771.

[5] 楊愛紅，胡慶東，李光武，等.小鼠被動吸煙引發(fā)成癮性及對免疫指標影響[J].中國公共衛(wèi)生，2008，25（1）：77-78.

[6] 周巖，羅廷光，毛文，等.云南省云縣不同性別人群吸煙及被動吸煙調(diào)查[J].中國公共衛(wèi)生，2008，25（10）：1188-1181.

[7] 李景姝，宮建，陳麗萍，等.吸煙對大鼠T淋巴細胞免疫時間效應(yīng)影響[J].中國公共衛(wèi)生，2013，6（10）：826-827.

[8] 朱永超，宮建，鄭剛，等.重度燒傷休克患者早期炎癥因子的改變[J].遼寧中醫(yī)雜志，2013，8（18）：1615-1616.

[8] 王昆鵬，宮建，白宇.丙泊酚和異氟醚對顱內(nèi)腫瘤患者抗炎性因子的影響[J].天津醫(yī)藥，2012，8（15）：831-832.

[10] 傅濤，郝選明，劉智強.運動應(yīng)激對小鼠T淋巴細胞亞群和周期的影響[J].內(nèi)蒙古體育科技，2010，（3）：46-48.

[11] 李廣群.Rosiglitazone防治慢性支氣管炎肺氣腫的作用機制研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，4（8）：108-111.

[12] 靳如芳，郭舜，張金曉，等.甘草次酸衍生物TY501對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（2）：22-24.

[13] 張金山，趙潔，李臻，等.模擬失重降低大鼠血清和下頜下腺Ghrelin水平[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（15）：28-31.

[14] Goyal N，Shukla G. Probiotic Lactobacillus rhamnosus GG Modulates the Mucosal Immune Response in Giardia intestinalis-Infected BALB/c Mice[J]. Dig Dis Sci，2012，58（5）：1218-1225.

[15] 劉芳，楊華，周文江，等.氣霧攻擊法感染結(jié)核病小鼠模型的建立及其綜合評價[J].中國實驗動物學(xué)報，2012，20（1）：30-33.

[16] 宮建.亞慢性過量氟暴露對大鼠CRP、C3、C4及Lc影響的研究[D].沈陽：中國醫(yī)科大學(xué)，2007.

[17] 羅千古，周玖瑤，李毓祺，等.黃芪丹參提取液對小鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，8（2）：23-24.

（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：蘇 暢）