梁秀英

（遼寧省鐵嶺市中醫(yī)醫(yī)院中草藥局飲片室，鐵嶺112000）

基于蒽酮-硫酸法則測(cè)定多糖含量的天麻飲片最佳炮制方法探討

梁秀英

（遼寧省鐵嶺市中醫(yī)醫(yī)院中草藥局飲片室，鐵嶺112000）

目的優(yōu)選天麻飲片炮制方法o方法通過(guò)鮮切法加工工藝及傳統(tǒng)加工炮制方法進(jìn)行天麻飲品的加工，并采用蒽酮-硫酸法進(jìn)行飲片中多糖含量的測(cè)定o結(jié)果不同炮制方法使方法天麻飲片中多糖含量高低不一致，其中真空冷凍干燥飲片多糖含量最高，余下自高到底排序?yàn)?鮮切飲片、蒸制飲片、半潤(rùn)透飲片、潤(rùn)透飲片o結(jié)論鮮切法加工工藝天麻飲片中多糖含量?jī)?yōu)于傳統(tǒng)加工炮制方法o通過(guò)不同炮制方法，測(cè)定天麻飲片中多糖含量的研究，為天麻飲片炮制工藝改進(jìn)提供理論依據(jù)o

天麻飲片；多糖含量；蒽酮-硫酸法；中藥炮制

天麻藥是一種名貴中藥，其藥用歷史悠久o具有平肝、熄風(fēng)的功效o臨床多用于治療頭暈?zāi)垦?、抽搐、驚厥、四肢麻木等癥候o天麻中含有多種有效成分，文獻(xiàn)報(bào)道：天麻含天麻素、香莢蘭醇、香莢蘭醛、琥珀酸、β-谷甾醇、維生素A樣物質(zhì)、苷類、生物堿、黏液質(zhì)和天麻多糖等［1］o其中關(guān)于天麻多糖的研究報(bào)道顯示：多糖具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能、改善心腦細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)、增加血流量、提高抗缺氧能力的作用，對(duì)小兒驚厥、癲癇、抽搐等臨床癥狀具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等功效，而且藥效時(shí)間達(dá)2～7天［2］o因此，研究不同炮制方法對(duì)天麻飲片中多糖含量的影響，為提高天麻飲片中的多糖含量提供臨床依據(jù)，提高天麻飲片的臨床療效o

1 材料與方法

1.1 研究材料UV-7200的分光光度儀器，藥材選用同樣大小、干燥潔凈的蘭科植物天麻的干燥塊莖作為研究材料o

1.2 炮制方法

1.2.1 鮮切法均選取300g新鮮天麻，用水沖洗干凈后晾干，將晾干后的天麻進(jìn)行薄片處理o

1.2.1.1 鮮切飲片將薄片處理后的天麻放入烘干機(jī)（60℃）中烘干，粉碎過(guò)篩o

1.2.1.2 真空冷凍干燥飲片將薄片處理后的天麻放置入真空干燥箱中24h，干燥后進(jìn)行粉碎過(guò)篩o

1.2.2 傳統(tǒng)工藝法選取按照《中國(guó)藥典》方法進(jìn)行炮制過(guò)的100g天麻藥材作為研究對(duì)象o

1.2.2.1 半潤(rùn)透切片將100g天麻藥材進(jìn)行快速洗淋，之后放于密閉容器中，每隔1小時(shí)進(jìn)行噴灑加水并翻動(dòng)藥材，每次加水10ml，共噴灑加水5次、計(jì)50ml，藥材經(jīng)過(guò)5h的浸潤(rùn)后形成半潤(rùn)透，將半潤(rùn)透的藥材取出并進(jìn)行切薄片處理，放入烘干機(jī)（60℃）中烘干，粉碎過(guò)篩o

1.2.2.2 潤(rùn)透切片將100g天麻藥材噴灑加水40m l并隨時(shí)翻動(dòng)，經(jīng)過(guò)24h浸潤(rùn)，使藥材全部潤(rùn)透，取出并進(jìn)行切薄片處理，置入真空干燥箱中干燥，進(jìn)行粉碎過(guò)篩o

1.2.1.3 蒸制切片將100g天麻藥材快速洗淋，之后置于己圓氣的蒸鍋中進(jìn)行隔水蒸10分鐘，蒸至藥材軟硬適宜可以進(jìn)行薄片處理為宜o取出并進(jìn)行切薄片處理，置入真空干燥箱中干燥，進(jìn)行粉碎過(guò)篩o

1.3 含量測(cè)定方法

1.3.1 制備對(duì)照品稱取采用105℃干燥到恒重的無(wú)水葡萄糖100mg作為對(duì)照品，將其放置入100ml的容量瓶中，配置成濃度為1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液［3］o

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別取1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液20、30、40、50、60μl，將取出的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別采用蒸餾水進(jìn)行定容至50m l，依次取定容后的標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml，置入具塞試管中［4］o取0.2% 蒽酮-硫酸試劑4ml分別加入試管中搖勻，將試管共同放入沸水中10min，取出后采用流水進(jìn)行冷卻至室溫o在490nm處測(cè)吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(表1)，得到方程：A=44.54C-0.017（R= 0.995）o

表1 葡萄糖質(zhì)量濃度測(cè)定標(biāo)曲線

1.3.2 方法學(xué)考察精密度實(shí)驗(yàn)：精密提取對(duì)照品溶液40μl，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法進(jìn)行5次測(cè)定吸光度，結(jié)果顯示吸收度良好，RSD為1.46%，表明儀器精密度良好o

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：精密吸取供試品溶液1.0m l于具塞干燥試管中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法進(jìn)行6次測(cè)定吸光度，每0.5h一次測(cè)定吸光度其穩(wěn)定性o測(cè)定結(jié)果顯示供試品溶液在3h內(nèi)穩(wěn)定性良好，RSD為1.90%o

加樣回收實(shí)驗(yàn)：準(zhǔn)確稱取1g蒸制切片樣品，將樣品平均分為5份；取干燥至恒重的無(wú)水葡萄糖94.25mg，放置于100m l容器瓶中，加入蒸餾水至刻度；準(zhǔn)確量取其溶液10ml，依次加入5份樣品中，按照制備方法操作，測(cè)定其吸收度，結(jié)果平均回收率為100.1%，RSD為3.4%o

1.3.3 各飲片多糖含量測(cè)定取經(jīng)過(guò)4h進(jìn)行減壓干燥的各樣品細(xì)粉約0.25g，采用精密儀器稱重，置圓底燒瓶中，加石油醚(60～90℃)150mlo水浴中回流1h，趁熱抽濾，殘?jiān)脽崾兔?60～90℃)滌3次，每次10ml，將殘?jiān)盀V紙置燒瓶中，加10%乙醇200m l沸水浴中加熱回流1h，趁熱抽濾，殘?jiān)盀V紙置燒瓶用熱10%乙醇洗滌4次，每次10ml，合并濾液與洗液，放冷，轉(zhuǎn)移至250m l量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取1m l，置10m l具塞干燥試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自加水至2.0ml起，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含無(wú)水葡萄糖的重量(mg)，計(jì)算得出多糖含量[5]o見(jiàn)表2o

2 結(jié)果

不同炮制品中的天麻多糖含量明顯低于生品飲片o經(jīng)方差分析，有顯著性差異(P＜0.05)o

表2 天麻炮制品種多糖吸光度含量測(cè)定結(jié)果（%）

3 討論

天麻的多糖含量測(cè)定選用蒽酮-濃硫酸法，通過(guò)采用60～90℃的石油醚提?。?］，以除去樹(shù)脂等干擾性成分、低濃度醇提取多糖類成分，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確提取各種量品，在時(shí)間及溫度的控制上應(yīng)精確o

植物多糖的提取常采用水煎煮法進(jìn)行，但在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中顯示通過(guò)水提取的多糖出現(xiàn)樹(shù)脂化問(wèn)題較嚴(yán)重［7］o采用提取溶劑低濃度醇，并在溫度較低的情況下進(jìn)行提取，天麻多糖的提取效果更有效，而且對(duì)通過(guò)水煎煮法提取造成的樹(shù)脂化的問(wèn)題可以顯著改善o

本實(shí)驗(yàn)研究顯示：不同方法測(cè)定天麻飲片中多糖含量高低不一致，其中真空冷凍干燥飲片多糖含量最高，余下自高到底排序?yàn)椋乎r切飲片、蒸制飲片、半潤(rùn)透飲片、潤(rùn)透飲片o綜上所述，鮮切法加工工藝測(cè)定天麻飲片中多糖含量?jī)?yōu)于傳統(tǒng)加工炮制方法，通過(guò)測(cè)定不同炮制方法，天麻飲片中多糖含量的研究，為天麻飲片炮制工藝改進(jìn)提供理論依據(jù)o

[1]孫靜，王昌利，杜鵑.不同炮制方法對(duì)天麻飲片中多糖含量影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(11)：2773-2774.

[2]翟宇君.天麻藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)及H P L C指紋圖譜研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2009.

[3]張夢(mèng)娟.天麻多糖的提取、純化及活性研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2007.

[4]韓江偉.蒙藥材瑞香狼毒的炮制工藝及含量測(cè)定方法的研究[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，2010.

[5]朱曉霞.羅學(xué)剛，天麻多糖水提及脫蛋白工藝優(yōu)化[J].中藥材，2007，30(6): 724.

[6]朱曉霞，羅學(xué)剛.天麻多糖提取工藝優(yōu)化[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18(4):906.

[7]劉玉潭，梁華，蔡永萍，等.天麻多糖提取純化方法及性質(zhì)的初步研究[J].激光生物學(xué)報(bào)，2007，16(4):495.

LIANG Xiuying
(
Yinpian Chamber， Bureau of Chinese Herbal Medicine， Tieling City Hospital of Traditional Chinese Medicine， Liaoning Province， Tieling 112000， China）

ObjectiveTo optimizE The processing method of gastrodia elata pieces.MethodsThrough the fresh cut processing technology and traditional machining of gastrodia elata in different methods，the anthracene ketone-sulfuric acid method was used to determinE The polysaccharide content in gastrodia elata pieces.ResultsDifferent processing methods making the content of polysaccharide content in gastrodia elata pieces was different，the polysaccharide content of the vacuum freeze drying was the highest，followed by fresh cut s pieces，steamed，seminourishes pieces and nourishes pieces.ConclusionFresh cut processing technology of determinatioN Of polysaccharide in gastrodia elata pieces was superior to thE Traditional processing method.Through different processing methods，research on content determinatioN Of polysaccharide in gastrodia elatapieces provided theoretical basis for the improvement of gastrodia elata pieces processing technology.

gastrodia elata pieces;polysaccharide content;anthrone-sulfuric acid method;Chinese medicine processing

1672-2779（2015）-23-0003-03

：李海燕本文校對(duì)：楊濤

2015-09-14）