李彩云，潘學(xué)營(yíng)，張 超，宋 征，常 艷

（國家上海新藥安全評(píng)價(jià)研究中心，上海 201203）

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸福利的研究進(jìn)展

李彩云，潘學(xué)營(yíng)，張 超，宋 征，常 艷

（國家上海新藥安全評(píng)價(jià)研究中心，上海 201203）

運(yùn)輸是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)的必要環(huán)節(jié)，運(yùn)輸過程的裝卸、裝載密度、運(yùn)輸時(shí)間、禁食禁水、運(yùn)輸籠盒、環(huán)境溫度等因素如控制不當(dāng)，均會(huì)使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生應(yīng)激。本文介紹了國內(nèi)外動(dòng)物運(yùn)輸福利法規(guī)，從運(yùn)輸過程中對(duì)被運(yùn)輸動(dòng)物產(chǎn)生應(yīng)激影響的因素進(jìn)行了探討，總結(jié)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸中減少動(dòng)物應(yīng)激的措施和方法。

運(yùn)輸；動(dòng)物福利；應(yīng)激

現(xiàn)代生物技術(shù)和生物醫(yī)藥的快速發(fā)展推動(dòng)了生物醫(yī)藥研究中基礎(chǔ)的研究體系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)的發(fā)展。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在國際和國內(nèi)的增長(zhǎng)顯著，尤其是近20年國際知名醫(yī)藥企業(yè)的涌入，全面提升了國內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)的整體水平。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)的發(fā)展必然導(dǎo)致生產(chǎn)和使用的分離，運(yùn)輸是銜接實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用的必要環(huán)節(jié)。運(yùn)輸環(huán)節(jié)對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利和健康的影響和干擾已受到公認(rèn)。本文主要關(guān)注機(jī)構(gòu)之間實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸，介紹國內(nèi)外動(dòng)物運(yùn)輸福利法規(guī)、運(yùn)輸對(duì)于動(dòng)物產(chǎn)生的影響，以及對(duì)如何改善和提升動(dòng)物運(yùn)輸福利的各個(gè)關(guān)鍵方面進(jìn)行概括和論述。

1 國內(nèi)外動(dòng)物運(yùn)輸法規(guī)

1.1 國際法規(guī)

針對(duì)動(dòng)物運(yùn)輸福利法的規(guī)定以歐盟的法律法規(guī)早而齊全，從最早的1964年出臺(tái)的64/432/EEC，經(jīng)過多次修改和補(bǔ)充，到現(xiàn)行的1/2005/EC法案，內(nèi)容包括了對(duì)動(dòng)物運(yùn)輸車輛、運(yùn)輸物種、生理階段、年齡和性別、運(yùn)輸時(shí)間、食水供應(yīng)、停車休息、裝卸設(shè)施、運(yùn)輸記錄裝置、防疫、檢疫等做了相應(yīng)的細(xì)致規(guī)定［1］。此外1988年德國頒布《保護(hù)在容器中的

1.2 國內(nèi)法規(guī)

國內(nèi)在動(dòng)物運(yùn)輸方面的法規(guī)相對(duì)起步晚。在我國針對(duì)動(dòng)物運(yùn)輸相關(guān)內(nèi)容有提到的法律法規(guī)有《進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》、《動(dòng)物防疫法》、《野生動(dòng)物保護(hù)法》；《水生野生動(dòng)物保護(hù)實(shí)施條例》、《進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法實(shí)施條例》、《水路運(yùn)輸管理?xiàng)l例》、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》；民航總局《中國民用航空貨物國內(nèi)運(yùn)輸規(guī)則》、國家林業(yè)局《活體野生動(dòng)物運(yùn)輸要求》、農(nóng)業(yè)部《動(dòng)物檢疫管理辦法》和《動(dòng)物免疫標(biāo)識(shí)管理辦法》等部門規(guī)章制度的內(nèi)容主要涉及動(dòng)物運(yùn)輸及其過程中的檢疫和免疫問題［7］。上述我國的法律法規(guī)僅包含動(dòng)物運(yùn)輸過程中的檢疫、防疫、標(biāo)識(shí)等方面的規(guī)定和一些規(guī)定運(yùn)輸物種的限制，對(duì)動(dòng)物運(yùn)輸過程中的福利問題幾乎沒有涉及，且內(nèi)容描述簡(jiǎn)單。目前我國尚無明確的動(dòng)物運(yùn)輸法規(guī)。而涉及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸?shù)姆ㄒ?guī)是1988年我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)唯一的一部國家行政法規(guī)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，第二十一條規(guī)定“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸工作應(yīng)當(dāng)有專人負(fù)責(zé)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的裝運(yùn)工具應(yīng)當(dāng)安全、可靠。不得將不同品種、品系或者不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物混合裝運(yùn)”。其他部分省市修訂的地方立法，如《北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》、《湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》和《云南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸?shù)囊笈c《條例》基本一致?！秾?shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》國標(biāo)第9章節(jié)提出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸?shù)囊螅藢?duì)于動(dòng)物籠具結(jié)構(gòu)、材質(zhì)、和設(shè)計(jì)要求，運(yùn)輸工具配備空調(diào)設(shè)備的要求，運(yùn)輸超過6h，需要提供飲食和飲水［8］。相對(duì)于國際動(dòng)物運(yùn)輸法規(guī)，國內(nèi)法律法規(guī)略顯簡(jiǎn)單，對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸過程的指導(dǎo)、辨別和借鑒效果不明顯。

2 運(yùn)輸對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響

運(yùn)輸對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的最重要的影響是應(yīng)激。運(yùn)輸應(yīng)激的外在表現(xiàn)為反應(yīng)激烈、恐懼或抑郁、異常發(fā)聲、攻擊性加強(qiáng)、心跳和呼吸頻率加快、體溫變化等；運(yùn)輸后動(dòng)物飲食飲水減少或廢絕、疲乏衰弱、腹瀉或排便減少、脫水、甚至導(dǎo)致疾病無法恢復(fù)、死亡［9］。造成的體內(nèi)變化表現(xiàn)為各種酶和激素的異常，如皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、加壓素、甲狀腺激素、若干轉(zhuǎn)氨酶、脫氫酶、肌酸磷酸激酶等濃度變化；此外運(yùn)輸饑餓造成游離脂肪酸、beta-羥基丁酸酯、血糖、尿素以及血液生化參數(shù)的變化［10］。以上運(yùn)輸應(yīng)激不僅妨礙實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身心健康，降低其福利水平，且可導(dǎo)致對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的背景性干擾。

2.1 裝卸

動(dòng)物敏銳的感官使得對(duì)任何不熟悉的景象和聲音異常警覺。裝卸過程中動(dòng)物面對(duì)不熟悉的景象和聲音不可難免。一些不適當(dāng)?shù)牟僮骺赡軙?huì)使動(dòng)物恐慌。裝卸對(duì)大型的高智商的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成應(yīng)激更大，例如比格犬在裝卸車的時(shí)候心率達(dá)到最高。非人靈長(zhǎng)類因運(yùn)輸應(yīng)激導(dǎo)致的行為改變可以持續(xù)到抵達(dá)后超過1個(gè)月［11］。

2.2 裝載密度

裝載密度決定了擁擠的程度，一般情況下幼齡動(dòng)物對(duì)于擁擠的適應(yīng)性比成年動(dòng)物更強(qiáng)［12］。裝載密度主要影響心率和血漿乳酸濃度，高密度裝載的動(dòng)物心率和乳酸濃度比中等密度和低密度的高；處于裝載車輛后面或中部圈欄的動(dòng)物比處于前面圈欄的動(dòng)物心率和乳酸濃度高［7］。

2.3 禁食禁水

出于方便運(yùn)輸?shù)哪康?，很多時(shí)候?qū)?dòng)物采用禁食禁水運(yùn)輸?shù)姆绞?。研究證明休息、食物和飲水可以不同程度地改善動(dòng)物福利［7］。歐盟現(xiàn)行規(guī)定運(yùn)輸動(dòng)物的飼喂間隔和飲水間隔分別不超過24h和12h［1］。中國國標(biāo)則要求運(yùn)輸時(shí)間超過6h以上需要提供飲食和水［8］。提供食物和飲水不僅補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和水分，也是緩解動(dòng)物緊張情緒和應(yīng)激反應(yīng)的手段。

2.4 顛簸或震動(dòng)

運(yùn)輸過程中的振動(dòng)和加速度對(duì)動(dòng)物的影響一直存在。有研究顯示運(yùn)輸過程中震動(dòng)的頻率使豬心率顯著提高，加速度會(huì)使這種影響更加顯著；粗糙路面上運(yùn)輸?shù)呐５膒H和心率比在柏油路面運(yùn)輸?shù)闹稻撸?］。此外，動(dòng)物的頭部朝向與行駛方向的角度對(duì)水平和橫向振動(dòng)有顯著影響，與行駛方向成直角的站姿比面向行駛方向的水平和橫向振動(dòng)更?。?4］。關(guān)于運(yùn)輸過程中震動(dòng)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響尚未有相關(guān)研究。

2.5 運(yùn)輸時(shí)間

運(yùn)輸時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)動(dòng)物影響顯著。Wistar大鼠血糖和血清皮質(zhì)酮在運(yùn)輸初期均升高［15］。短途運(yùn)輸比格犬對(duì)動(dòng)物的心肺生理參數(shù)影響顯著［16］；另外皮質(zhì)醇和鈉的濃度隨運(yùn)輸時(shí)間而顯著升高，心率和乳酸濃度隨運(yùn)輸時(shí)間而顯著降低［7］。在自由獲得干草和飲水的情況下長(zhǎng)途運(yùn)輸亦可導(dǎo)致動(dòng)物T3、T4濃度顯著升高［17］。

2.6 其他

運(yùn)輸時(shí)的外部環(huán)境溫度也影響運(yùn)輸福利的一個(gè)重要因素。極端天氣導(dǎo)致動(dòng)物運(yùn)輸過程中產(chǎn)生應(yīng)急、疾病的發(fā)生，甚至死亡。美國國家委員會(huì)推薦常見實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸中比較安全的外環(huán)境溫度范圍，小鼠、豚鼠和兔子建議在4℃～34℃，大鼠6℃～33℃，犬為10℃～28℃，恒河猴6℃～35℃［18］。帶有空調(diào)設(shè)施的運(yùn)輸車輛，運(yùn)輸過程對(duì)外界環(huán)境溫度的依賴變小，中國國家標(biāo)準(zhǔn)要求運(yùn)輸工具應(yīng)配備空調(diào)設(shè)備，運(yùn)輸內(nèi)環(huán)境溫度應(yīng)符合相應(yīng)的等級(jí)要求，如大小鼠運(yùn)輸車內(nèi)溫度為20℃～26℃［8］。一般情況下高溫天氣運(yùn)輸?shù)奈：Υ笥诘蜏靥鞖獾倪\(yùn)輸。包裝容器的材質(zhì)和合適程度也影響著被運(yùn)輸動(dòng)物的舒適度。航空運(yùn)輸動(dòng)物中造成的事故，因?yàn)榘b容器不合格，導(dǎo)致動(dòng)物逃逸占22％；造成動(dòng)物死亡的占10％［19］。

3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸?shù)母倪M(jìn)和完善方向

3.1 改善硬件設(shè)施和軟件程序減少運(yùn)輸應(yīng)激

硬件設(shè)施包括運(yùn)輸車輛和運(yùn)輸籠盒。適宜的運(yùn)輸車輛和籠盒能夠很大程度的改善動(dòng)物運(yùn)輸過程中的福利和應(yīng)激。例如小型嚙齒類需要專用運(yùn)輸箱，確保充分換氣和防止外面微生物污染；兔需要保證有自由的活動(dòng)空間，底板防滑，保持適當(dāng)?shù)臏囟群土己玫耐L(fēng)；犬和猴要求單只運(yùn)輸，留有足夠的空間讓動(dòng)物保持自然的姿態(tài)，足夠的通風(fēng)。運(yùn)輸裝載密度根據(jù)動(dòng)物的體重提供適當(dāng)?shù)牡酌娣e［8］。運(yùn)輸箱固定，防止急剎車或顛簸；給運(yùn)輸車輛配備導(dǎo)航系統(tǒng)和溫濕度監(jiān)控和調(diào)節(jié)裝置等。目前，國內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)供應(yīng)機(jī)構(gòu)基本上采用專用運(yùn)輸車和運(yùn)輸包裝箱運(yùn)送實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，提供符合動(dòng)物種屬和微生物級(jí)別的裝載籠具，運(yùn)輸期間保障對(duì)溫度和濕度的控制。軟件程序方面從運(yùn)輸方案、計(jì)劃和人員培訓(xùn)等各個(gè)方面進(jìn)行有效的提升和改善。設(shè)置合理的運(yùn)輸方案或計(jì)劃及應(yīng)激情況下的備用方案；安排運(yùn)輸負(fù)責(zé)人和緊急聯(lián)系人；提供動(dòng)物運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)人員包括司機(jī)陪同人員等進(jìn)行專業(yè)的動(dòng)物護(hù)理培訓(xùn)和福利培訓(xùn)；運(yùn)輸過程中供水供食，部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)商均考慮了長(zhǎng)途運(yùn)輸過程中供食飲水問題。例如在SPF動(dòng)物運(yùn)輸盒中提供果凍；給猴在運(yùn)輸籠中提供水果。最后盡量避免高溫天氣運(yùn)輸減少動(dòng)物應(yīng)激和死亡［20］。

3.2 采用干預(yù)的方式減少運(yùn)輸應(yīng)激

由于運(yùn)輸應(yīng)激的不可避免性，科研人員嘗試以主動(dòng)干預(yù)的模式來解決動(dòng)物運(yùn)輸應(yīng)激問題。目前研究發(fā)現(xiàn)酪氨酸和維生素E能使運(yùn)輸中的豬更多的趴臥和降低心率；酪氨酸、鎂離子、維生素E和維生素C配合制劑可以改善動(dòng)物應(yīng)對(duì)振動(dòng)和加速度的能力［21］；提供富含氨基酸和維生素的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑有助縮短小鼠短途運(yùn)輸后恢復(fù)所需時(shí)間［22］；另外抗氧化劑維生素C、維生素E、槲皮素和止痢草油在大鼠的運(yùn)輸過程中具有一定的抗運(yùn)輸應(yīng)激效果［23］；在運(yùn)輸前灌飼谷氨酞胺具有保護(hù)大鼠抵抗運(yùn)輸應(yīng)激的作用［24］。由維生素C、維生素E、碳酸氫鉀和γ-氨基丁酸制作的抗應(yīng)激復(fù)合添加劑對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃后，能降低大鼠運(yùn)輸應(yīng)激敏感性，起到抵抗運(yùn)輸應(yīng)激的作用［25］。

3.3 給動(dòng)物足夠的適應(yīng)期從運(yùn)輸應(yīng)激中恢復(fù)

目前在國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)應(yīng)對(duì)動(dòng)物運(yùn)輸應(yīng)激的最常用的方式是設(shè)定適應(yīng)期，讓動(dòng)物能夠自動(dòng)平復(fù)運(yùn)輸應(yīng)激帶來的身體可見或不可見的多種參數(shù)的變化。OECD規(guī)定大小鼠、豚鼠的適應(yīng)性飼養(yǎng)至少5d，兔至少6d，犬和非人靈長(zhǎng)類至少14d［26］。而中國FDA則規(guī)定嚙齒類動(dòng)物在進(jìn)行試驗(yàn)前至少需要適應(yīng)性飼養(yǎng)5d，非嚙齒類至少需要2周［27］。對(duì)于嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在接收后，接收單位均會(huì)按照慣例或研究需求和經(jīng)驗(yàn)設(shè)立一個(gè)1～7d不等的適應(yīng)期限［28］。上海市為例，針對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠的檢疫和適應(yīng)期均定為3～5d，部分單位定為1周。短途運(yùn)輸?shù)男∈蠛蚖istar大鼠常規(guī)需要72h的恢復(fù)期［16，22］。對(duì)于犬、猴等智商高等的動(dòng)物，運(yùn)輸應(yīng)激會(huì)持續(xù)1個(gè)月左右，因此非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的適應(yīng)時(shí)間通常大于1個(gè)月［11］。

4 結(jié)語

綜上所述，運(yùn)輸對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生應(yīng)激的因素是多方面的，如將動(dòng)物從熟悉的籠盒和種群中轉(zhuǎn)移；運(yùn)輸過程中將動(dòng)物單獨(dú)飼養(yǎng)或密集的群體飼養(yǎng)；裝載在不熟悉的運(yùn)輸容器中；裝卸和運(yùn)輸途中的運(yùn)動(dòng)和震動(dòng)；為保證平衡導(dǎo)致的緊張，特別是大動(dòng)物；不熟悉的信息、聲音和氣味；溫度的波動(dòng)，尤其是極端溫度；黑暗；運(yùn)輸過程中被停止供食供水等。如何改善和減少運(yùn)輸?shù)膽?yīng)激和影響，一方面從硬件運(yùn)輸設(shè)備上改善，另一方面操作程序的合理可控能有效減少應(yīng)激，改善動(dòng)物運(yùn)輸福利；再者運(yùn)輸后給予動(dòng)物合適的適應(yīng)期來平復(fù)運(yùn)輸應(yīng)激是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)的主流方式，但是我們需要在這方面有更多的研究證明和確定一個(gè)合理的適應(yīng)期；采用干擾物質(zhì)減低運(yùn)輸應(yīng)激是一個(gè)新的研究方向，但尚未成為主流形式，仍然需要有更多的研究數(shù)據(jù)來支持可行性。最后從根本上我國在動(dòng)物運(yùn)輸法律法規(guī)方面較為欠缺，需要建立起一個(gè)規(guī)范合適的制度來保證動(dòng)物運(yùn)輸過程中的福利得到有效保障。

［1］1/2005/EC：Council Regulation（EC）No 1/2005 of 22 December 2004 on the protection of animals during transport and related operations and amending Directives 64/432/EEC and 93/119/EC and Regulation（EC）No 1255/97［EB/OL］.

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［28］Obernier J A，Baldwin R L.Establishing an appropriate period of acclimatization following transportation of laboratory animals［J］.ILAR J，2006，47（4）：364-369.

Research progress of transportation welfare for laboratory animal

LI Cai-yun，PAN Xue-ying，ZHANG Chao，SONG Zheng，CHANG Yan
（National Shanghai Center for New Drug Safety Evaluation and Research，Shanghai，201203，China）

Transportation is essential in laboratory animal field.If control is improperly，stress occurs to the laboratory animal in terms of loading and unloading，density，transporting duration，fasting，handle cages and temperature，etc.during transportation.This article elaborates laws and regulations on animal transportation both domestically and oversea，discusses the factors that cause stress to laboratory animals during transportation，summarizes measures and methods tominimize the stress to lab animals in transportation.

Transportation；Animal welfare；Stress

R-332

A

1671-7856（2015）11-0086-04

10.3969.j.issn.1671-7856.2015.11.018

李彩云（1983-），女，獸醫(yī)學(xué)碩士，助理研究員，國家上海新藥安全評(píng)價(jià)研究中心，E-mail：cyli@ncdser.com。

常艷（1974-）女，藥理學(xué)博士，研究員，AAALAC檢查顧問，國家上海新藥安全評(píng)價(jià)研究中心，E-mail：ychang@ncdser.com。運(yùn)輸動(dòng)物的條例》中列出動(dòng)物在運(yùn)輸中的福利要求；1997年英國頒布了專門的《動(dòng)物運(yùn)輸法案》，限定了運(yùn)輸時(shí)間和運(yùn)輸過程中的動(dòng)物福利要求［2］。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸參考和使用的法律法規(guī)，航空運(yùn)輸方面以IATA列出的國際航空運(yùn)輸活體動(dòng)物的規(guī)章制度是商業(yè)航空運(yùn)輸活體動(dòng)物的通用國際標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)容包括包裝箱的設(shè)計(jì)和結(jié)構(gòu)、溫度、食物和飲水等有要求［3］；AVMA則要求在動(dòng)物運(yùn)輸過程中有專業(yè)人員陪同，合理的保定動(dòng)物和運(yùn)輸過程中動(dòng)物福利保障，對(duì)于相關(guān)人員需要提供專業(yè)培訓(xùn)等［4］；AAALAC指南Guide中，單獨(dú)列出動(dòng)物運(yùn)輸章節(jié)，對(duì)于動(dòng)物運(yùn)輸前準(zhǔn)備、運(yùn)輸過程中的防護(hù)和福利保障以及人員培訓(xùn)等方面都提出了一些要求和規(guī)范；國際獸醫(yī)局對(duì)于動(dòng)物運(yùn)輸中動(dòng)物的飲水、飲食和運(yùn)輸包裝盒、安全等方面也有明確的規(guī)定和指導(dǎo)［5］；而對(duì)于某些特定階段或條件下的運(yùn)輸考慮，如動(dòng)物處于懷孕或圍產(chǎn)期、老年動(dòng)物、或處于疾病期的動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、手術(shù)動(dòng)物等運(yùn)輸需要有特殊的指導(dǎo)和要求［6］。

﹞2015-09-30

教育與科普