魏玉林，王淑美*，顏維仁(1.重慶醫(yī)科大學 中醫(yī)藥學院，重慶 400016；2.重慶醫(yī)科大學 中醫(yī)藥研究室，重慶 400016；.重慶醫(yī)科大學附二院 腫瘤科，重慶 400010)

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中藥對腫瘤多細胞免疫治療的作用

魏玉林1，2，王淑美1，2*，顏維仁3
(1.重慶醫(yī)科大學 中醫(yī)藥學院，重慶 400016；2.重慶醫(yī)科大學 中醫(yī)藥研究室，重慶 400016；3.重慶醫(yī)科大學附二院 腫瘤科，重慶 400010)

目的：綜述中藥對多種抗腫瘤免疫細胞的促進作用及機制，為中藥聯(lián)合多細胞免疫療法臨床運用提供理論參考。方法：從中國知網、維普、萬方數據庫及PubMed中查閱關于中藥抗腫瘤的相關文獻資料，進行分析、綜述。結果：中藥對DC細胞、NK細胞、巨噬細胞、γδT細胞、CD3AK細胞等抗腫瘤免疫細胞都具有明顯促進作用。結論：中藥對腫瘤多細胞免疫療法具有一定增強作用，二者聯(lián)合治療腫瘤具有協(xié)同效應，對其作用機制的進一步研究具有重要意義。

中藥；多細胞免疫療法；腫瘤；綜述

近年來腫瘤發(fā)病率大幅上升，惡性腫瘤已成為全球較大的公共衛(wèi)生問題之一,極大地危害著人類健康,并將成為新世紀人類的第一殺手。手術、化療、放療治療腫瘤的同時，亦在一定程度上降低了患者自身的免疫力。隨著生物醫(yī)學技術的不斷發(fā)展，多細胞免疫療法逐漸進入人們的視野，它包含DC、CIK、NK等多種免疫細胞，能夠高效地殺傷腫瘤細胞，改善機體免疫功能。中醫(yī)藥作為我國傳統(tǒng)醫(yī)學的重要組成部分，在抗腫瘤方面有其獨到優(yōu)勢，配合西醫(yī)治療腫瘤可減毒增效。本研究綜述了中藥對DC、CIK、NK等抗癌細胞的影響，探討中藥對多細胞免疫療法的作用，以期為臨床開展中藥聯(lián)合多細胞免疫療法治療腫瘤提供思路和參考。

1 中藥對DC細胞的影響

DC細胞又名樹突狀細胞，是已知體內功能最強、唯一能活化靜息T細胞的專職抗原遞呈細胞，是啟動、調控和維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)。體外活化培養(yǎng)大量負載腫瘤抗原的DC細胞，達到一定數量后回輸到患者體內，即可誘導機體產生強烈的抗腫瘤免疫反應。林琳等[1]研究發(fā)現，黃芪甲苷、β-欖香烯(從中藥莪術中提取而來)及其聯(lián)合應用可顯著增強DC細胞表面MHC分子和免疫共刺激因子的表達，并能促進IL-12、IL-6等細胞因子的分泌，增強其抗原遞呈功能，提高DC細胞免疫監(jiān)視的能力，更好地識別腫瘤細胞。CHEN ZHUO等[2]研究證實“羧甲基茯苓多糖”可增強DC細胞的免疫應答能力，并且可改善機體患腫瘤時對DC細胞的抑制作用。宋洋等[3]研究發(fā)現，人參皂苷Rg3聯(lián)合細胞因子可對正常人單核細胞體外誘導形成形態(tài)、表型及功能都符合DC特征的細胞，可使單核細胞誘導DC產率增加，并增強其抗原遞呈能力，從而提高機體特異性免疫功能。

2 中藥對NK細胞的影響

NK細胞作為人體防御體系的第一道屏障，是人體內抗腫瘤活性最強的細胞。腫瘤細胞可被其直接識別并殺死，體外大量增殖培養(yǎng)后回輸入患者體內，可發(fā)揮強有力的抗腫瘤作用。崔澂等[4]研究發(fā)現，川芎嗪可通過對轉化生長因子β1 (TGF-β1)和IL-10的抑制作用逆轉它們對NK細胞的抑制。王英等[5]實驗發(fā)現,人參皂苷Rg3可提高NK細胞與腫瘤細胞的結合率，從而增強NK細胞對腫瘤細胞的殺傷活性，起到較強的抗腫瘤作用。CAO ZHIYUN等[6]研究發(fā)現，扶正抑瘤顆粒(由黃芪、女貞子、靈芝、山藥組成的中藥復方制劑)可顯著提高NK細胞數量、促進TNF-α、IL-2等細胞因子的分泌，從而調節(jié)機體免疫功能，有效地殺傷腫瘤細胞。屈新輝等[7]選用CD49作為觀察NK細胞的主要功能指標，發(fā)現由西洋參、黃芪、枸杞、當歸等多味中藥組成的復方可顯著提高CD49的含量，提示復方中藥能夠有效增加NK細胞數量。

3 中藥對巨噬細胞的影響

單核-巨噬細胞是機體抗感染免疫的主要效應細胞，它能夠攝取、處理抗原并遞呈給T細胞識別，促使T細胞活化，介導特異性免疫應答；待其活化后，可合成分泌IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α等多種細胞因子參與免疫調節(jié)，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。中藥可增強巨噬細胞的吞噬功能。高翔[8]實驗結果顯示，低濃度(10mg·kg-1)、中濃度(20mg·kg-1)、高濃度(40mg·kg-1)枸杞多糖組均能顯著提高巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數，且與正常對照組比較差異顯著，表明枸杞多糖可通過提高小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬能力，增強機體免疫功能，有效發(fā)揮抗腫瘤作用。韓潔等[9]開展對電離輻射小鼠的免疫功能實驗，結果同模型組對比，黃芪、枸杞、當歸、香菇和蒲公英等5味中藥多糖與巨噬細胞共同孵育，將明顯提高巨噬細胞分泌TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8中一個或多個細胞因子的功能，且具有濃度差異性。郭慧君等[10]研究發(fā)現，六味地黃丸和二冬膏對誘發(fā)性肺腫瘤小鼠的脾臟有明顯增重作用，還可顯著增強其腹腔巨噬細胞的吞噬功能。

4 中藥對CD3AK細胞的影響

CD3AK細胞是以CD3+、CD4+、CD8+細胞為主的異質性細胞群，它具有極強的擴增能力及細胞毒活性，體內、體外抗癌效果都很顯著，并且具有體外存活時間長的優(yōu)點，成為多細胞免疫治療的重要組成部分。黃建明等[11]研究發(fā)現，由靈芝、黃芪、黨參為主組成的靈芝合劑與CD3AK細胞合用治療肺癌，可使患者復發(fā)時間間隔、中位生存時間及平均生存時間延長，表明靈芝合劑可增強CD3AK細胞對肺癌的臨床療效。王謙等[12]研究表明，淫羊藿苷(ICA)可下調FasL的表達，上調細胞表面Fas的表達，對誘導的T淋巴細胞凋亡有一定阻斷作用，逆轉腫瘤細胞的免疫逃逸，顯著增強HepG2.2.15細胞對CD3AK細胞殺傷的敏感性。黃宏思等[13]實驗發(fā)現，黃芪水煎劑及黃芪多糖(APS)在CD3AK細胞殺傷靶細胞過程中對CD3AK細胞毒性有顯著增強作用，并觀察到APS在合適的濃度下(0.01g·L-1)具有較大增強效果。

5 中藥對γδT細胞的影響

γδT細胞是介于固有免疫與適應性免疫之間的一種特殊類型的免疫細胞，通過與腫瘤細胞直接接觸，釋放其細胞內溶酶體內含物直接殺傷腫瘤細胞，并與機體內其他免疫細胞共同構成機體防御惡變的第一道屏障，在抗腫瘤免疫監(jiān)視及免疫效應中發(fā)揮著重要作用。張繼躍等[14]實驗研究發(fā)現，質量濃度為0.000 2～0.4μg·mL-1的紫草素誘導人γδT細胞72h后，紫草素在0.000 2～0.012 5μg·mL-1時可促進γδT細胞生長，并增加γδT細胞表面顆粒酶B、穿孔素、CD107a的表達，表明紫草素在一定質量濃度下能促進γδT細胞的生長,同時可增強它對胃癌細胞株SGC7901的殺傷活性。孫舒玉等[15]實驗結果顯示，甘草多糖可促進γδT細胞增殖,促進γδT細胞分泌IFN-γ和TNF-α(P<0.01)；另外經甘草多糖作用后,γδT細胞對腫瘤細胞HepG2的殺傷能力顯著增強(P<0.05)，表明甘草多糖能夠促進人外周血γδT細胞增殖、分泌細胞因子以及殺傷腫瘤細胞，從而增強機體抗腫瘤能力。

6 中藥對細胞因子的影響

細胞因子是免疫細胞產生的一大類能在細胞間傳遞信息、具有免疫調節(jié)和效應功能的蛋白質或小分子多肽。IL-2、TNF-a、IFN-γ等細胞因子可通過釋放顆粒酶、穿孔素直接使腫瘤細胞分裂崩解。中藥可促進IL-2、TNF-a、IFN-γ等細胞因子分泌。抗癌免疫細胞中的CIK細胞及NKT細胞主要通過分泌以上細胞因子發(fā)揮效能，故能促進IL-2、TNF-a、IFN-γ等細胞因子分泌的中藥對多細胞免疫療法同樣具有增強作用。LU SHENG等[16]報道，冬蟲夏草菌絲體胞外多糖(EPS)能明顯提高小鼠胸腺、脾臟細胞的TNF-α和IFN-γ基因表達和蛋白水平，可見EPS能夠通過促進免疫細胞分泌細胞因子TNF-α和IFN-γ來調節(jié)機體免疫功能。羅慶東等[17]研究發(fā)現，鱉甲煎丸一方面可顯著增加荷瘤小鼠外周血中CD4+T淋巴細胞，顯著降低CD8+T淋巴細胞亞群的比例，使CD4+T/CD8 +T明顯升高(P<0.01)；同時，鱉甲煎丸還可提高肝癌荷瘤小鼠血清IFN-γ、IL-2的水平(P<0.01)，發(fā)揮較強的抗腫瘤作用。

7 中藥聯(lián)合多細胞免疫療法抗癌的中醫(yī)理論基礎

中醫(yī)藥作為我國傳統(tǒng)醫(yī)藥，在腫瘤的防治中發(fā)揮著巨大作用。《靈樞·百病始生》曰：“不得虛，邪不能獨傷人?！薄端貑栠z篇·刺法論》曰：“正氣存內，邪不可干?！苯沂玖思膊〉陌l(fā)生根源在于人體正氣不足，若機體正氣充足，即使邪氣入體，機體亦能通過自我調節(jié)，維持陰陽平衡，保持健康。依據中醫(yī)致病理論，腫瘤的發(fā)生即是人體自身免疫力(即正氣)下降，毒邪趁虛侵入而發(fā)。因此我們可通過提高機體免疫力，改善機體內環(huán)境，維持機體各因素平衡，從而治療腫瘤。目前很多專家學者對中藥治療腫瘤的作用機制進行了研究，證實中藥確實可以通過改善機體免疫功能發(fā)揮抗癌作用。新近研究的多細胞免疫療法即遵循了提高機體自身免疫力以治療腫瘤的原則，不僅安全，且毒副作用低。既然中藥治療與多細胞免疫療法抗癌理念一致，故二者聯(lián)合運用可行性較高。

8 存在的問題與展望

綜上，從中藥對抗癌免疫細胞多各種作用可以看出，中藥聯(lián)合多細胞免疫療法治療腫瘤可行性極高，并且有著廣闊的發(fā)展前景。但目前尚存在一些問題：第一，中藥的藥效受到劑量、濃度、劑型等諸多因素影響；第二，中藥聯(lián)合多細胞免疫療法的時機尚需深入探討；第三，目前尚缺少中藥對CD3AK、TIL、γδT等抗癌細胞作用機制的研究，而這些細胞在殺傷腫瘤細胞中有其獨特優(yōu)勢；第四，目前尚無大樣本的中藥聯(lián)合多細胞免疫療法治療腫瘤的實驗及臨床研究。

免疫治療是當前腫瘤治療的熱點，也是目前已知的徹底根治腫瘤的一種有效方法，未來必將在腫瘤防治中發(fā)揮重要作用[18]。中藥可通過對DC、NK、CD3AK等抗腫瘤細胞的促進作用發(fā)揮效能，增強多細胞免疫療法抗腫瘤的療效。因此，對中藥聯(lián)合多細胞免疫療法進行大量的實驗與臨床研究，進一步探討其作用機制及提高臨床療效，我國腫瘤多細胞免疫治療必將取得新的突破。

[1] 林琳，沈洪，周曉波，等.黃芪甲苷、β-欖香烯對小鼠樹突狀細胞免疫功能的影響 [J]．東南大學學報:醫(yī)學版，2011，30(2):294-297.

[2] CHEN ZHUO,YU BIN,WU XIANLIN，et a1.Carboxymethylpachymaran enhances immunologic function of dendritic cells cultured in two kinds of hepatoma carcinoma cell line’s supernatant via nuclear factor κ B/Rel Pathway[J]．Chin J Integr Med，2012，18(30):203-208．

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[4] 崔澂，王潤田， 胡建軍，等.抗腫瘤中藥制劑逆轉結直腸癌NK細胞免疫抑制的靶分子探討[J]．江蘇醫(yī)藥，2011，37(5)：509-512.

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[8] 高翔.枸杞多糖對小鼠巨噬細胞免疫功能的影響研究[J]．中國現代藥物應用，2013，7(12):237-238.

[9] 韓潔，岳文鵬，何光志，等．八種中藥多糖對小鼠巨噬細胞釋放細胞因子的影響[J]．現代免疫學，2011，31(6):495-498．

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[13] 黃宏思，黃衛(wèi)彤，韋英群.黃芪水煎劑和黃芪多糖對CD 3AK細胞毒性的增強作用[J]．廣西醫(yī)科大學學報，2001，18(5):630-631.

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[15] 孫舒玉,何小鵑,柴旺,等.甘草多糖對人外周血γδT細胞的免疫調節(jié)作用[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19(6):242-245.

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[17] 羅慶東,王月飛,趙紅曄,等.鱉甲煎丸對肝癌荷瘤小鼠細胞免疫功能的干預作用[J].中醫(yī)藥學報，2012(3):21-23.

[18] 李丹莉，李文雁.腫瘤免疫治療開啟新的醫(yī)療技術 [J].中國醫(yī)藥技術經濟與管理，2014(1):52-56.

(責任編輯：宋勇剛)

Effect of Traditional Chinese Medicine on Tumor Multicellular Immunotherapy

Wei Yulin1,2,Wang Shumei1,2*,Yan Weiren3
(1.Traditional Chinese Medicine College, Chongqing Medical University, Chongqing 400016,China;2.The Lab of Traditional Chinese Medicine Sciences, Chongqing Medical University ,Chongqing
400016,China;3. Medical Oncology, The Second Affiliated Hospital of Chongqing
Medical University , Chongqing 400010,China)

Objective:To review the promoting effect of traditional Chinese medicine on anti-tumor immune cells and the mechanisms.To provide a theoretical reference for the clinical application of traditional Chinese medicine combined with multicellular immune therapy.Methods:This study collects the related literature at home and abroad of traditional Chinese medicine on tumor from Chinese HowNet,VIP,Wanfang Database and PubMed.Then analysis and review the collected literature.Results:Traditional Chinese medicine has obvious promoting effect on the anti-tumor immune cells, and the anti-tumor immune cells which are involved in this study are DC cells, NK cells, macrophages, γδT cells,CD3AK cells.Conclusion:The results show that traditional Chinese medicine has certain strengthening effect on multicelular immune therapy in the treatment of tumor,traditional Chinese medicine combined with tumor multicellular immune therapy has synergistic effect.the further study of its mechanism has great significance to the treatment of tumor.

Traditional Chinese Medicine;Multicellular Immunotherapy;Tumor;Review

2015-01-06

重慶市衛(wèi)生局課題(渝中醫(yī)[2012]41號)；重慶市科委課題(渝科發(fā)計字[2013]22號)

魏玉林(1990-)，女，重慶醫(yī)科大學碩士研究生,研究方向為中西醫(yī)結合臨床。

王淑美(1969-)，女，博士，重慶醫(yī)科大學副教授，碩士生導師，研究方向為中西醫(yī)結合臨床。E-mail：Winna 968@sina.com

R273

A

1673-2197(2015)11-0047-03

10.11954/ytctyy.201511019