陳巾宇，楊野仝，張桂英，楊　青，劉雅娟

(吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)，吉林 長(zhǎng)春130021)

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肥胖模型大鼠鋅營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo)的檢測(cè)及意義

陳巾宇，楊野仝，張桂英，楊青，劉雅娟*

(吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)，吉林 長(zhǎng)春130021)

摘要：目的探討肥胖大鼠體內(nèi)鋅代謝指標(biāo)的變化情況，為調(diào)整膳食結(jié)構(gòu)，防治肥胖提供理論依據(jù)。方法將20只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和肥胖組，每組10只，分別喂養(yǎng)普通飼料和高脂飼料，8周后眼球取血處死。試劑盒測(cè)血清鋅含量、堿性磷酸酶活性及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性。結(jié)果與對(duì)照組大鼠比較，肥胖組大鼠血清鐵含量、堿性磷酸酶活性及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性均有所升高(P<0.05)。結(jié)論肥胖會(huì)導(dǎo)致鋅含量增高，引起鋅代謝指標(biāo)的改變。

(ChinJLabDiagn,2015,19:1049)

肥胖指人身體的脂肪堆積到一個(gè)危害健康程度的狀態(tài)，因肥胖引發(fā)的心血管疾病、內(nèi)分泌疾病、代謝疾病等逐年上升[1,2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，肥胖機(jī)體微量元素代謝會(huì)發(fā)生不同程度的變化。鋅是生物體內(nèi)必不可少的微量元素之一，生物作用廣泛且重要，可對(duì)RNA聚合酶、DNA聚合酶、碳酸酐酶等多種酶的合成及生物學(xué)活性造成影響，進(jìn)而對(duì)機(jī)體的免疫功能產(chǎn)生影響[3]。目前，有關(guān)肥胖機(jī)體鋅含量的研究報(bào)道觀點(diǎn)不一，本文通過建立動(dòng)物肥胖模型，對(duì)肥胖大鼠機(jī)體鋅營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)指標(biāo)進(jìn)行研究，探討肥胖所致鋅代謝的變化，為肥胖的預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性健康Wistar大鼠20只，體質(zhì)量(190±10) g，購(gòu)自吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2　分組及喂養(yǎng)

按照隨機(jī)分組原則，將大鼠分為對(duì)照組10只，肥胖組10只。對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)，肥胖組以高脂飼料(高脂飼料配方：88.8%普通飼料、10%豬油、1%膽固醇、0.2%膽鹽)喂養(yǎng)。連續(xù)喂養(yǎng)8周，期間飲食量無差異，飲水自由，觀察大鼠一般狀況，并記錄體重變化。

1.3　儀器及試劑

主要儀器：恒溫水浴箱、酶標(biāo)儀、722分光光度計(jì)、恒溫培養(yǎng)箱、微量移液器；

主要試劑：血脂四項(xiàng)試劑盒、血清堿性磷酸酶活性試劑盒、血清血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性試劑盒

1.4　觀察大鼠一般狀態(tài)

每日觀察大鼠行為、精神狀態(tài)，并測(cè)量及記錄體質(zhì)量。

1.5　肥胖模型的判定標(biāo)準(zhǔn)

1.6　各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定

建立肥胖模型成功后，眼球取血并處死，全血室溫放置10-20 min，2 000-3 000轉(zhuǎn)/min離心20 min，取上清。放入4°冰箱保存，并測(cè)量以下指標(biāo)：血清鋅、血清堿性磷酸酶活性、血清血管緊張素酶活性。

測(cè)定方法及步驟按試劑盒使用說明書操作。

1.7　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2結(jié)果

2.1　大鼠一般狀況觀察及體質(zhì)量變化

飼喂三周后，肥胖組大鼠體形短而粗壯，而對(duì)照組大鼠體型細(xì)長(zhǎng)，高脂飼料組大鼠體重明顯高于對(duì)照組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見圖1。

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05

2.2　對(duì)照組大鼠與肥胖組大鼠Lee’s指數(shù)比較

8周后，肥胖組大鼠Lee’s指數(shù)明顯高于對(duì)照組大鼠Lee’s指數(shù)，且組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表1)，證明模型建立成功。

組別nLee’s指數(shù)正常對(duì)照組10389.7000±18.2394*高脂飼料組10449.1000±7.6948*

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05

2.3　對(duì)照組大鼠與肥胖組大鼠血脂水平比較

肥胖組大鼠血清甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇含量均高于對(duì)照組大鼠，高密度脂蛋白膽固醇含量低于對(duì)照組大鼠，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2，證明模型建立成功。

組別nTGCHDLDL-CHDL-C正常對(duì)照組1058.3770±6.9491*49.7050±4.7397*15.9230±1.6375*38.6230±3.9034*高脂飼料組1065.2770±5.9647*55.6730±5.9232*21.4230±2.4243*32.1020±3.0028*

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05

2.4　對(duì)照組大鼠與肥胖組大鼠血清鋅比較

肥胖組大鼠血清鋅含量的值高于對(duì)照組大鼠血清鋅含量的值，且組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

±s)

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05

2.5　對(duì)照組大鼠與肥胖組大鼠血清堿性磷酸酶、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性比較

肥胖組大鼠血清堿性磷酸酶活性、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性與對(duì)照組大鼠比較，均低于對(duì)照組大鼠，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(見表4)

表4　對(duì)照組與肥胖組AKP活性與ACE活性

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05

3討論

本研究用高脂飼料飼養(yǎng)大鼠，建立動(dòng)物肥胖模型，研究肥胖所致鋅代謝及鋅營(yíng)養(yǎng)狀況的變化。結(jié)果表明：肥胖組大鼠與對(duì)照組比較體重、Lee’s指數(shù)增加；肥胖組大鼠甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白與對(duì)照組相比均明顯升高，高密度脂蛋白的值明顯有所下降，建模成功。本研究發(fā)現(xiàn)：肥胖組血清鋅含量、堿性磷酸酶(AKP)活性、血管緊張素酶(ACE)活性明顯高于對(duì)照組。血清鋅是目前評(píng)價(jià)鋅營(yíng)養(yǎng)水平最普遍的指標(biāo)，但由于血清鋅水平不僅與攝入有關(guān)，還與許多各種應(yīng)激狀況病理、生理?xiàng)l件有關(guān)，所以血清鋅不能單獨(dú)評(píng)價(jià)機(jī)體鋅水平，應(yīng)同時(shí)結(jié)合其他指標(biāo)[5]。ALP是由兩個(gè)含鋅亞基組成的糖蛋白，當(dāng)處于堿性環(huán)境中(pH=10)時(shí)可以使各種天然及人工合成的磷酸單酯化合物底物水解[6]，有研究研究發(fā)現(xiàn)血清鋅偏低時(shí)，堿性磷酸酶活性也偏低，補(bǔ)鋅后堿性磷酸酶活性升高[7]，證明堿性磷酸酶活性隨鋅水平變化而變化，是一種典型的鋅依賴酶，是鋅含量的變化敏感指標(biāo)。ACE系統(tǒng)命名為肽酰二肽水解酶，是一種普遍存在于哺乳動(dòng)物組織中，含鋅離子的膜結(jié)合外肽酶(羧基端二肽)[8],Stallard 等[9]將大鼠隨機(jī)分為適鋅組、低鋅組、對(duì)喂組共三組，然后檢測(cè)ACE活性和ACE mRNA表達(dá)水平,結(jié)果表明低鋅組大鼠的ACE活性和ACE mRNA表達(dá)量均明顯低于另兩組,提示鋅攝入水平可以影響ACE基因的轉(zhuǎn)錄然后影響ACE活性，ACE可作為評(píng)價(jià)鋅水平的一項(xiàng)指標(biāo)。本次研究結(jié)果表明：肥胖導(dǎo)致機(jī)體鋅含量增加。鋅與攝食具有相關(guān)性，攝入增多會(huì)增加攝食行為，促進(jìn)食欲[10]；鋅具有增加胰島素穩(wěn)定性、提高胰島素活性、增強(qiáng)胰島素與受體結(jié)合等作用[11]，體內(nèi)鋅過多可能導(dǎo)致胰島素抵抗[12]，使機(jī)體能量堆積，最終引發(fā)肥胖。

綜上所述，血清鋅含量、堿性磷酸酶(AKP)活性、血管緊張素酶(ACE)可評(píng)價(jià)機(jī)體鋅的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)；肥胖可導(dǎo)致鋅增高，出現(xiàn)穩(wěn)態(tài)失衡。及時(shí)監(jiān)測(cè)肥胖者體內(nèi)主要微量元素營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，調(diào)控機(jī)體微量元素的失衡對(duì)預(yù)防肥胖具有重要的指導(dǎo)意義。

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關(guān)鍵詞：肥胖；鋅代謝；堿性磷酸酶；血管緊張素轉(zhuǎn)化酶

Detection and significance of Obesity rats with zinc nutritional status indicatorsCHENJin-yu，YANGYe-tong，ZHANGGui-ying,etal.(DepartmentofNutritionandFood,SchoolofPublicHealth,JilinUniversity,Changchun130021,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the influence of obesity on zinc metabolism.As the adjustment of dietary structure,provides the theory basis for the prevention and treatment of obesity.Methods20 male Wistar rats,were randomly divided into control group and obesity group,10 rats in each group.ordinary diet and high fat diet,respectively,The blood were obtained from eyeball after 8 weeks,then kill the rats.The serum zinc content,alkaline phosphatase activity and angiotensin conversion enzyme activity were detected.ResultsCompared with control group rats.The serum iron content,alkaline phosphatase activity and angiotensin conversion enzyme activity in obesity group were significantly higher than that in,control group (P<0.05) ConclusionObesity can lead to higher zinc content,lead zinc metabolism index change.

Key words:obesity;Zinc metabolism;Alkaline phosphatase

(收稿日期：2014-10-20)

作者簡(jiǎn)介：陳巾宇(1989- )，女，吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，在讀碩士。

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：R151

文章編號(hào)：1007-4287(2015)07-1049-03

*通訊作者

基金項(xiàng)目：吉林省科技廳基金項(xiàng)目(20130101122JC)