血清脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白測(cè)定在慢性腎臟病的臨床應(yīng)用價(jià)值

吳亞1，魏宏蓮2

(1.河北省中醫(yī)院 檢驗(yàn)科,河北 石家莊050011;2河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河北 石家莊050000)

近年來(lái)，伴有脂質(zhì)代謝紊亂的糖尿病和代謝綜合征的發(fā)病率正在逐年上升,由其導(dǎo)致的慢性腎臟病(CKD)的發(fā)病率和病死率也在逐年增加，從早期脂代謝紊亂角度尋找CKD發(fā)生發(fā)展的診斷指標(biāo)成為目前的研究熱點(diǎn)之一。脂肪細(xì)胞胞液中含有較多的脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)，它在脂肪酸的攝取、代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中起著非常重要的作用，從基因水平調(diào)控脂肪細(xì)胞的分化，與體內(nèi)糖及脂肪代謝密切相關(guān)[1]。有報(bào)導(dǎo)血清A-FABP水平與肥胖癥、高血糖癥、胰島素抵抗和代謝綜合征密切相關(guān)[2]。目前有關(guān)CKD時(shí)A-FABP的研究鮮有報(bào)道。本研究以患不同類型腎病的患者為對(duì)象，通過(guò)檢測(cè)140例CKD(其中原發(fā)性腎小球腎炎52例，腎病綜合征46例，糖尿病腎病42例)患者的血清A-FABP和非酯化脂肪酸(NEFA)水平，探討其在CKD發(fā)生發(fā)展中的意義及臨床應(yīng)用價(jià)值。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象2010年1月-2012年12月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科收治的慢性腎小球腎炎患者52例(CKDⅠ組)，其中男36例，女16例，年齡30-60歲，平均(46.5±13.0)歲；腎病綜合征患者46例(CKDⅡ組)，其中男36例，女10例，年齡28-60歲，平均(45.8±13.4)歲；糖尿病腎病組(CKDⅢ組)42例，其中男25例，女17例，年齡36～64歲，平均(49.2±10.3)歲。對(duì)照組(Con組)50例，均為同期健康查體者，其中男35例，女15例，年齡30-60歲，平均(45.0±10.3)歲。所有患者均經(jīng)腎活檢確診，CKDⅠ組、CKDⅡ組、CKDⅢ組和Con組間男女比例和年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2方法采集空腹靜脈血標(biāo)本后3 500轉(zhuǎn)/min離心10分鐘分離血清，-20℃冷凍保存，集中測(cè)定。①A-FABP測(cè)定：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法,試劑盒由美國(guó)ADL公司提供，應(yīng)用芬蘭Thermo自動(dòng)洗板機(jī)和酶標(biāo)比色儀進(jìn)行洗板和吸光度測(cè)定。② NEFA測(cè)定：銅顯色法，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。③血清中其他生化指標(biāo)測(cè)定：在HITACHI7600全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定尿素氮(BUN)，肌酐(SCr)，白蛋白(ALB)、膽固醇(TC) 、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、24小時(shí)尿蛋白，試劑由上?？迫A生物公司提供。

2結(jié)果

2.1血生化指標(biāo)測(cè)定CKDⅠ組、CKDⅡ組和CKDⅢ組血清A-FABP(P<0.01)、NEFA(P<0.01))、TG(P<0.01)和24小時(shí)尿蛋白(P<0.01)均高于Con組，ALB顯著低于Con組(P<0.01)。CKDⅡ組血清TC明顯高于其它組，CKDⅢ組血清FBG明顯高于其它組，支持臨床診斷。各生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見表1。

組別A-FABP(μg/L)NEFA(mmol/L)BUN(mmol/L)SCr(μmol/L)ALB(g/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)FBG(mmol/L)24小時(shí)尿蛋白(g)CKDⅠ組8.41±3.53**1.01±0.14**6.55±3.5493.53±32.9636.28±9.17**4.87±1.591.85±1.02**4.56±0.871.64±0.90**CKDⅡ組8.71±4.54**1.01±0.11**6.28±2.9391.31±23.9924.42±5.94**▲▲8.49±2.99**▲▲2.50±1.16**▲4.39±1.014.59±2.74**▲▲CKDⅢ組6.36±1.93**▲1.04±0.07**8.81±1.55**▲▲106.27±20.48*▲36.09±9.06**5.19±1.322.04±1.37**7.85±2.00**▲▲1.52±0.80**Con組3.88±1.510.82±0.265.30±1.1682.21±5.6548.03±2.404.86±0.591.05±0.334.16±0.390.06±0.03F值24.96618.15215.3548.3687.7443.67616.69796.77144.115P值0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000

注：與Con組相比：*P<0.05,**P<0.01；與CKDⅠ組相比：▲P<0.05,▲▲P<0.01。

2.2相關(guān)分析直線相關(guān)分析結(jié)果顯示CKDⅠ組A-FABP和NEFA有相關(guān)關(guān)系r=0.446(P=0.033)；CKDⅡ組A-FABP和NEFA有相關(guān)關(guān)系r=0.469(P=0.032)，CKDⅢ組A-FABP和NEFA有相關(guān)關(guān)系r=0.379(P=0.012)。

3討論

FABP是一組能結(jié)合長(zhǎng)鏈脂肪酸的低分子量胞質(zhì)蛋白，具有組織分布特異性，分布于哺乳動(dòng)物的小腸上皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等組織細(xì)胞中，以其分布而命名[3]。目前發(fā)現(xiàn)的有9種類型。脂肪細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞高表達(dá)的A-FABP，在脂肪酸的攝取、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用[1]。A-FABP能與激素敏感性脂肪酶結(jié)合成復(fù)合物，增強(qiáng)此酶的效率，促進(jìn)脂解作用[2]。脂肪酸和A-FABP二者密切相關(guān)，長(zhǎng)鏈脂肪酸濃度增加時(shí)，可結(jié)合位于A-FABP基因上游的啟動(dòng)子區(qū)域的轉(zhuǎn)錄因子過(guò)氧化物酶體增生體激活受體(PPAR)的DNA結(jié)合區(qū)，誘導(dǎo)其下游A-FABP靶基因表達(dá)[4]。有研究表明代謝綜合征和糖尿病患者血A-FABP水平升高[5,6]。本研究結(jié)果顯示各型CKD患者的血A-FABP和NEFA水平均升高，分析其原因可能是：①CKD患者體內(nèi)存在脂質(zhì)代謝紊亂，血TG增高和(或)血TC增高，血NEFA增高，NEFA可與A-FABP上游基因PPAR結(jié)合，誘導(dǎo)A-FABP基因表達(dá)；②CKD時(shí)，尿蛋白增高，結(jié)合了白蛋白的NEFA可促進(jìn)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)、細(xì)胞凋亡和皮質(zhì)細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腎損傷。Thomas等通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，白蛋白-NEFA可吸引巨噬細(xì)胞在皮外層浸潤(rùn)，導(dǎo)致嚴(yán)重的腎小管間質(zhì)損傷[7]；③A-FABP在巨噬細(xì)胞中高表達(dá)，CKD有巨噬細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤(rùn)。有研究表明敲除載脂蛋白B基因小鼠中A-FABP缺失的巨噬細(xì)胞可明顯防止動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展[8]，提示A-FABP參與調(diào)控脂質(zhì)代謝和炎癥反應(yīng)；④慢性腎臟病時(shí)血A-FABP和血NEFA顯著增高，且二者存在直線相關(guān)關(guān)系，推測(cè)可能在CKD的進(jìn)展過(guò)程中，NEFA和A-FABP二者在基因表達(dá)調(diào)控方面有一定關(guān)系，這有待進(jìn)一步研究。

與傳統(tǒng)CKD診斷指標(biāo)BUN、SCr相比，血A-FABP和NEFA的靈敏度更高。所以本研究認(rèn)為CKD患者血A-FABP和NEFA升高，提示血A-FABP和NEFA測(cè)定對(duì)其診斷有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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收稿日期：(2014-03-18)

文章編號(hào)：1007-4287(2015)04-0619-02