周唯蘭，吳品江，周芯宇， 顏 歡， 李元波

(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)四川海蓉藥業(yè)有限公司，四川成都 611830)

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HPLC法測定蘋果酸阿莫曲坦含量的研究

周唯蘭，吳品江，周芯宇， 顏 歡， 李元波

(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)四川海蓉藥業(yè)有限公司，四川成都 611830)

[目的]建立一種高效液相色譜法，測定蘋果酸阿莫曲坦片的含量。[方法]采用高效液相色譜法(HPLC)，色譜柱為Agilent Zobax SB C8 column (250×4.6 mm，5 μm )；以緩沖液(取0.5 g辛烷磺酸鈉與5 ml磷酸溶液，加水至1 000 ml，用5 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至3.0)-乙腈作為流動(dòng)相，等度洗脫，流速1.0 ml/min，柱溫30 ℃，檢測波長230 nm，進(jìn)樣量10 μl。[結(jié)果]蘋果酸阿莫曲坦的濃度在17.49～209.88 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(Y=27.534X+9.693，r=0.999 9)，高、中、低 3 種濃度的平均回收率(n=3)為99.23% (RSD=0.95%)；中間精密度RSD=0.98%(n=6)，重復(fù)性和耐用性良好。[結(jié)論]該方法簡便、靈敏、準(zhǔn)確，可作為蘋果酸阿莫曲坦片含量的檢驗(yàn)方法。

蘋果酸阿莫曲坦；含量測定；HPLC

蘋果酸阿莫曲坦片由西班牙Almirall Prodesfarma公司原研，Almirall與Johnson & Johnson和Abbott等公司合作開發(fā)，于2000年9月首次在西班牙上市，2001年在美國、丹麥、芬蘭、德國、新西蘭等國家上市。適應(yīng)癥為有偏頭痛病史的患者有或無先兆的偏頭痛發(fā)作的急性治療，耐受性好，不良反應(yīng)輕微且短暫。該藥物有望成為曲坦類藥物的后起之秀，有著較廣闊的市場前景[1]。為了臨床安全和合理用藥，筆者建立了HPLC法測定蘋果酸阿莫曲坦含量，對其質(zhì)量進(jìn)行控制，方法可靠，結(jié)果準(zhǔn)確。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑1100高效液相色譜儀(美國安捷倫，VWD紫外檢測器)；BP61型Sartorius電子分析天平(上海精科儀器廠)；蘋果酸阿莫曲坦對照品(批號(hào)：FOJ054，USP)；蘋果酸阿莫曲坦片(自制：14110101，14110601，14110901)；乙腈為色譜純；水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。

1.2 色譜條件色譜柱：Agilent Zobax SB C8色譜柱(250×4.6 mm，5 μm )；流速1.0 ml/min，柱溫30 ℃，檢測波長230 nm，柱溫30 ℃，進(jìn)樣量10 μl。以緩沖液(取0.5 g辛烷磺酸鈉與5 ml磷酸溶液，加水至1 000 ml，用5 mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至3.0)-乙腈(70∶30)作為流動(dòng)相，按等度進(jìn)行洗脫。

1.3 測定方法取本品適量(約相當(dāng)于蘋果酸阿莫曲坦17.5 mg)，精密稱定，置50 ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相溶液溶解，并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2 ml，置10 ml棕色量瓶中，用流動(dòng)相溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取蘋果酸阿莫曲坦對照品，精密稱定，加流動(dòng)相溶液溶解，并定量稀釋制成約含蘋果酸阿莫曲坦70 μg/ml的溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

2 結(jié)果與分析

2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)取本品粉末，精密稱定，加流動(dòng)相溶液溶解，并定量稀釋制成約含蘋果酸阿莫曲坦70 μg/ml的溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。精密量取系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液10 μl，注入高效液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，峰面積和保留時(shí)間的RSD應(yīng)小于2.0%，結(jié)果表明本品色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣重復(fù)性良好。

2.2 空白干擾專屬性試驗(yàn)取混合均勻的空白輔料適量(約相當(dāng)于蘋果酸阿莫曲坦17.5 mg)，精密稱定，置250 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶液適量，超聲使主藥溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為空白輔料溶液。精密量取10 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，輔料在與供試品主峰保留時(shí)間相同處無色譜峰出現(xiàn)，不干擾本品的含量的測定。

2.3 線性與范圍取蘋果酸阿莫曲坦對照品約17.5 mg，精密稱定，置50 ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液；精密量取貯備液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0 ml，分別置于10 ml棕色量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取上述溶液各10 μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=27.534X+9.693(r=0.999 9)。蘋果酸阿莫曲坦?jié)舛仍?7.49～209.88 μg/ml范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn)取蘋果酸阿莫曲坦樣品，精密稱定，加流動(dòng)相溶液溶解，并且定量稀釋制成約含蘋果酸阿莫曲坦70 μg/ml的溶液，平行配制6份樣品進(jìn)行含量測定，考察該方法的重復(fù)性。研究表明，平行試驗(yàn)6份樣品的含量測定結(jié)果RSD小于2%，方法重復(fù)性良好，適合含量測定。

2.5 中間精密度試驗(yàn)取本品，按上述方法，分別于不同時(shí)間、不同實(shí)驗(yàn)員、不同儀器試驗(yàn)按照上述測定方法測定，平行配制6份樣品進(jìn)行含量測定，將6次的測定結(jié)果與重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果做統(tǒng)計(jì)分析。由表1可知，2次測定結(jié)果基本一致，無明顯不同，表明方法的精密度良好。

表1 蘋果酸阿莫曲坦中間精密度試驗(yàn) %

2.6 回收率試驗(yàn)取蘋果酸阿莫曲坦對照品約17.5 mg，精密稱定，置50 ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相溶液溶解，并且稀釋至刻度，搖勻；精密量取2 ml，置10 ml棕色量瓶中，用流動(dòng)相溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別稱取蘋果酸阿莫曲坦原料約280、350、420 mg，各3份，按20片處方配比，分別加適量輔料壓片，各取1片按照含量測定項(xiàng)下檢查法制備供試品溶液。精密量取上述溶液各10 μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。由表2可知，回收率良好。

表2 回收率試驗(yàn)

2.7 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液，于棕色量瓶中室溫放置10 h，分別在0、1、2、4、6、8和10 h精密量取10 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，考察含量的變化。研究表明，含量測定溶液于棕色量瓶中室溫放置10 h，峰面積無明顯變化，可知該溶液穩(wěn)定良好。

2.8 耐用性試驗(yàn)通過將色譜條件的流動(dòng)相初始比例、pH、流速、柱溫及色譜柱更換進(jìn)行微小的變動(dòng)，考察該色譜條件的耐用性。由表3可知，對色譜條件進(jìn)行微小變動(dòng)，各變異條件下對本品含量檢測無明顯影響，可知該方法耐用性良好。

表3 含量測定耐用性考察綜合結(jié)果

2.9 樣品測定按照“1.3”項(xiàng)下測定方法測定蘋果酸阿莫曲坦片14110101、14110601、14110901批的含量結(jié)果分別為99.23%、99.96%、100.23%。

3 討論

目前國內(nèi)尚無蘋果酸阿莫曲坦含量測定的相關(guān)報(bào)道，筆者建立了一種采用HPLC法測定蘋果酸阿莫曲坦含量的方法，其準(zhǔn)備度高，方便快捷，能有效控制蘋果酸阿莫曲坦的質(zhì)量。

[1] 王鵬,高永鑫,廖福廣.抗偏頭痛新藥阿莫曲坦[J].中國新藥雜志,2006(2):152-154.

Determination of Almotriptan Malate Tablets by HPLC

ZHOU Wei-lan, WU Pin-jiang, ZHOU Xin-yu et al

(Yangtze River Pharmaceutical Group Sichuan Eron Pharmaceutical Company Limited, Chengdu, Sichuan 611830)

[Objecive] To establish a HPLC method for the determination of almotriptan malate tablets.[Method] Using high-performance liquid chromatography, chromatographic column of Agilent zobax SB C8 column (250×4.6 mm, 5 μm); With a mixture of octane sulfonate buffer (adjusted pH to 3.0 with phosphoric acid) and acetonitrile as mobile phase, isocratic elution method, flow rate 1.0 ml/min, temperature 30°C, detection wavelength 230 nm, injection 10 μl.[Result] Almotriptan malate concentration in the range of 17.49 to 209.88 μg/ml has a good linear relationship (Y= 27.534X+ 9.693,r= 0.999 9), the average recovery of high, middle, low, 3 kinds of concentration ratio (n=3 ) 99.23%(RSD=0.95%); intermediate precisionRSD=0.98% (n=6), Repeatability and durability is good.[Conclusion] The method is simple, sensitive, accurate, reproducible, which is suitable for the determination of almotriptan malate.

Almotriptan malate; Content determination; HPLC

周唯蘭(1973-)，女，重慶人，工程師，從事藥物制劑與分析方面的研究。

2015-01-26

S 854.5+3

A

0517-6611(2015)08-007-02