竇錦明，荊漢衛(wèi)山東濰坊市中醫(yī)院，濰坊 604；山東濰坊市食品藥品檢驗(yàn)所，濰坊 605

半枝蓮黃酮類有效部位體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究

竇錦明1，荊漢衛(wèi)2
1山東濰坊市中醫(yī)院，濰坊 261041；2山東濰坊市食品藥品檢驗(yàn)所，濰坊 261205

目的：探討半枝蓮黃酮類有效部位（HSB-FEP）體內(nèi)抗腫瘤活性。方法：先制備HSB-FEP；以S180、U14、EAC、HepA實(shí)體瘤小鼠模型進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)HSB-FEP的200、50 mg·kg-1對(duì)各實(shí)體瘤的生長(zhǎng)抑制作用及對(duì)體重、抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)等的影響。結(jié)果與結(jié)論：體內(nèi)試驗(yàn)表明，與模型組比較，高劑量組能明顯抑制S180、U14、EAC、HepA實(shí)體瘤生長(zhǎng)，平均抑制率分別為33.87%、39.89%、37.60%、46.29%，胸腺、脾指數(shù)顯著升高。

半枝蓮；黃酮類；抗腫瘤；S180；U14；EAC；HepA

半枝蓮為唇形科多年生草本植物半枝蓮（Scutellaria barbata D.Don）的干燥全草。具有抗腫瘤等活性[1]。本實(shí)驗(yàn)以半枝蓮黃酮類（HSB-FEP）對(duì)腫瘤細(xì)胞株增殖抑制作用研究，具有一定的科研意義。

1 材 料

1.1 藥材

半枝蓮購(gòu)于山東濰坊海王中藥飲片有限公司（批號(hào)：20120825），經(jīng)濰坊市藥檢所鑒定確認(rèn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和瘤株

昆明種小鼠♂，體重（20±2）g，200只，山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 〔SCXK（魯）20090002〕提供。S180、U14、EAC、HepA瘤株，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物所腫瘤室提供。

1.3 儀器和試劑

FA1204B型電子天平（上海精密科學(xué)儀器廠）。環(huán)磷酰胺（CTX，批號(hào)：13112021，江蘇恒瑞制藥廠）。

2 方 法

2.1 HSB-FEP的制備[2]

取半枝蓮10 kg，粗碎，80%乙醇回流提取3次，200目藥篩過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至2.0 g·mL-1。選用聚酰胺柱，用水洗脫，20%乙醇洗脫，70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，濃縮，干燥即得HSBFEP 0.453 kg，得率4.53%，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 對(duì)小鼠移植性腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究

2.2.1 S180、U14、EAC、HepA荷瘤小鼠模型建立[3]

分別取傳代7天S180、U14、EAC、HepA瘤源小鼠，抽無(wú)菌腹水（活細(xì)胞數(shù)大于95%），稀釋成2×107/mL細(xì)胞懸液，右前腋皮下接種0.2 mL懸液，制備S180、U14、EAC、HepA實(shí)體瘤模型。

2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥 分別取S180、U14、EAC、HepA荷瘤小鼠各40只，稱重，隨機(jī)分4組：模型組（ig等體積水）、CTX組（ip 20 mg·kg-1，隔日1次）、HSB-FEP高、低劑量組（ig 200、50 mg·kg-1，每日1次）。用水配制懸濁液CTX 1.0 mg·mL-1、HSBFEP 10 mg·mL-1（相當(dāng)于原藥材220.8 mg·mL-1），連續(xù)給藥10 d。末次給藥后處死動(dòng)物，剝離瘤塊，稱瘤重，計(jì)算抑瘤率。同時(shí)分離胸腺和脾臟，精密稱重，計(jì)算胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)，計(jì)算公式：

抑瘤率（%）=（模型組平均瘤重－給藥組平均瘤重）/模型組平均瘤重×100%

臟器指數(shù)（mg·g-1）=臟器重量（mg）/體重（g）

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS11.0軟件處理，進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。

3 結(jié) 果

3.1 HSB-FEP對(duì)各組荷瘤小鼠瘤重及體重影響

各組荷瘤小鼠接種6天后，觀察到模型組實(shí)體瘤，荷瘤小鼠逐漸出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)減少、毛發(fā)枯燥、消瘦。CTX組實(shí)體瘤生長(zhǎng)不明顯。HSB-FEP高劑量組實(shí)體瘤比模型組小。結(jié)果如表1所示。與模型組瘤重比較CTX組、HSB-FEP高劑量組（S180 P＜0.05，U14、EAC、HepA P＜0.01）能明顯抑制實(shí)體瘤生長(zhǎng)；與CTX組瘤重比較，HSB-FEP高劑量組（S180、EAC、HepA P＜0.05，U14 P＜0.01）抑瘤效果較好。

表1 HSB-FEP對(duì)各組荷瘤小鼠的抑制作用

3.2 HSB-FEP對(duì)各組荷瘤小鼠臟器指數(shù)影響

表2所示，與模型組比較，CTX組胸腺、脾臟指數(shù)顯著降低（P<0.01），各給藥組無(wú)差異；與CTX組比較，HSB-FEP高劑量、低劑量組均能顯著提高胸腺、脾臟指數(shù)（S180、U14、EAC、HepA均P<0.01），表明它能調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。

4 討 論

本實(shí)驗(yàn)選用S180、U14、EAC、HepA實(shí)體瘤模型研究HSB-FEP體內(nèi)抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)HSB-FEP高劑量組抑瘤率 S180為 33.87%、U14為 39.89%、 EAC為37.60%、HepA為46.29%，均達(dá)到中藥療效評(píng)價(jià)中規(guī)定的指標(biāo)[4]，表明有抗腫瘤活性。HSB-FEP高劑量組胸腺、脾臟指數(shù)增加，有良好的調(diào)節(jié)機(jī)體免疫作用，通過(guò)改善荷瘤機(jī)體的免疫功能低下狀態(tài)而發(fā)揮抑瘤活性；但其抑瘤作用機(jī)理，有待深入研究。

表2 HSB-FEP對(duì)各組荷瘤小鼠臟器指數(shù)的影響結(jié)果

[1] 蔡震峰，任風(fēng)蓮，申定珠．中草藥半枝蓮的研究進(jìn)展[J]．廣州化學(xué)，2006，31（4）：55．

[2] 姚新生.天然藥物化學(xué)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：150-2.

[3] 徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1786.

[4] 韓 銳.抗癌藥物研究與實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997：271-2.

Study on In-vivo Antitumor Activity of the Flavonoids Effective Parts from Scutellaria barbata D.Don

DOU Jin-ming1,JIN Han-wei2
1Weifang Hospital of Traditional Chinese Medicine,Weifang 261041;2Weifang Institute for Food and Drug Control,Weifang 261205

Objective:To study the in-vivo antitumor effect of the flavonoids effective parts from Scutellaria barbata D.Don(HSB-FEP).Methods:HSB-FEP were prepared.In in-vivo mice models of S180,U14,EAC and HepA solid tumors were established.HSB-FEP at 200 and 50mg·kg-1were given in tumor-bearing mice to evaluate the effects on solid tumor growth,body weight,spleen index,thymus index,tumor mass weight and the rates of tumor inhibition.Results and Conclusion:The results of in-vivo experiments showed that tumor growth(S180,U14,EAC and HepA)were apparently inhibited by HSB-FEP at 200mg·kg-1with inhibitory rates of 33.87%,39.89%,37.60%and 46.29%;spleen index and thymus index were significantly increased by HSB-FEP.

Scutellaria barbataD.Don;Flavonoids;Antitumor;S180;U14;EAC;HepA

R965.1

A

1673-7806（2015）01-021-02

竇錦明，男，專業(yè)方向：中藥制劑、抗腫瘤藥理研究E-mail:doujinming83@163.com

2014-08-18

2014-08-29