文 / 楊林，姜儀，郝瀧，薛鴻燕，劉曉風(fēng)（中藏藥篩選評(píng)價(jià)及深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院）

赤芝化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試

文 / 楊林*，姜儀，郝瀧，薛鴻燕，劉曉風(fēng)（*中藏藥篩選評(píng)價(jià)及深加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院）

采用中藥化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)方法，對(duì)赤芝藥材進(jìn)行13類化學(xué)成分的系統(tǒng)預(yù)試。結(jié)果：赤芝中檢出的成分類型有生物堿、氨基酸、多糖、皂甙、三萜、內(nèi)酯、香豆素及其甙。未檢測出的成分類型有黃酮類、酚類、鞣質(zhì)、強(qiáng)心苷、有機(jī)酸、蒽醌、揮發(fā)油、氰苷。

赤芝；Ganoderma lucidum；化學(xué)成分；系統(tǒng)預(yù)試

靈芝，自古就有“仙草”、“瑞草”之稱,是中醫(yī)扶正固本、滋補(bǔ)強(qiáng)壯的珍貴藥材，主要分布在浙江、江西、湖南、廣西、云南、貴州、福建、海南等地區(qū)。目前國內(nèi)外關(guān)于靈芝多糖及其藥理作用的研究已十分深入，對(duì)萜類成分的研究報(bào)道也比較多[1-2]，然而對(duì)靈芝中其他類型化學(xué)成分的研究報(bào)道卻鮮有涉及。對(duì)靈芝進(jìn)行全面的化學(xué)成分類型分析，闡明其主要化學(xué)成分類型是十分必要的。本文應(yīng)用化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法，對(duì)靈芝的化學(xué)成分類型進(jìn)行全面的檢識(shí)，研究結(jié)果將為靈芝活性成分、藥理作用、作用機(jī)制的深入研究提供科學(xué)的依據(jù)。

1、材料與方法

1.1 材料

藥材：靈芝，購自蘭州黃河中藥材專業(yè)市場，經(jīng)鑒定，所購靈芝為赤芝（Ganoderma lucidum）

儀器：數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）、水浴鍋（HH-4，國華電器有限公司）、萬能粉碎機(jī)等。試劑：95%乙醇、2%鹽酸溶液、乙醚、甲醇、氯化鈉、明膠、溴水、三氯化鐵等均為分析純。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 供試試液的制備

稱取3份15g樣品，分別采用蒸餾水100mL室溫浸泡過夜提取、100mL95%乙醇，水浴回流提取1h、20mL乙醇提取液，減壓濃縮成浸膏，加20mL 2%鹽酸溶液，制備水提取液、乙醇提取液、酸性乙醇提取液。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

參照文獻(xiàn)[3]，以不同供試液進(jìn)行各類化合物如氨基酸、多肽及蛋白質(zhì)類，糖及其苷類，黃酮及其苷類檢識(shí)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯時(shí)進(jìn)行重復(fù)。

2、結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目及結(jié)果

參照文獻(xiàn)[3]，以不同供試液進(jìn)行各類化合物檢識(shí)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果如表1：

表1 靈芝中化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試結(jié)果

檢查項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)名稱反應(yīng)現(xiàn)象 結(jié)果1．斐林試劑（F e h l i n g） 紅色沉淀 ＋2．萘酚試驗(yàn)（M o l i s h反應(yīng)） 出現(xiàn)紫紅色環(huán) ＋3．苯胺試劑 濾紙片出現(xiàn)紅色 ＋還原糖、多糖和甙皂甙1．泡沫試驗(yàn) 出現(xiàn)大量泡沫且長時(shí)間不消失 ＋2．乙酸酐-濃硫酸反應(yīng) 下層紫紅色，上層綠色 ＋黃酮類化合物1．鹽酸-鎂粉反應(yīng) 出現(xiàn)黃色 －2．堿液試驗(yàn) 有少量黃色斑點(diǎn)，不消失 －3．1 %的三氯化鋁乙醇溶液 無顏色變化 －1．乙酸酐-濃硫酸試驗(yàn) 有黃-紫-藍(lán)-綠變化 ＋2．醋酐濃硫酸反應(yīng) 有黃-藍(lán)-綠-紫-褪色 ＋3．氯仿-濃硫酸反應(yīng) 上層氯仿層呈紅色 ＋甾體膠三萜類化合物1．1 %三氯化鐵試劑 淺綠色 －2．香草醛-鹽酸試劑 濾紙四周有淺紅色斑點(diǎn) －3．三氯化鐵-鐵氰化鉀試劑 濾紙四周有少量綠色斑點(diǎn) －酚類化合物和鞣質(zhì)1．取乙醇提取液及水提取液點(diǎn)于濾紙片上 藍(lán)色熒光加堿后黃色熒光 ＋2．重氮化試驗(yàn) 試管顏色為紅色 ＋3．異羥肟酸鐵試驗(yàn)（酯的反應(yīng)） 紫色 ＋內(nèi)酯、香豆素及其甙1．堿性3 , 5 -二硝基苯甲酸試劑 淺綠色 －2．堿性苦味酸試劑（B a l j e t 試劑） 深黃色 －3．亞硝酰鐵氰化鈉試劑 淺黃色,加堿后顏色不變 －強(qiáng)心甙1．用p H試紙檢查 p H 7～8 －2．溴酚藍(lán)試劑 紅色斑點(diǎn) －有機(jī)酸1．1 %硼酸水溶液 淺綠色 －2．5 % K O H水溶液 淺黃色 －3．堿性試驗(yàn) 紫色且不消失 －揮發(fā)油 1．水提取液 無香味 －2．乙醇提取液滴于濾紙片上 無油斑，不揮發(fā) －氰苷 1．苦味酸鈉試驗(yàn) 深綠色 －蒽醌類

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：靈芝中含有生物堿、氨基酸、多糖、皂苷、三萜、內(nèi)酯、香豆素及其苷、有機(jī)酸等化學(xué)成分。而對(duì)其黃酮類、酚類、鞣質(zhì)、強(qiáng)心苷、有機(jī)酸、蒽醌類、揮發(fā)油、氰苷等沒有檢測出來。

3、結(jié)論

本文首次對(duì)赤芝進(jìn)行了13種類型化合物的檢識(shí)實(shí)驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明赤芝中除含有多糖、氨基酸，多肽，蛋白質(zhì)等當(dāng)前研究較多的成分類型以外，還含有生物堿、皂苷、香豆素等類型成分。當(dāng)前，有關(guān)靈芝多糖，蛋白質(zhì)等的研究報(bào)道較多，對(duì)其生物堿、皂苷以及香豆素類的研究報(bào)道還未見到，這些成分的性質(zhì)，作用特點(diǎn)等就成為下一步研究的重要內(nèi)容。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較全面地闡明了靈芝中存在的化學(xué)成分類型，為靈芝更深入的化學(xué)成分研究、藥理學(xué)研究以及相關(guān)產(chǎn)品的研究開發(fā)等提供了重要的依據(jù)。

[1]余竟光, 樊學(xué)川.薄蓋靈芝化學(xué)成分研究1[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào).1990, 25(5):15-18.

[2]陳體強(qiáng),李開本,何修金,等.靈芝浸膏粉微量元素與氨基酸測試分析簡報(bào) [J]. 中國中藥雜志.1994, 19(2):97.

[3] 肖崇厚. 中藥化學(xué)[M].上海:上海科學(xué)出版社, 1997, 595-601.