林 兵，王亞非，馬小陶，石 勱

(中日友好醫(yī)院營養(yǎng)科，北京 100029)

酗酒已成為一個(gè)全球性的公共衛(wèi)生問題。據(jù)統(tǒng)計(jì)，酗酒者的肝病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病比一般人群明顯升高。近年來，隨著我國經(jīng)濟(jì)社會的發(fā)展與人們社交活動的頻繁，酒的生產(chǎn)和消耗也在不斷增加。

大量研究表明，少量飲酒(約15～20g/d)對心腦血管、骨骼肌肉等方面具有一定的保護(hù)作用，而大量飲酒則是有害無益。長期飲酒極易導(dǎo)致某些營養(yǎng)素的缺乏和膳食結(jié)構(gòu)的破壞，進(jìn)而發(fā)生營養(yǎng)不良［1］，早期預(yù)防、早期診斷、及時(shí)治療、防止惡化是防治酒精相關(guān)性疾病包括營養(yǎng)素代謝紊亂的關(guān)鍵［2］，但是目前國外的研究集中在對飲酒人群各種高危疾病的回顧性分析，缺少飲酒對機(jī)體營養(yǎng)狀況的影響和詳細(xì)評價(jià)。

本研究通過研究連續(xù)酒精攝入4w 對大鼠營養(yǎng)進(jìn)食、體重及臟器重量等營養(yǎng)狀況的影響，評價(jià)飲酒對機(jī)體營養(yǎng)方面的早期危害。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

SPF 級SD 雌性大鼠，8w 齡，體重220～250g，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部試驗(yàn)動物中心提供，普通全價(jià)飼料單籠喂養(yǎng)，粗蛋白質(zhì)含量22%、能量密度3.6kcal/g，自主飲食，許可證號:SYXK (京)2011—0039。飼養(yǎng)環(huán)境:溫度21～23℃、濕度50%～60%RH。

1.2 主要試劑和儀器

HITACHI 7180 全自動生化分析儀(日本)，北京京衡JH-30A 計(jì)重秤，乙醇和叔丁醇為分析純。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

動物處理:大鼠按體重隨機(jī)分為對照組、模型組，考慮酒精急性毒性影響模型組給予12 只、對照組10 只，單籠飼養(yǎng)過渡性喂養(yǎng)1w 后給予灌胃干預(yù)。乙醇稀釋為50%體積分?jǐn)?shù)的酒精，灌胃劑量為15mL/kg，對照組蒸餾水灌胃15mL/kg。每周稱重調(diào)整灌胃量。

記錄大鼠一般生活狀況和每周進(jìn)食量，第29d 處死大鼠，股動脈取血，分離血清，稱重肝臟、腎臟、腦組織、脾臟、心臟和卵巢等組織器官的重量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有結(jié)果以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差表示，數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，確定P＜0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 體重增長變化

由于6g/kg 的乙醇劑量接近大鼠的醉酒劑量，因此模型組大鼠的生活狀態(tài)普遍較差，大便稀，有嗜睡、活動少等癥狀，其中有2 只大鼠因不能耐受分別于第3d和第14d 死亡。從表1 可以看出，大鼠攝入酒精后體重早期增長緩慢，第1w 的體重增長明顯小于對照組(P＜0.05)，對酒精逐漸耐受后，酒精攝入組大鼠的體重略低于對照組，但是兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 大鼠體重變化(±s，g)

表1 大鼠體重變化(±s，g)

注:與對照組相比，* P＜0.05。

2.2 進(jìn)食情況

與對照組相比，連續(xù)4w 酒精干預(yù)的SD 大鼠明顯減少了自主進(jìn)食的飼料量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，進(jìn)一步計(jì)算蛋白質(zhì)的進(jìn)食量，模型組大鼠蛋白質(zhì)的進(jìn)食量在各個(gè)時(shí)期均明顯減少(P＜0.05)。在合并了大鼠飼料和酒精的總能量后，除第一周模型組大鼠的能量攝入明顯低于對照組以外，其后時(shí)間，模型組大鼠的進(jìn)食總能量與對照組大鼠相比無明顯差異(表2、表3)。

表2 大鼠進(jìn)食情況比較(±s，g)

表2 大鼠進(jìn)食情況比較(±s，g)

注:與對照組相比，* P＜0.05。

表3 合并酒精后大鼠攝入的總能量(±s，kcal)

表3 合并酒精后大鼠攝入的總能量(±s，kcal)

2.3 肝臟和腎臟重量

肝臟和腎臟是酒精代謝主要器官，也是酒精的毒性的首要靶器官。從表4 中可以看出，模型組大鼠肝臟、腎臟的絕對重量和肝臟體重比有減少的趨勢，但是差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。

表4 大鼠肝臟和腎臟的重量比較(±s，g)

表4 大鼠肝臟和腎臟的重量比較(±s，g)

2.4 心、腦、脾、卵巢重量

與對照組相比，連續(xù)4w 酒精攝入后大鼠心臟、腦組織、卵巢和脾臟的重量并沒有顯著的變化，見表5。

表5 大鼠其他臟器的重量比較(±s，g)

表5 大鼠其他臟器的重量比較(±s，g)

3 討論

本研究采用4w 6g/kg 酒精灌胃造成大鼠的酒精中毒，主要評價(jià)酒精對青年SD 雌性大鼠營養(yǎng)狀況和組織器官的影響。在早期的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，SD 雌性大鼠的半數(shù)醉酒劑量(翻正反射消失)接近6g/kg［3］，此次采用此劑量分2 次/d 灌胃，早期仍有少量大鼠呈現(xiàn)醉酒狀態(tài)，且有2 只大鼠未能耐受而死亡，第2w 以后基本無醉酒發(fā)生。模型組大鼠接受酒精后短時(shí)有興奮，但大部分大鼠長期處于萎靡、肌肉乏力、運(yùn)動少、稀便等狀態(tài)。大量的研究表明，過量的飲酒會影響機(jī)體的營養(yǎng)代謝，有多種機(jī)制牽涉其中，首先的原因便是酒精攝入后減少了其他營養(yǎng)物質(zhì)的攝入。有足夠的能量攝入是大鼠正常生長發(fā)育的基礎(chǔ)，酒精作為一種供能物質(zhì)，每克提供7kcal 的能量，可是除此以外，不含大鼠發(fā)育所需要的蛋白質(zhì)、脂肪酸以及維生素、礦物質(zhì)等，由于機(jī)體需要的能量是相對固定的，酒精攝入后提供了能量攝入，反饋性地減少了其他供能物質(zhì)的攝入，也就減少了必須氨基酸、脂肪酸、礦物質(zhì)、維生素、纖維等的攝入。在美國大樣本的居民健康和營養(yǎng)狀況調(diào)查中同樣發(fā)現(xiàn)了飲酒者與非飲酒者的飲食結(jié)構(gòu)有明顯的差別［4］，這種不健康的膳食結(jié)構(gòu)對機(jī)體的不利的，但是目前缺乏有效的評價(jià)方法，尤其是是對早期影響的評價(jià)。在本研究中，模型組大鼠的酒精供能比大致在15%～20%之間，第1w由于大鼠的耐受性較差，影響了大鼠的進(jìn)食飼料，酒精供能比達(dá)30%。

大鼠的體重變化與營養(yǎng)素?cái)z入支出的差值是成正比的［5］，由于模型組大鼠在耐受了酒精后，總能量攝入與對照組相比已無明顯差異，而模型組大鼠精神狀態(tài)萎靡、嗜睡，活動性能量支出相對較少彌補(bǔ)了其消化吸收功能的不足，因此，第2w 以后模型組大鼠的體重增長情況與對照組大致相同。在整個(gè)試驗(yàn)周期，模型組大鼠體重比對照組減輕17.6g，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且截止試驗(yàn)完成仍無法逆轉(zhuǎn)這種差距，表明酒精攝入延緩了青年大鼠的生長發(fā)育，誘導(dǎo)營養(yǎng)不良。營養(yǎng)不良是飲酒導(dǎo)致的機(jī)體損害結(jié)果，也是發(fā)生其他酒精相關(guān)疾病的原因，對酒精性疾病的治療首先是戒酒，其次就是營養(yǎng)支持，修復(fù)營養(yǎng)攝入結(jié)構(gòu)，改善機(jī)體營養(yǎng)狀況［6］。因?yàn)殚L期營養(yǎng)失調(diào)會影響機(jī)體免疫功能，使肝臟的解毒能力和病原體的抵抗力降低，肝腎功能更易受到損害，各種并發(fā)癥的發(fā)生率提高。

急慢性酒精中毒均會引起肝腎以及其他器官的毒性，但是病程一般較長。使用酒精替代了近20%的能量攝入，對大鼠臟器的重量和臟器體重比沒有明顯的影響，這可能的原因是大鼠對酒精有一定的耐受性，按照既往的證據(jù)表明，飲酒后數(shù)天乃至數(shù)年的酒精性肝損傷通常為脂肪肝，如果機(jī)體整體功能較差時(shí)可進(jìn)展為酒精性肝炎，最后可能出現(xiàn)肝硬化。根據(jù)報(bào)道，肝硬化等實(shí)質(zhì)性病變出現(xiàn)的時(shí)間通常超過20年［7］。因此，4w 的酒精攝入對臟器的功能可能具有一定的影響，但還不會改變臟器的重量。本研究為早期摸索性試驗(yàn)，主要評價(jià)飲酒對營養(yǎng)攝入和生長發(fā)育等營養(yǎng)狀況，尚未進(jìn)一步研究酒精導(dǎo)致的肝腎心腦等臟器的毒性評價(jià)。

本研究闡明了酒精攝入對進(jìn)食、體重、臟器重量等大鼠營養(yǎng)狀況的影響，表明飲酒改變了大鼠的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，并對體重有明顯的影響。但是由于干預(yù)持續(xù)時(shí)間較短，沒有觀察到飲酒對臟器質(zhì)量的影響，有待進(jìn)一步研究，如肝腎等臟器功能的檢測、精細(xì)的營養(yǎng)評價(jià)指標(biāo)如鐵結(jié)合蛋白、白蛋白、血紅蛋白等的檢測對評價(jià)效果而言可能具有更高的靈敏度。

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［3］林兵，于永超，陳禹，等.玉米肽對急性酒精中毒大鼠的作用研究［J］.中國食物與營養(yǎng)，2014，20(4):66-68.

［4］Liangpunsakul S.Relationship between alcohol intake and dietary pattern:findings from NHANES III ［J］.World J Gastroenterol，2010，16(32):4055-4060.

［5］Liangpunsakul S，et al.Relationship among alcohol intake，body fat，and physical activity:a population-based study［J］.Ann Epidemiol，2010，20(9):670-675.

［6］Yuan G，Gong Z，Li J，et al.Ginkgo biloba extract protects against alcohol-induced liver injury in rats ［J］.Phytother Res，2007，21(3):234-238.

［7］常彬霞，王華，鄒正升，等.酒精性肝病的發(fā)病機(jī)理和新的治療靶點(diǎn)［J］.臨床肝病雜志，2014，30(2):113-116.