林鳳云，羅 易，楊潔芳△

（1.重慶醫(yī)藥高等專科學校藥學院，重慶401331；2.重慶市第九人民醫(yī)院藥劑科 400700）

鹽酸帕洛諾司瓊（palonosetron hydrochloride）是一種高效、高選擇性的新型5－HT3受體拮抗劑［1］，臨床常用于預防和緩解化療引起的惡心和嘔吐［2－4］。與其他5－HT3受體拮抗劑相比較，其治療劑量更小，作用時間更長。口腔崩解片（簡稱口崩片），是指患者服用時不必飲水，在口腔內少量唾液的作用下，即可在60s內迅速崩解成細顆粒的新型固體速釋劑型。該劑型具有服用方便、起效快、生物利用度高的特點［5－6］。將鹽酸帕洛諾司瓊制備成口腔崩解片，可解決老人、兒童及吞咽困難患者的服藥問題，避免了注射的痛苦，提高患者的用藥順應性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗材料 目前口腔崩解片最常用的制備方法是粉末直接壓片法，采用具有較強可壓性及崩解性的優(yōu)化微晶纖維素（SMCC）為填充劑，和崩解性能較強的崩解劑，如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉（CCMC－Na）、低取代羥丙甲基纖維素（L－HPC）和交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）等，使片劑可在短時間內崩解。

1.1.2 試劑與儀器 鹽酸帕洛諾司瓊對照品（重慶市藥品檢驗所，含量99.9%），鹽酸帕洛諾司瓊原料藥（江蘇正大天晴藥業(yè)，含量99.5%，批號130901），L－HPC（美國ISP公司），PVPP（XL－10，美國ISP公司），CCMC－Na（美國 FMC公司），SMCC（德國JRS公司），甘露醇（法國Roqustte公司），硬脂酸鎂（德國皮特脂化有限公司），微粉硅膠（德國 Wacker公司），阿斯巴甜（美國Nutlasweet公司），甜菊苷（南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司），甲醇（色譜純，Merck）。

DV215CD型電子天平（美國奧豪斯公司），2DP30型單沖壓片機（上海天凡藥機制造廠），RCZ－8型藥物智能溶出試驗儀（上海黃海藥檢儀器有限公司），78－XZ型片劑四用測定儀（上海黃海藥檢儀器廠），蘭博Series PC4060高效液相色譜儀（美國蘭博公司）。

1.2 方法

1.2.1 制備 按處方量稱取已過80目篩的主藥與輔料，等量遞加法混合均勻后直接壓片。每片重約60.0mg（每片含鹽酸帕洛諾司瓊0.5mg）。由于暫沒有鹽酸帕洛諾司瓊固體制劑上市，參照注射劑規(guī)格和參考文獻［7］的規(guī)格。

1.2.2 崩解時限的測定 根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理總局（CFDA）藥品審評中心發(fā)布的“口崩片的劑型特點和質量控制會議紀要”要求［8－9］，在5mL玻璃小管中預先盛有37℃的蒸餾水2mL，任取片劑1片置于小玻璃管中，即刻計時，靜態(tài)條件下觀察片劑崩解情況，以完全崩解且混懸介質全部通過710 μm（25目）篩網(wǎng)為準，記錄崩解時限。連續(xù)測定6片。

1.2.3 單因素考察

1.2.3.1 崩解劑的考察及其用量 以SMCC和甘露醇為填充劑，按片劑處方每片加入10%崩解劑，以崩解時限為評價指標，考察PVPP、CCMC－Na、L－HPC 3種崩解劑的優(yōu)劣。

1.2.3.2 矯味劑的考察 鹽酸帕洛諾司瓊味苦，為提高患者用藥順應性，必須對其進行矯味。初步選擇甜菊苷和阿斯巴甜作為矯味劑，按片重3%的比例將上述兩種矯味劑分別加入處方，其他組分不變，制備成口崩片備用。選擇6例22～32歲健康志愿者（男女各半），用水清潔口腔，口腔崩解片置于舌面，不飲水，不咀嚼，允許舌適當上下運動，考察口崩片的口感，試驗重復6次。

1.2.3.3 潤滑劑的考察 選擇微粉硅膠和硬脂酸鎂為潤滑劑，按處方量1%加入處方中，制備口崩片，考察崩解劑優(yōu)劣。

1.2.3.4 壓片硬度的考察 以L－HPC為崩解劑，甘露醇和SMCC為填充劑，硬脂酸鎂為潤滑劑，甜菊苷為矯味劑，改變壓片壓力制備口崩片，使片劑硬度分別為2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 kg，測其崩解時限。

1.2.3.5 正交試驗優(yōu)化處方 在單因素考察的基礎上，確定處方（60mg/片）由主藥鹽酸帕洛諾司瓊、崩解劑L－HPC、填充劑甘露醇和SMCC、潤滑劑硬脂酸鎂、矯味劑甜菊苷等組成。按L9（33）正交設計表設計正交試驗方案，考察L－HPC（A）、甘露醇和SMCC比值（B）、硬脂酸鎂質量百分比（C）對口腔崩解片質量的影響，以崩解時間（T）為考察指標。正交試驗因素水平見表1。

表1 正交試驗因素水平

1.2.3.6 最優(yōu)處方的驗證 按照優(yōu)化后的處方制備鹽酸帕洛諾司瓊口崩片樣品3批，考察3批樣品的口感和崩解時間，每批重復6次。

1.2.4 含量測定 采用高效液相色譜法（HPLC）測定藥物含量。

1.2.4.1 色譜條件及系統(tǒng)適應性［10－12］色譜柱為 Diamonsil ODS－C18柱（200mm×4.6mm，5μm），流動相為磷酸鹽緩沖液（pH3.1）－甲醇（60∶40），流速1.0mL/min，檢測波長241 nm，進樣量為10μL，柱溫25℃，理論塔板數(shù)不低于3 000。

1.2.4.2 溶液的配制 對照品溶液：取鹽酸帕洛諾司瓊對照品適量，精密稱定，用流動相溶解成每1mL含50μg的鹽酸帕洛諾司瓊對照品溶液。樣品溶液：取本品20片（批號20140316－3），研成細粉，精密稱取適量（約相當于鹽酸帕洛諾司瓊5mg）置100mL容量瓶中，用流動相超聲溶解并定量稀釋制成每1mL中含50μg的溶液，微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液作為對照品溶液，備用?？瞻纵o料溶液：按照制劑處方不加鹽酸帕洛諾司瓊，按供試品溶液配制方法配成空白輔料溶液。

1.2.4.3 專屬性實驗 取空白液、對照品液和樣品液各進樣10μL，記錄色譜圖。

1.2.4.4 標準曲線的制備 取鹽酸帕洛諾司瓊對照品10.17 mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，作為貯備液。分別精密量取貯備液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0、5.0、8.0、10.0mL置10mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。各取10μL進樣，記錄色譜圖，以質量濃度（C，μg/mL）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標進行線性回歸。

1.2.4.5 精密度試驗 取已配制好的對照品溶液，按“1.2.4.1”項下條件測定，同一天連續(xù)進樣6次、連續(xù)6d，每天測定含量，考察日內、日間精密度。

1.2.4.6 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12、24h進樣測定，考察穩(wěn)定性。

1.2.4.7 回收率試驗 精密稱取已知含量的鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片粉末（批號20140316－3），共9份，用流動相配制成相當于供試品溶液濃度80%，100%，120%的樣品各3份，按“1.2.4.1”項下條件測定，記錄峰面積。

1.2.4.8 含量均勻度測定 取樣品10片（批號20140316－3），每次將1片置于20mL容量瓶中，加入流動相超聲溶解，稀釋至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，以續(xù)濾液為供試品。另取適量對照品，精密稱定，同法配制成約50μg/mL的溶液作為對照品溶液。進樣10μL，計算每片含量及平均含量。

1.2.4.9 溶出度測定 按《中國藥典》2010年版二部附錄ⅩC第三法，以100mL水為溶出介質，轉速100r/min，溫度（37.0±0.5）℃，每一樣品重復6次。分別在0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、60.0min取樣1.5mL，0.45μm微孔濾膜過濾，同時補充1.5mL新鮮介質，取續(xù)濾液10μL進樣，依“1.2.4.1”項下方法測定含量。

2 結 果

2.1 單因素考察

2.1.1 崩解劑的考察及其用量 按片劑處方每片加入10%崩解劑時，PVPP、CCMC－Na、L－HPC 3種口腔崩解片的崩解時間分別為25、18、14s，L－HPC最優(yōu)，且不易吸濕。

2.1.2 矯味劑的考察 口感考察實驗結果，阿斯巴甜、甜菊苷所制口崩片的口感分別為微苦、微甜。甜菊苷優(yōu)于阿斯巴甜。再將甜菊苷以片重1%、2%、3%、4%、5%的比例制備口崩片，考察所制口崩片的口感，分別為苦、微苦、微甜、過甜、過甜。故選擇片重比例3%的甜菊苷為矯味劑。

2.1.3 潤滑劑的考察 硬脂酸鎂用量為 0.1%、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%時的崩解時限分別為11、14、18、25、30s，硬脂酸鎂用量增加可延長崩解時限，但均在30s內，且用量為0.1%、0.5%時壓片出現(xiàn)粘沖。故硬脂酸鎂用量應在1%～3%。

2.1.4 壓片硬度的考察 片劑硬度增大可延長崩解時限，硬度大于3.5kg時崩解時限大于30s；當硬度為1.0～2.5kg時，片劑出現(xiàn)松散或脆碎度不合格。最終選擇3.0kg為口崩片的硬度。

2.2 正交試驗優(yōu)化處方 由表2結果可見，因素A即L－HPC對結果的影響有顯著差異，3種因素的主次從大到小順序為LHPC、甘露醇與SMCC比例、硬脂酸鎂，最后確定的最佳工藝參數(shù)為：A3B3C2。即每片（60mg/片）中L－HPC用量為12%，甘露醇∶SMCC為2∶1，硬脂酸鎂為2%，3%的甜菊苷為矯味劑，硬度為3kg，每片含鹽酸帕洛諾司瓊0.5mg。

表2 L9（33）正交試驗結果

2.3 最優(yōu)處方的驗證 按照優(yōu)化后的處方制備3批樣品（批號分別為20140316－1、20140316－2、20140316－3）外觀均完整光潔、色澤均一，硬度為3kg，口感微甜，無沙礫感，能在12s內完全崩解，表明所制口崩片的口感和崩解時限均符合相關質量要求。按《中國藥典》2010年版二部附錄檢查脆碎度減重、主藥含量均勻度均符合要求。

2.4 含量測定

2.4.1 專屬性試驗 色譜圖顯示供試品溶液的主峰與對照溶液主峰的保留時間一致，在主成分出峰的位置沒有出現(xiàn)其他雜質峰，說明本測定方法符合要求，見圖1。

2.4.2 標準曲線 線性回歸方程為：A＝23.37C＋2.85，r2＝0.999 9，鹽酸帕洛諾司瓊濃度與峰面積在1.017～101.7μg·mL－1范圍內線性良好。

2.4.3 精密度試驗 結果顯示日內、日間RSD分別為0.67% 和0.88%，故本方法精密度良好。

圖1 鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片中鹽酸帕洛諾司瓊色譜圖

2.4.4 穩(wěn)定性試驗 峰面積的RSD為0.88%，說明供試品溶液在24h內穩(wěn)定性良好。

2.4.5 回收率試驗 結果測得低、中、高3濃度的平均回收率分別為99.2%，99.9%，100.3%；RSD分別為0.77%，0.59%和0.68%。

2.4.6 含量均勻度測定 按《中國藥典》2010年版附錄ⅩE含量均勻度檢查法計算，A＋1.80S≤15.00。3批樣品含量均勻度的測定結果分別為6.65，7.21，5.32，均小于15.00，結果表明，此口腔崩解片含量均勻度符合要求。

2.4.7 溶出度測定 結果顯示口腔崩解片在30s時溶出鹽酸帕洛諾司瓊超過55%，在1min時溶出超過75%，在2min時就達到88%，4min已經達到99%，釋放完全。表明鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片溶出性能良好，結果見圖2。

圖2 鹽酸帕洛諾司瓊口腔崩解片溶出曲線

3 討 論

口腔崩解片制法多樣［13］，直接壓片法不經制粒、干燥等過程，工藝簡單、成本低、應用廣，但對輔料的可壓性、流動性要求較高［14］。在本實驗制備過程中，發(fā)現(xiàn)SMCC流動性好、可壓性好，但由于SMCC不溶于水，在口中易造成砂礫感；而甘露醇口感好，但其流動性差，藥片易碎。本實驗將兩者合用，均衡其口感和流動性，大大改善了片劑的質量。

本研究通過正交試驗，以崩解時間為指標，優(yōu)化篩選出的處方（60mg/片）：以12%L－HPC、甘露醇∶SMCC為2∶1、2%硬脂酸鎂、3%甜菊苷，每片重60mg，主藥含量0.5mg/片。按最優(yōu)處方制備的3批樣品均口感良好，崩解時限為12s，4 min溶出度為99%，均符合要求。但藥物體內外崩解環(huán)境不同，崩解時限有一定的差異性，后期實驗中還應對口崩片的體內外崩解一致性做出評價。

［1］Rubenstein EB.Palonosetron：a unique 5－HT3receptor antagonist indicated for the prevention of acute and delayed chemotherapy－induced nausea and vomiting［J］.Clin Adv Hematol Oncol，2004，2（5）：284－289.

［2］Navari RM.Palonosetron for the treatment of chemother－apy－induced nausea and vomiting［J］.Expert Opin Pharmacother，2014，15（17）：2599－2608.

［3］Affronti ML，Bubalo J.Palonosetron in the management of chemotherapy－induced nausea and vomiting in patients receiving multiple－day chemotherapy［J］.Cancer Manag Res，2014，6（6）：329－337.

［4］Navari RM.Profile of netupitant/palonosetron（NEPA）fixed dose combination and its potential in the treatment of chemotherapy－induced nausea and vomiting（CINV）［J］.Drug Des Devel Ther，2015，9（9）：155－161.

［5］Evren AY.Orally disintegrating tablets：an overview［J］.J Appl Pharm Sci，2014，4（2）：118－125.

［6］Dharwal DJ，Shukla DS，Pandey DR，et al.Orally disintegrating tablets：a complete review on methodology［J］.A－sian J Res Pharm Sci，2013，3（4）：161－169.

［7］史香齡，邵方嫻，宋敏，等.鹽酸帕洛諾司瓊膠囊的人體藥動學及絕對生物利用度［J］.中國新藥雜志，2013，22（6）：681－685.

［8］國家食品藥品監(jiān)督管理局審評四部藥學組.口腔崩解片的劑型特點和質量控制會議紀要［EB/OL］.（2003－08－02）［2013－12－15］.http//www.Chinabaike.com/z/yiqi/2011/0327/634443.html.

［9］巫傳玲，于波濤，范開華.鹽酸異丙嗪口崩片的制備［J］.華西藥學雜志，2013，28（2）：129－131.

［10］Zhao HY，Li GP，Wu JF，et al.HPLC separation and determination of three optical isomers of palonosetron hydrochloride［J］.Chin J Pharm Anal，2012，32（6）：978－980.

［11］Janaki PP，Raju N.The estimation of palonosetron hydrochloride in parenterals by RP－HPLC［J］.Asian J Pharm Tech，2012，2（2）：2231－2713.

［12］鄭國鋼.HPLC法測定鹽酸帕洛諾司瓊的含量及有關物質［J］.藥物分析雜志，2010，30（7）：1264－1267.

［13］Patil C，Das S.Effect of various super disintegrants on the drug release profile and disintegration time of lamotrigine orally disintegrating tablets［J］.Afr J Pharm Pharmaco，2011，5（1）：76－82.

［14］Olmez SS，Vural I，Sahin S，et al.Formulation and evaluation of clozapine orally disintegrating tablets prepared by direct compression［J］.Pharmazie，2013，68（2）：110－116.