李 峰

(解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院燒傷整形科， 北京 100048)

·綜 述·

血竭促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)作用相關(guān)機(jī)制的研究進(jìn)展

李 峰

(解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院燒傷整形科， 北京 100048)

血竭(dragon’s blood) 是中醫(yī)常用的活血散瘀藥，主要分為兩類：一類是進(jìn)口血竭，是由東南亞熱帶地區(qū)棕櫚科黃藤屬植物果實(shí)分泌的樹(shù)脂；另一類是國(guó)產(chǎn)血竭，產(chǎn)于海南、廣西、云南等地，是來(lái)自于龍舌蘭科植物劍葉龍血樹(shù)的樹(shù)脂，即龍血竭。二者在化學(xué)成分上存在較大差異，但在藥理和臨床療效上基本一致。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，血竭具有散瘀止痛、祛腐生肌等作用?！洞竺鞅静荨分杏浭銎洹爸我磺袗函徑臧_久不合者”，故中醫(yī)諸家生肌方劑均不離此藥。據(jù)統(tǒng)計(jì)，血竭是古籍醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)記載生肌類方劑中應(yīng)用頻率最高的藥物[1]。現(xiàn)代的臨床研究、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)血竭及含有血竭的生肌藥物對(duì)促進(jìn)燒傷、壓瘡和糖尿病足等急、慢性創(chuàng)面修復(fù)具有確切的療效[2-3]，但其作用機(jī)制并不明確。不論是急性創(chuàng)面、慢性創(chuàng)面，其創(chuàng)面修復(fù)的過(guò)程中存在一定的共性。以下就血竭促進(jìn)急、慢性創(chuàng)面修復(fù)的機(jī)制綜述如下。

1 血竭對(duì)血糖的調(diào)節(jié)作用

穩(wěn)定血糖是促進(jìn)燒傷等急性創(chuàng)面修復(fù)的必要條件，對(duì)糖尿病潰瘍等慢性創(chuàng)面的修復(fù)則起十分重要的基礎(chǔ)性作用。劉培培等[4]通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，龍血竭提取物對(duì)正常小鼠空腹血糖無(wú)明顯降低作用，但能降低四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠的空腹血糖水平，改善小鼠對(duì)蔗糖的耐受力，增加正常小鼠的胰島素分泌。研究發(fā)現(xiàn)，龍血竭中黃酮類化合物對(duì)α-D-葡萄糖苷酶具有強(qiáng)抑制作用。α-葡萄糖苷酶抑制劑通過(guò)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制小腸刷狀緣上皮細(xì)胞的α-葡萄糖苷酶，使淀粉分解成麥芽糖(雙糖)、麥芽三糖及糊精(低聚糖)，進(jìn)而分解成葡萄糖的速度減慢，使蔗糖分解成葡萄糖和果糖的速度亦減慢，從而延緩葡萄糖的吸收，降低餐后血糖的升高幅度[5-6]。另有研究發(fā)現(xiàn)，血竭還可提高己糖激酶、蘋(píng)果酸脫氫酶活性，進(jìn)而影響葡萄糖氧化分解過(guò)程，加強(qiáng)葡萄糖的分解利用，從而降低血糖[7]。

2 血竭的抗過(guò)氧化作用

在傷后炎癥反應(yīng)過(guò)程中，創(chuàng)面巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞產(chǎn)生大量的活性氧，起到殺菌、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、調(diào)節(jié)炎癥等作用，但如果活性氧持續(xù)或過(guò)度產(chǎn)生，又將導(dǎo)致組織損害，不利于創(chuàng)面愈合。活性氧會(huì)導(dǎo)致修復(fù)細(xì)胞的遷移、增殖能力下降、細(xì)胞外基質(zhì)合成障礙。活性氧持續(xù)或過(guò)多地產(chǎn)生，是導(dǎo)致慢性創(chuàng)面難愈的原因之一。師梅梅等[8]對(duì)龍血竭體外抗氧化作用的研究表明，龍血竭清除1-二苯基-2-苦苯肼自由基、超氧陰離子和羥自由基的作用，僅略弱于其相應(yīng)的陽(yáng)性對(duì)照維生素C，而對(duì)Fe2+誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的抑制作用則強(qiáng)于維生素C，對(duì)β-胡蘿卜素/亞油酸的自氧化體系也有顯著的抑制作用。羅志紅等[9]制備大鼠背部撕脫碾壓皮瓣模型，發(fā)現(xiàn)采用龍血竭外用或灌胃均可減輕中性粒細(xì)胞在皮瓣中的聚集，降低組織丙二醛含量、降低超氧化物歧化酶(SOD) 及髓過(guò)氧化物酶(MPO)活性，說(shuō)明龍血竭可提高組織的抗氧化能力，從而發(fā)揮對(duì)組織的保護(hù)作用。Chang等[10]發(fā)現(xiàn)，血竭乙醇提取物可抑制高糖環(huán)境誘使血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)多一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和活性氧簇(ROS)，從而起到內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用。

3 血竭的抗感染作用

控制感染是燒傷創(chuàng)面及慢性創(chuàng)面處理的重要部分。血竭本身是由龍血樹(shù)等植物分泌的為了抵抗機(jī)械損傷、抗微生物特別是真菌侵染所產(chǎn)生的一種應(yīng)激防衛(wèi)反應(yīng)的產(chǎn)物，因此，血竭具有一定的抗菌、抗病毒活性。體外實(shí)驗(yàn)證明，龍血竭提取物對(duì)白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌、須癬毛癬菌均有抑制作用[11]，海南血竭的提取物對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有較弱的抑制作用[12-13]。龍血竭對(duì)一些厭氧菌有較強(qiáng)的抑菌作用，抑菌活性成分為血竭樹(shù)脂中的對(duì)羥基苯甲酸乙酯等[14]。也有研究發(fā)現(xiàn)血竭樹(shù)脂提取物的抑菌作用與多酚類成分有關(guān)[15]。

4 血竭對(duì)微循環(huán)的改善作用

燒傷后微循環(huán)的改變對(duì)創(chuàng)面的轉(zhuǎn)歸有重要影響。通常，根據(jù)創(chuàng)面局部損傷程度和微循環(huán)狀態(tài)，可將燒傷創(chuàng)面由中心至外周劃分為凝固壞死區(qū)、循環(huán)淤滯區(qū)和組織充血區(qū)，其中循環(huán)淤滯區(qū)的轉(zhuǎn)歸決定著局部損傷的程度，如果微循環(huán)淤滯加重則損傷進(jìn)一步發(fā)展為全層皮膚凝固壞死；如果微循環(huán)改善，則局部損傷減輕、損傷范圍縮小。血竭被譽(yù)為“活血圣藥”，活血散瘀是其重要功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)也證明血竭對(duì)改善微循環(huán)療效確切。在全身治療方面，血竭可顯著降低急性血

瘀模型大鼠全血黏度、血漿黏度和紅細(xì)胞壓積，改善血瘀模型的黏、濃、凝、聚等血液流變學(xué)異常[16]；抑制血小板黏附、聚集，對(duì)抗血小板活化而起抗血栓形成作用[17]；縮短血瘀模型大鼠的血栓長(zhǎng)度，降低血栓干、濕質(zhì)量[18]。在小鼠尾靜脈注射腺苷二磷酸(ADP)形成肺栓塞、電刺激大鼠頸動(dòng)脈促進(jìn)動(dòng)脈血栓形成兩種功能模型的研究中，給予血竭灌胃后發(fā)現(xiàn)，血竭可大幅度減少ADP注射導(dǎo)致的小鼠突然死亡，顯著延長(zhǎng)電刺激后頸動(dòng)脈血栓形成的時(shí)間[19]。在局部治療方面，在大鼠背部撕脫并碾壓皮瓣模型上外用龍血竭粉，再采用激光多普勒血流檢測(cè)儀檢測(cè)皮瓣血流量可發(fā)現(xiàn)，皮瓣微循環(huán)血流量顯著升高，從而提高了皮瓣的成活面積[20]。目前認(rèn)為血竭的抗凝作用與其抗血小板聚集作用有關(guān)，血竭在體外、體內(nèi)均可降低花生四烯酸、ADP及血小板活化因子(PAF)誘導(dǎo)的血小板聚集率[19]。

5 血竭對(duì)創(chuàng)面修復(fù)的直接作用

5.1 血竭對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的作用 傷口愈合一般經(jīng)過(guò)傷口收縮、肉芽組織填充與再上皮化3個(gè)過(guò)程。其中，再上皮化要經(jīng)過(guò)角質(zhì)形成細(xì)胞激活、游走、增殖及基膜的修復(fù)等過(guò)程，角質(zhì)形成細(xì)胞游走是表皮創(chuàng)傷愈合的起始階段，尤其在傷后48～96 h，創(chuàng)面覆蓋與細(xì)胞有絲分裂無(wú)關(guān)，而是依靠角質(zhì)形成細(xì)胞的游走完成的。研究發(fā)現(xiàn)，角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)液中加入血竭形成較高濃度 (2×10-1，2×10-2，2×10-3mg/ml)，48 h后血竭可明顯促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞游走[21]。另有研究表明，在濃度為0.5 mg/ml時(shí)，血竭乙酸乙酯提取物對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞具有顯著的促進(jìn)增殖作用[22]。表皮覆蓋是創(chuàng)面愈合的關(guān)鍵步驟，而角質(zhì)形成細(xì)胞占表皮細(xì)胞構(gòu)成的90%，加快角質(zhì)形成細(xì)胞游走及其增殖的速度可以縮短傷口愈合中再上皮化的進(jìn)程。

5.2 血竭對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用 血管新生是創(chuàng)傷愈合的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，血管再生的程度直接影響傷口愈合的速度。中醫(yī)認(rèn)為“淤血不去，新血不生”，所以應(yīng)通過(guò)“祛淤生肌”、“活血生肌”，改善創(chuàng)面血供，可促進(jìn)創(chuàng)面愈合。許多因素包括(生長(zhǎng)因子)控制著血管新生，其中，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)是最強(qiáng)的促血管再生因子，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖分化，誘導(dǎo)血管新生。Liu等[23]報(bào)道，大鼠全層皮膚缺損動(dòng)物模型上應(yīng)用龍血竭乙醇提取物，可顯著促進(jìn)新生組織的VEGFmRNA和蛋白表達(dá)，提高微血管密度和組織抗拉強(qiáng)度。滕建英等[24]在豬Ⅲ度燒傷創(chuàng)面植入含有不同濃度血竭的真皮支架，發(fā)現(xiàn)在術(shù)后1～3周，植入負(fù)載高濃度血竭支架的創(chuàng)面VEGF的陽(yáng)性表達(dá)信號(hào)最高，低濃度組次之，未負(fù)載組最少。另有實(shí)驗(yàn)證明，在去除小鼠觸須部表皮形成的創(chuàng)面上，涂以龍血竭混懸液同時(shí)內(nèi)服龍血竭，可使VEGF蛋白表達(dá)明顯增多，其效果優(yōu)于使用表皮生長(zhǎng)因子[25]。

5.3 血竭對(duì)成纖維細(xì)胞的作用 肉芽組織填充是創(chuàng)面愈合中的關(guān)鍵步驟，成纖維細(xì)胞是創(chuàng)面修復(fù)的主要功能細(xì)胞。肉芽增生一般經(jīng)過(guò)成纖維細(xì)胞激活、遷移、增殖及分泌膠原和基質(zhì)成分，與新生毛細(xì)血管等共同構(gòu)成肉芽組織填補(bǔ)組織缺損，為表皮細(xì)胞的覆蓋創(chuàng)造條件。成纖維細(xì)胞的衰老、增殖緩慢甚至停頓、產(chǎn)生膠原的能力減弱以及對(duì)生長(zhǎng)因子的刺激反應(yīng)性降低，是創(chuàng)面愈合緩慢乃至慢性潰瘍形成的重要因素。在大鼠創(chuàng)面外用5%龍血竭提取物，可觀察到成纖維細(xì)胞和新生膠原較多、膠原排列有序的現(xiàn)象[26]。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，血竭素高氯酸鹽在0.625～1.250 mg/L濃度范圍內(nèi)，可促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖且呈劑量依賴性，細(xì)胞周期進(jìn)程加快，同時(shí)可促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子mRNA表達(dá)[27]。另有體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，血竭的主要有效成分血竭素，在一定的濃度范圍內(nèi)不但促進(jìn)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖，還可促進(jìn)膠原蛋白分泌[28]。但另一方面，血竭素對(duì)增生性瘢痕來(lái)源的成纖維細(xì)胞的增殖及膠原分泌卻有一定的抑制作用[29]。

綜上，血竭作為傳統(tǒng)的傷科要藥，在全身治療層面可穩(wěn)定血糖、抗凝活血，在局部治療層面具有抗氧化、抗菌、促進(jìn)表皮細(xì)胞游走及增殖、促進(jìn)毛細(xì)血管新生和VEGF表達(dá)、促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)等多種作用。同時(shí)，由于血竭的來(lái)源多樣，每種來(lái)源的成分又極其復(fù)雜，使用方法上既有局部外用又有全身性用藥，因此目前對(duì)血竭的藥理研究只是初步進(jìn)行，有待于在其有效成分的篩選及作用機(jī)制等方面進(jìn)一步深入研究。

[1] 顏燕艮, 何振輝. 古籍文獻(xiàn)中以生肌功效命名的外用古方淺析[J]. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 19 (3) : 234-235.

[2] 徐嘉琦, 何依寧, 李節(jié), 毛靖. 龍血竭外敷治療褥瘡療效與安全性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)循證醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 13(10): 1236-1243.

[3] Liu H, Lin S, Xiao D, Zheng X, Gu Y, Guo S. Evaluation of the wound healing potential of resina draconis (dracaena cochinchinensis) in animal models[J]. Evid Based Complement Alternat Med, 2013, 2013:709865.

[4] 劉培培, 雍克嵐, 呂敬慈, 欒梅, 張?zhí)鞂? 龍血竭提取物對(duì)正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的影響[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2006, 17(10):1886-1888.

[5] 周曉惠, 呂敬慈, 雍克嵐. 廣西龍血竭游離黃酮類化合物的分離鑒定及活性研究[J]. 上海大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2007, 13(2):212-215.

[6] Gu HJ, Lv JC, Yong KL, Chen X, Liu PP, Zhang XB. Antidiabetic effect of an active fraction extracted from dragon’s blood (dracaena cochinchinensis) [J]. J Enzyme Inhib Med Chem, 2009, 24(1):136-139.

[7] 孫延娜，柳春，馮曉帆, 王艷杰, 徐峰, 張麗艷. 血竭乳劑對(duì)四氧嘧啶造模糖尿病小鼠己糖激酶及蘋(píng)果酸脫氫酶活性的影響[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2007, 9(3)：89-90.

[8] 師梅梅, 楊建雄. 龍血竭膠囊的體外抗氧化研究[J]. 中成藥, 2007, 29(11): 1591-1594.

[9] 羅志紅, 魯開(kāi)化, 張榮平, 寧亞功, 王繼華, 胡煒彥, 康文博, 王師平. 龍血竭對(duì)大鼠撕脫皮瓣的保護(hù)作用[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2010, 16(4): 152-154.

[10] Chang Y, Chang TC, Lee JJ, Chang NC, Huang YK, Choy CS, Jayakumar T. Sanguis draconis, a dragon’s blood resin, attenuates high glucose-induced oxidative stress and endothelial dysfunction in human umbilical vein endothelial cells[J]. Sci World J, 2014, 2014: 423259.DOI:10.1155/2014/423259.2014-06-02

[11] 高穎, 張慶云, 曹廣軍, 董小青, 郭鵬, 胡迎慶. 兩種工藝提取的龍血竭體外抗真菌活性比較[J]. 武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2004,13(3):183-185.

[12] 陳惠琴, 梅文莉, 左文健, 王輝, 趙友興, 戴好富, 王金輝. 海南血竭的化學(xué)成分研究[J]. 中國(guó)藥物化學(xué)雜志, 2011, 21(4):308-311.

[13] 申海艷, 戴好富, 趙友興, 羅應(yīng), 陳惠琴, 梅文莉. 海南血竭的抗菌活性成分研究[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2012, 23(12): 2954-2956.

[14] 李艷紅, 劉娟, 楊麗川, 張燦華, 李罡. 6種云南天然藥物對(duì)口腔優(yōu)勢(shì)菌的抗菌活性測(cè)定[J]. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2010, 28(2): 199-202.

[15] Gupta D，Gupta RK. Bioprotective properties of dragon’s blood resin: in vitro evaluation of antioxidant activity and antimicrobial activity[J]. BMC Complement Altern Med，2011，11: 13.

[16] 楊為民, 皮耀萍, 吳婉玲. 復(fù)方血竭膠囊對(duì)血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2003, 9(5) : 24-25.

[17] 賈敏. 血竭總黃酮抗血栓作用及機(jī)制研究[J]. 中國(guó)藥物與臨床, 2014, 14(2): 182-183.

[18] 李小平, 曾召綿, 王彬. 黃芪、血竭對(duì)血栓和燒燙傷的協(xié)同作用研究[J]. 保健醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐, 2014, 11(1): 6-8.

[19] 楊麗川, 陳鵬, 雷偉亞, 胡建林, 陳植和, 沈志強(qiáng). β環(huán)糊精包合血竭對(duì)血小板聚集和血栓形成的影響[J]. 昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2007, 28(6): 33-38.

[20] 羅志紅, 魯開(kāi)化, 張榮平, 王繼華, 胡煒彥, 康文博, 王師平. 龍血竭對(duì)大鼠撕脫皮瓣存活面積影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2010, 16(3): 119-121.

[21] 陳德利, 高青云, 施偉民, 徐倩, 樸英蘭, 沈亮亮. 中藥中活血化瘀藥對(duì)皮膚創(chuàng)傷愈合的影響[J]. 上海醫(yī)學(xué), 2000, 23(3): 145-147.

[22] 李丹, 郭樹(shù)忠, 王勝春, 張琳西, 易成剛, 胡永武, 張旭東. 血竭提取物對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響[J]. 中國(guó)美容醫(yī)學(xué), 2005, 14(3): 274-276.

[23] Liu H, Lin S, Xiao D, Zheng X, Gu Y, Guo S. Evaluation of the wound healing potential of resina draconis (dracaena cochinchinensis) in animal Models[J]. Evid Based Complement Alternat Med,2013,2013:709865.

[24] 滕建英, 任園園, 徐少駿, 郭瑞, 郭健, 吳佳佳, 朱金土, 倪有娣. 血竭負(fù)載人工真皮支架對(duì)豬Ⅲ°燒傷創(chuàng)面修復(fù)中VEGF表達(dá)及創(chuàng)面收縮的影響[J]. 健康研究, 2013, 33(6): 415-418.

[25] 劉愛(ài)軍，易華，杜標(biāo)炎. 龍血竭對(duì)小鼠觸須創(chuàng)面血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2011, 22(7) :1641-1642.

[26] 劉輝輝,肖丹,鄭曉,顧巖,郭善禹. 龍血竭提取物促進(jìn)創(chuàng)面愈合的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 組織工程與重建外科雜志, 2013, 9(4): 199-203

[27] 白曉智, 胡大海, 劉洋, 白麗, 蘇映軍, 湯朝武. 血竭素高氯酸鹽對(duì)成纖維細(xì)胞增殖與成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子mRNA表達(dá)的影響[J]. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志, 2012, 29(1): 49-51.

[28] 張瑋，李萍，黃啟福, 趙京霞, 盛巡. 幾類常用外用中藥成分對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響[J]. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2007, 30(1): 36-39.

[29] 張培華, 羅少軍, 湯少明. 血竭素對(duì)瘢痕成纖維細(xì)胞膠原合成的影[J]. 中國(guó)美容醫(yī)學(xué), 2006, 15(6): 624-626.

10.3969/j.issn.1672-8521.2015.01.018

海南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(813225.00)

2014-09-10)