王啟龍

摘要：目的 探討乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關(guān)性，為臨床治療乙型肝炎提供參考。方法 采用熒光定量法對我院2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者乙肝病毒HBV-DNA含量進行測定，同時采用ELISA法進行兩對半指標的檢測，對比分析檢測結(jié)果。結(jié)果 125例HBV-DNA呈陽性，占52.08%；115例HBV-DNA呈陰性，占47.92%。定量為5.0×102IU/ml～5.0×108IU/ml。125例HBV-DNA陽性標本中，小二陽14例陽性，小三陽35例陽性，大三陽76例陽性。結(jié)論 HBeAg與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)性，為臨床制定合理的乙肝治療方案提供了依據(jù)，有利于抑制乙肝病毒的傳染。

關(guān)鍵詞：乙肝；兩對半模式；DNA定量；相關(guān)性

乙型肝炎是目前我國主要傳染病之一，可引起慢性、急性遷移性肝炎或肝癌。我國是乙肝高發(fā)區(qū)，相關(guān)調(diào)查結(jié)果顯示，我國乙肝病毒感染人群高達10%左右[1]。乙肝兩對半檢測是臨床診斷乙型肝炎最常用的指標，可對人體乙肝病毒的免疫反應(yīng)狀態(tài)進行反映。HBV-DNA是衡量乙肝傳染性最精確的手段，是確定乙肝病毒感染不同復(fù)制狀態(tài)的重要方法，HBV-DNA陽性顯示病毒具有傳染性[2]。為探究乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關(guān)性，為制定合理治療方案提供科學(xué)依據(jù)，我院對2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者乙肝病毒HBV-DNA含量及兩對半指標進行檢測，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者的臨床資料，排除標準：合并有嚴重心腦血管疾病患者；有精神病遺傳史或家族史患者；無法進行良性溝通的患者。入選資料中男130例，女110例；年齡24～69歲，平均年齡（38.5±1.9）歲?；颊邔Ρ狙芯烤?，并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1血液采集 抽取患者早晨空腹肘靜脈血液5ml，室溫放置2h 3000r/m離心10min，吸取血清-20℃保存。避免反復(fù)凍融。

1.2.2 HBV-DNA含量檢測 采用熒光定量PCR法對患者血清標本HBV-DNA含量進行檢測，采用STRATAGENEMx3000P熒光定量PCR儀。采用FQ-PCR法對HBV-DNA進行定量分析，試劑由廈門安普利生物工程有限公司提供，小于5×102IU/ml為陰性（-），超過5×102IU/ml為陽性（+）。

1.2.3兩對半檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗對患者血清兩對半模式進行檢測，試劑由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供。所有檢測均嚴格按照說明書進行，實驗室設(shè)備及操作均嚴格按照衛(wèi)生部頒發(fā)的實驗室工作規(guī)范要求進行，以確保檢測的準確性及符合度。

2 結(jié)果

2.1 HBV-DNA定量檢測結(jié)果 240例疑似乙型肝炎患者血清標本中，125例HBV-DNA呈陽性，占52.08%；115例HBV-DNA呈陰性，占47.92%。定量5.0×102IU/ml～5.0×108IU/ml。

2.2 HBV-DNA定量與乙肝兩對半模式的關(guān)系 結(jié)果顯示，HBV血清標志物為陽性模式中，均存在不同程度的病毒復(fù)制，125例HBV-DNA陽性標本中，小二陽14例陽性，小三陽35例陽性，大三陽76例陽性，見表1。

3 討論

乙肝兩對半是臨床最常見的乙肝病毒感染檢測標志物，乙型肝炎病毒免疫學(xué)標志共有三對，分別為表面抗原和表面抗體、e抗原和e抗體、核心抗原和核心抗體[3]。表面抗原是人體已經(jīng)感染病毒的標志，無法反映病毒有無復(fù)制、復(fù)制程度及傳染性強弱等情況；表面抗體是中和性抗體標志，同時是是否有抵抗力及是否康復(fù)的主要標志；e抗原為病毒復(fù)制標志，持續(xù)陽性3個月則有慢性化傾向；e抗體是病毒復(fù)制停止的標志，標志著病毒復(fù)制減少，傳染性較弱；核心抗體是曾經(jīng)感染或正在感染都可出現(xiàn)的標志，對于輔助兩對半檢查具有重要意義[4]。乙肝兩對半又被稱為乙肝五項，其檢查意義在于探究乙肝感染的具體情況。

乙肝病毒DNA是判斷乙肝病毒有無復(fù)制的黃金指標，其主要用來判斷體內(nèi)乙肝病毒含量及傳染程度，HBV-DAN含量越高則表示病毒復(fù)制能力越強、傳染性越強。

FQ-PCR是進行基因診斷的有效手段，采用全封閉管進行檢測，不需進行PCR處理，有效避免了較差污染。實時檢測技術(shù)的采用，使所得原始模板數(shù)量呈線性相關(guān)，定量準確率較高。國外研究成果表明，F(xiàn)Q-PCR不僅具有普通PCR的靈敏度，由于熒光探針的應(yīng)用，可通過廣電傳統(tǒng)對PCR擴增過程中的熒光信號進行直接探測，因此，該方式還具有光譜高精確性及DNA雜交的高特異性，并在極大程度上客服了PCR的眾多缺陷，可用于臨床疾病的早期病原體快速診斷、病情及預(yù)后評估，并可對治療效果及遺傳性疾病、腫瘤等進行診斷。ELISA檢測法檢測乙肝兩對半是臨床診斷乙肝病毒感染的傳統(tǒng)手段，它可反應(yīng)人體對乙肝病毒的免疫反應(yīng)狀態(tài)。ELISA是檢測乙肝兩對半的有效方法，F(xiàn)A-PCR可準確反應(yīng)HBV-DNA復(fù)制水平變化，有利于病情變化及治療效果的觀察。

本研究中，大三陽乙肝病毒陽性率高于小二陽及小三陽患者，與前人研究成果一致。部分HBeAg陽性患者仍存在HBV-DNA為陰性的情況，可能與HBV-DNA的消失比HBeAg消失早或病毒發(fā)生變異。小三陽、小二陽HBV-DNA陽性率雖低于大三陽，但仍存在HBV-DNA陽性，提示病毒并未停止復(fù)制，只是在一定程度上減緩了復(fù)制速度，可能與HBV發(fā)生前，病毒基因發(fā)生突變或機體發(fā)生特異性免疫耐受有關(guān)。特異性免疫耐受性的突變在極大程度上引起HBeAg分泌，但對病毒本身的復(fù)制不產(chǎn)生影響。在HBeAg為陰性的模式中，部分樣本HBV-DNA濃度較高，可見，乙肝患者血液循環(huán)中HBV-DNA與HBeAg具有相關(guān)性。本研究表明，HBeAg陽性標本通暢存在較高濃度HBV-DNA，HBeAg陰性組HBV-DNA濃度較低，經(jīng)推理可得HBeAg與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)性。

綜上所述，乙肝兩對半及HBV-DNA術(shù)基層醫(yī)療機構(gòu)常規(guī)檢查項目，乙肝兩隊邊可充分反映乙肝患者的病情狀況，HBV-DNA檢測則可對乙肝病毒是否存在傳染性進行判斷，HBeAg與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)性，為臨床制定合理治療乙肝方案提供了依據(jù)。對疑似乙肝病毒攜帶者可定期進行HBV-DNA的檢測，以確定其是否存在傳染性，從而從根源上抑制乙肝病毒的傳染。

參考文獻：

[1]于永歌，佟靜，陳瑩潔.乙型肝炎病毒與HBV-DNA定量的相關(guān)性分析[J].中外健康文摘，2014，20：186-187.

[2]孫翠平.乙肝兩對半與HBV-DNA復(fù)制的臨床對比以及聯(lián)系[J].中國保健營養(yǎng)（中旬刊），2013，3：590-591.

[3]彭宇生.乙肝病毒外膜大蛋白檢測在診斷乙型病毒性肝炎中的臨床意義[J].中國保健營養(yǎng)（中旬刊），2013，1：402-402.

[4]曾蕓珠，歐陽少燕.乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關(guān)性分析[J].醫(yī)學(xué)信息，2013，28：240-240.編輯/成森