陳麗珍，周 丹，艾朝輝，李 娟，翟銳銳

(海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，海南 ?？?571199)

海南冰糖草中4種重金屬元素含量分析

陳麗珍，周 丹，艾朝輝，李 娟，翟銳銳*

(海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，海南 ?？?571199)

目的：建立海南產(chǎn)冰糖草中重金屬元素含量測(cè)定方法，測(cè)定其重金屬元素含量。方法：采用氫化物原子熒光法建立冰糖草中重金屬砷、汞、鉛、鎘元素的分析檢測(cè)方法。結(jié)果：4種重金屬元素的線性相關(guān)系數(shù)為0.9991-0.9999，精密度小于2.74 %，加標(biāo)回收率為95 %～102.3 %，RSD≤3.36 %。冰糖草中重金屬元素含量均符合綠色中藥標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、穩(wěn)定，可用于冰糖草的質(zhì)量控制。

冰糖草；重金屬元素；原子熒光法；含量分析

冰糖草又名野甘草、香儀、假甘草、假枸杞等，為玄參科植物野甘草(ScopariadulcisL．)的全株，主要分布在廣西、海南、廣東、福建、臺(tái)灣等地。其味甘，性涼，具有疏風(fēng)止咳，清熱解毒，利尿消腫的功效[1]，可用于治療感冒發(fā)熱、肺熱咳嗽、暑熱吐瀉、腳氣浮腫、小兒麻疹、濕疹、熱痱、高血壓和丹毒等證[2]。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)冰糖草的化學(xué)成分、藥理、生藥學(xué)等方面研究進(jìn)行報(bào)道[2-4]，但對(duì)其重金屬元素含量方面的研究未見(jiàn)報(bào)道，故采用以氫化物原子熒光法建立冰糖草中砷、汞、鉛、鎘4種重金屬元素進(jìn)行測(cè)定分析[5-9]，旨在為冰糖草的采集、進(jìn)一步完善其質(zhì)量控制和開(kāi)發(fā)利用等方面提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

3510原子吸收分光光度計(jì)[安捷倫科技(上海)儀器有限公司]；AFS-830雙道原子熒光光度計(jì)(北京吉天儀器有限公司)；鉛、砷、汞、鎘編碼空心陰極燈。

1.2 試藥

冰糖草采自海南省萬(wàn)寧市地區(qū)，經(jīng)海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院曾念開(kāi)副教授鑒定為玄參科植物冰糖草ScopariadulcisL.的干燥全草，烘干，粉碎，過(guò)40目藥篩，干燥保存?zhèn)溆?。砷、汞、鉛、鎘的單元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1000 μg/L)(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心)，鹽酸、硝酸、硫酸、二硫腙、四氯化碳、氫氧化鉀、氯化鈷、硫脲、草酸、鐵氰化鉀、抗壞血酸、硼氫化鉀；實(shí)驗(yàn)用水為高純?nèi)ルx子水。

1.3 儀器條件(氫化物原子熒光光譜法)

負(fù)高壓：290 V；原子化溫度：200 ℃；原子化高度：8.0 mm；燈電流：砷60 mA，汞25 mA，鉛80 mA，鎘80 mA；載氣：400 mL/min；屏蔽氣：800 mL/min；讀數(shù)時(shí)間10 s；延遲時(shí)間1 s；讀數(shù)方式：峰面積；硼氫化鉀溶液濃度：測(cè)砷汞20 g/L、測(cè)鉛鎘30 g/L(加入時(shí)間16 s)；載流：測(cè)砷汞5 %的鹽酸；測(cè)鉛1.6 %的鹽酸；測(cè)鎘0.20 mol/L硫酸。

1.4 供試品溶液的制備

1.4.1 砷、汞供試品溶液制備

稱取已烘干粉碎的冰糖草粉末1.000 g，精密稱定5份，置100 mL錐形瓶中，加入濃硝酸10 mL，高氯酸2 mL浸泡過(guò)夜。置電熱板上消化完全，直至溶液近干。冷卻后，轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中，加入100 g/L的抗壞血酸-硫脲溶液5 mL，用水稀釋至刻度，混勻后待測(cè)。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

1.4.2 鉛供試品溶液制備

稱取冰糖草粉末1.000 g，精密稱定5份，置100 mL錐形瓶中，加入濃硝酸10 mL，高氯酸2 mL浸泡過(guò)夜。置電熱板上消化完全，冷卻后，用2 %的鹽酸溶解，轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中，加入20 g/L草酸0.50 mL、100 g/L鐵氰化鉀2.50 mL，用2 %的鹽酸定容，搖勻。放置30 min后測(cè)定鉛，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

1.4.3 鎘供試品溶液制備

稱取冰糖草粉末1.000 g，精密稱定5份，置100 mL錐形瓶中，加入濃硝酸10 mL，高氯酸2 mL浸泡過(guò)夜。置電熱板上消化完全，冷卻后，用0.20 mol/L硫酸溶液溶解，轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中；加入0.5 g/L二硫腙四氯化碳溶液2.5 mL，劇烈震蕩2 min；加入50 g/L硫脲溶液5 mL及0.10 μg/L氯化鈷溶液0.5 mL，用0.20 mol/L硫酸溶液定容，混勻后待測(cè)。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

1.5.1 砷、汞標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取100 mL容量瓶12支，依次分別加入1.00 mg/L砷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.00、0.20、0.50、1.00、2.00、5.00 mL，0.10 mg/L汞標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.00、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00 mL，用少量水稀釋后，加入鹽酸5.0 mL及100 g/L的抗壞血酸-硫脲溶液20 mL，用水稀釋定容至100 mL，搖勻，放置30 min后待測(cè)。

1.5.2 鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取100 mL量瓶6支，依次加入1.00 mg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00 mL，用鹽酸2%加至50 mL，加入20 g/L草酸2.0 mL、100 g/L鐵氰化鉀10.0 mL，用2%鹽酸稀釋定容100 mL，搖勻，待測(cè)。

1.5.3 鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取100 mL量瓶6支，依次吸取0.10 mg/L鎘標(biāo)準(zhǔn)工作溶液0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00 mL，精確加入二硫腙四氯化碳溶液10.0 mL，劇烈震蕩2 min，加入50 g/L硫脲溶液20 mL及0.10 μg/L氯化鈷溶液2.0 mL，用0.20 mol/L硫酸溶液定容至100 mL。搖勻，放置30 min后待測(cè)。

2 結(jié) 果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

配制各元素標(biāo)準(zhǔn)系列濃度，按各元素測(cè)定條件分別進(jìn)行測(cè)定，以響應(yīng)值(熒光值IF)對(duì)各元素濃度值做回歸方程(見(jiàn)表1)。在確定的濃度范圍內(nèi)，各元素濃度與響應(yīng)值均成良好線性關(guān)系。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)

2.2 精密度試驗(yàn)

取砷、汞、鉛、鎘工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，各重復(fù)測(cè)定6次，分別計(jì)算其RSD，As為1.70 %，Hg為2.74 %，Pb為1.41 %，Cd為2.08 %。

2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批次冰糖草粉末1.000 g，按照“1.3”及“1.4”節(jié)方法平行制備并測(cè)定5份樣品，計(jì)算RSD，As為1.88 %，Hg為2.04 %，Pb為1.70 %，Cd為1.92 %。

2.4 回收率試驗(yàn)

精密稱取“2.3”節(jié)中冰糖草粉末9份，每份0.500 g，分別精密加入高、中、低3個(gè)水平的各元素對(duì)照品溶液適量，每水平添加量各3份，按“1.3”及“1.4”節(jié)方法測(cè)定加樣回收率(見(jiàn)表2)。

表2 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.5 樣品含量測(cè)定

按照“1.3”及“1.4”節(jié)實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)冰糖草中的砷、汞、鉛、鎘的含量進(jìn)行了測(cè)定并分別計(jì)算，As質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.063×10-5%，Hg為1.720×10-6%，Pb為1.286×10-5%，Cd為1.080×10-6%。

3 討 論

植物藥重金屬元素含量的限度各國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定不同，如歐盟食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)限定As≤2.0×10-4%，Hg≤1.0×10-4%，Pb≤1.0×10-4%，Cd≤1.0×10-4%；及美國(guó)FDA標(biāo)準(zhǔn)限定As<2.0×10-6%，Hg≤2.6×10-6%，Pb≤1.0×10-4%，Cd<3.0×10-5%。我國(guó)《藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》(WM/T2-2004)對(duì)藥用植物及制劑中的重金屬及砷鹽作了限量規(guī)定，其中As≤2.0×10-4%，Hg≤2.0×10-5%，Pb≤5.0×10-4%，Cd≤3.0×10-4%[10]。按此規(guī)定，本次測(cè)定的冰糖草中4種重金屬元素As、Hg、Pb、Cd含量均符合限量要求。

本實(shí)驗(yàn)采用氫化物原子熒光法測(cè)定冰糖草中重金屬元素的含量，簡(jiǎn)便易行，精密度高；加標(biāo)回收率為95 %～102.3 %，RSD≤3.36 %，數(shù)據(jù)可靠。為冰糖草的質(zhì)量品質(zhì)監(jiān)控，科學(xué)合理地開(kāi)發(fā)利用提供了參考。

[1] 中藥大辭典編纂委員會(huì). 中藥大辭典：下冊(cè)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006:2954.

[2] 李宗友,倪暮云. 野甘草的化學(xué)、藥理[J]. 國(guó)外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊(cè),1994,16(2):11-14.

[3] 馬雯芳,鄧慧蓮,蔡毅. 壯藥冰糖草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J]. 廣西中醫(yī)藥,2012,35(4):51-53.

[4] 劉波，陸明，劉凡. 野甘草乙醇提取物治療大鼠胃潰瘍作用的研究[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2007,16(19):2654.

[5] 張俊清,劉明生,符乃光,等. 中藥材微量元素及重金屬研究的意義與方法[J]. 中國(guó)野生植物資源,2002,21(3):48-51.

[6] 辛春紅,卜躍華,宿昌允,等. 七種中成藥中有毒重金屬元素的測(cè)定[J]. 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,25{7}:567-571.

[7] 周萍，鄧水來(lái)，楊穎，等.黃芪中4種重金屬元素含量的測(cè)定[J]. 海峽藥學(xué),2011,23(6):54-55.

[8] 藍(lán)海，楊顥，周平，等.原子熒光光譜法測(cè)定隔山消中砷、汞、鎘、鉛的含量[J]. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009,32(9):621.

[9] 吳婷，張麗. 原子熒光分光光度法測(cè)定中藥材中的鉛含量[J]. 南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2006,22(2):101-103.

[10] WM/T2-2004，藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[S].

Content Analysis of Four Heavy Metals inScopariadulcisL.from Hainan Province

Chen Lizhen, Zhou Dan, Ai Chaohui， Li Juan, Zhai Ruirui*

(Department of Pharmacy, Hainan Medical College, Haikou 571199,China)

Aim:To establish the methods for detection of heavy metal contents in theScopariadulcisL from Hainan province. Methods:The contents of As, Hg, Pb, Cd were detected by hydride generation atomic fluorescence spectrometry. Results:The linear correlation coefficients of As, Hg, Pb, and Cd were 0.9991-0.9999; the precisions were less than 2.74%; the recovery was 95%-102.3% with RSD of less 3.36%. Levels of heavy metals in theScopariadulcisL．were within the extent of green standard for traditional Chinese medicine. Conclusion:The detection method is accurate, reliable, quick and smiple for the quality control of theScopariadulcisL．.

ScopariadulcisL．; heavy metal element; atomic fluorescence spectrometry; content analysis

2014-08-12

海南省教育廳科研基金項(xiàng)目(hjkj201328)。

陳麗珍(1983-)，女(漢族)，實(shí)驗(yàn)師，理學(xué)碩士，從事藥用植物有效成分分析與活性研究。E-mail：lichen@hqu.edu.cn

*通訊作者：翟銳銳(1983-)，女(漢族)，實(shí)驗(yàn)師，工學(xué)碩士，從事藥用植物有效成分分析與功效研究。E-mail：zhairuirui520@126.com

10.3969/j.issn.1006-9690.2015.02.006

R284.1

A

1006-9690(2015)02-0021-03