楊燕飛，周　潔，高　誠(chéng)（1.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州5009；.上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心，上海0103）

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猴B病毒研究進(jìn)展

楊燕飛1，2，周潔2＊，高誠(chéng)2
（1.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州225009；2.上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心，上海201203）

摘 要：猴B病毒（MBV）是生物安全4級(jí)病原，其自然宿主是猴，在猴群中廣泛存在，猴感染后無(wú)癥狀或出現(xiàn)輕微的皰疹，而人感染后可出現(xiàn)神經(jīng)癥狀或致死性的進(jìn)行性腦脊髓炎，死亡率較高。MBV可在猴和人的感覺(jué)神經(jīng)節(jié)潛伏，間歇性復(fù)活排毒，常導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果假陰性；另外，MBV與HSV、SA8等有廣泛的抗原交叉性，常導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性。因此，MBV對(duì)檢測(cè)時(shí)間及檢測(cè)方法的敏感性、特異性有較高要求。目前沒(méi)有針對(duì)MBV的有效疫苗和藥物，全面了解MBV并采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施才能有效地避免MBV感染。

關(guān)鍵詞：猴B病毒；潛伏感染；檢測(cè)；預(yù)防

非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物（non-human primates，NHP）在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，其對(duì)工作人員的健康及對(duì)試驗(yàn)研究的影響也日益受到重視。猴B病毒（Monkey B virus，MBV）在猴群中廣泛存在，多呈良性經(jīng)過(guò)，卻對(duì)人類(lèi)健康有很大的威脅，感染后可導(dǎo)致腦脊髓炎，病死率高達(dá)80%，是從猴傳染到人的唯一致命的α皰疹病毒。本文主要介紹了MBV的生物學(xué)特性及猴和人類(lèi)感染的危險(xiǎn)性，總結(jié)了目前常用的檢測(cè)方法和切實(shí)有效的預(yù)防措施。

1　猴B病毒的溯源及命名

1932年，一位實(shí)驗(yàn)室工作者被表觀健康的恒河猴咬傷手，15d后死于進(jìn)行性腦脊髓炎。1934年，Sabin［1］從該病例的神經(jīng)組織分離到并能在兔復(fù)制出類(lèi)似疾病的皰疹病毒，并將其命名為皰疹B病毒（Herpes B Virus）。猴B病毒也稱(chēng)作皰疹B病毒、猴皰疹病毒，但是這些名稱(chēng)不是官方認(rèn)可的，國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)（ICTV）于1999年將其定義為猴皰疹病毒Ⅰ型（Cercopithecine herpesvirus 1，CHV-1）［2］，2008年更名為Macacine herpesvirus 1 （McHV1），在分類(lèi)學(xué)上屬皰疹病毒科、α-皰疹病毒亞科、單純皰疹病毒屬，與人單純皰疹病毒（Herpes simplex virus，HSV），包括HSV-1和HSV-2同在一類(lèi)別［3］。

2　MBV生物學(xué)特征

2.1MBV結(jié)構(gòu)及物理特性

MBV核酸是雙股線狀DNA，病毒粒子呈球形，直徑180nm～200nm，主要由髓芯、衣殼和囊膜組成。髓芯由DNA和蛋白質(zhì)纏繞而成；衣殼為正二十面體，內(nèi)含162個(gè)殼微粒，主要成分為多肽；囊膜由脂質(zhì)和糖蛋白組成，在病毒粒子周?chē)纬删哂协h(huán)狀突起的吸附器，有助于侵入易感細(xì)胞。

MBV對(duì)乙醚、脫氧膽堿酸鹽、氯仿等脂溶劑敏感，對(duì)熱也敏感；某些酶類(lèi)如膜蛋白酶、堿性磷酸酶、磷脂酶C和鏈霉蛋白酶等也可使病毒囊膜變性，從而阻止病毒吸附與侵入易感細(xì)胞。MBV對(duì)熱敏感，50℃30min或X射線、紫外線均能將其殺滅，長(zhǎng)期保存需置于-70℃冰箱中［4］。

2.2MBV分子生物學(xué)特征

通過(guò)對(duì)從不同種的猴分離到的MBV基因組序列比較和限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析發(fā)現(xiàn)，不同來(lái)源的MBV存在不同的基因型，目前按其宿主不同已鑒定出4種病毒基因型，即逐尾猴、恒河猴、食蟹猴及日本獼猴，其基因型與猴的種系直接相關(guān)［5-6］，但MBV只有1個(gè)血清型，抗原性穩(wěn)定，不易發(fā)生變異，它與HSV和非洲綠猴皰疹病毒（simian agent 8，SA8，即cercopithecine herpesvirus 2）有密切的抗原關(guān)系［4］。

Perelygina L等［7］用限制性內(nèi)切酶BamHⅠ、KpnⅠ、SalⅠ、PstⅠ和XhoⅠ處理MBV E2490株DNA和pUC19載體，將酶切片段連接到載體上，經(jīng)過(guò)DNA Star及GenMark等的分析，測(cè)出了其全部基因序列（GenBank登錄號(hào)：AF533768）全長(zhǎng)156 789bp，G+C含量74.5%，具有α皰疹病毒全部的基因結(jié)構(gòu)特征。MBV的兩個(gè)復(fù)制起始區(qū)oriL 和oriS均為串聯(lián)復(fù)制，且與HSV的oriL和oriS的位置相對(duì)應(yīng)。MBV的DNA復(fù)制存在6個(gè)起點(diǎn)：UL區(qū)域的oriL的2個(gè)拷貝（oriL1和oriL2），末端和內(nèi)部RS區(qū)域分別有oriS1和oriS2的2個(gè)拷貝。復(fù)制起始區(qū)都有1個(gè)94bp回文序列的核心元件，包含2個(gè)起始區(qū)結(jié)合蛋白（OBP）結(jié)合位點(diǎn)，即boxⅠ和boxⅢ。

MBV和HSV的氨基酸一致性從26.6% （US5）到87.7%（UL15）不等，MBV缺乏HSVγ34. 5基因，其他所有基因都與HSV的同源基因相同，并對(duì)照命名。HSVγ34.5基因編碼感染細(xì)胞蛋白34.5（ICP34.5），是一種神經(jīng)毒力因子，其功能主要有：①改變宿主蛋白磷酸酶1α，使其失去對(duì)翻譯起始因子eIF2α脫磷酸作用，抑制誘導(dǎo)蛋白激酶R的抗病毒作用，從而阻止蛋白的合成；②使病毒能在被感染動(dòng)物的外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)復(fù)制。MBV可能存在別的基因來(lái)補(bǔ)償γ134.5基因的缺失，也可能產(chǎn)生了獨(dú)特的機(jī)制來(lái)抑制蛋白質(zhì)的合成和宿主神經(jīng)細(xì)胞對(duì)其DNA復(fù)制的破壞［1，6］。通過(guò)對(duì)MBV UL區(qū)域互補(bǔ)鏈的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)了假定存在的雙外顯子基因UL53A（位于112 186～112 495和112 755 ～113 344），編碼一個(gè)親水堿基蛋白（pI 11.9），氨基酸偏重于Pro和Arg，是MBV和HSV在基因方面為數(shù)不多的本質(zhì)區(qū)別之一，很可能是造成MBV和HSV在人類(lèi)發(fā)病機(jī)理差異的重要原因［7-8］。以與HSV-1和HSV-2蛋白相似性的程度為基礎(chǔ)，可以把MBV蛋白分成3組：最大的第1組（46個(gè)蛋白）表現(xiàn)出與HSV-2極大的相似性，如DNA分裂和包裝蛋白；第2組（20個(gè)蛋白），表現(xiàn)出與HSV-1很高的相似性，如衣殼蛋白；第3組（7個(gè)蛋白），與HSV-1和HSV-2的蛋白都非常相似。能使HSV-1在口面部、HSV-2在生殖部位高效復(fù)制的蛋白還不清楚，但是MBV蛋白與HSV-1和HSV-2的相似性也許能解釋MBV在兩個(gè)部位都能高效復(fù)制的事實(shí)［8］。

2.3MBV的自然宿主及其培養(yǎng)特性

MBV主要存在于亞洲尤其是印度系獼猴屬，如恒河猴、食蟹猴、豚尾猴、臺(tái)灣猴、日本獼猴、僧帽猴、短尾猴等，染病動(dòng)物黏液、皮膚、口腔、生殖道分泌物均可傳染給其他動(dòng)物，母猴垂直傳播給仔猴的幾率極低［9］。

MBV缺乏宿主限制性，可在原代大鼠、小鼠、豚鼠、金黃地鼠、猴、兔、豬和貓腎細(xì)胞、雞胚絨毛尿囊膜細(xì)胞、Vero細(xì)胞、Hela細(xì)胞、KB細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞上良好增殖，但在不同細(xì)胞上增殖快慢不同，而且在MDCK細(xì)胞上幾乎不增殖［2，4］。MBV對(duì)兔腎細(xì)胞最易感，可使細(xì)胞變圓、壞死、脫落；在雞胚絨毛尿囊膜細(xì)胞、兔腎細(xì)胞、原代猴細(xì)胞及Vero細(xì)胞上均可形成大小不一的空斑和嗜酸性核內(nèi)包涵體［4］。

3　MBV感染狀況

3.1MBV對(duì)猴群的感染狀況

王吉等［10］用ELISA方法對(duì)2003年-2008年送檢的實(shí)驗(yàn)猴血清進(jìn)行MBV檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)每年的抗體陽(yáng)性率均不同（32.46%～48.29%），不同年齡段抗體陽(yáng)性率差異顯著，且隨著年齡的增長(zhǎng)而升高，另外雌性抗體陽(yáng)性率高于雄性，但差異不顯著。朱林等［11］用PCR方法對(duì)人工飼養(yǎng)的中國(guó)獼猴進(jìn)行MBV檢測(cè)，陽(yáng)性感染率為23.11%。Di Giacomo R F等［12］報(bào)道野生猴MBV抗體陽(yáng)性率為80.0%，自繁猴僅為3.0%；Jones-Engel L等［13］報(bào)道成年野生猴的抗體陽(yáng)性率達(dá)到70%～100%，Huff L等報(bào)道典型管理?xiàng)l件下的抗體陽(yáng)性率低至2%～3%，昆明亞靈生物科技有限公司室外猴場(chǎng)的MBV陽(yáng)性群自繁幼猴的陽(yáng)性率也僅為6.3%［15］，可見(jiàn)野生猴抗體陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于自繁猴，這可能是由于野生猴群居生活，直接接觸頻繁，而自繁猴生活環(huán)境控制嚴(yán)格，一般單籠或小群體（2只～3只）飼養(yǎng)，相互間傳染的可能性降低。

在猴群中MBV主要經(jīng)交配、咬傷或抓傷、帶毒唾液經(jīng)損傷的皮膚或黏膜直接傳播，也可以通過(guò)污染物間接傳播［4］，但抗體陽(yáng)性的母猴不會(huì)垂直傳播給其新生幼猴［16］。猴感染后通常不表現(xiàn)或很少表現(xiàn)臨床癥狀，有時(shí)在舌背面和口腔黏膜與皮膚交界的口唇部及口腔內(nèi)其他部位出現(xiàn)充滿液體的小皰疹，這些皰疹最終破裂形成潰瘍，表面覆蓋著纖維素性壞死性痂皮，常在7d～14d自愈，不留瘢痕，偶見(jiàn)嚴(yán)重程度不等的結(jié)膜炎，一般沒(méi)有生殖道損傷的癥狀［2，5］，但病毒可長(zhǎng)期在其上呼吸道或泌尿生殖器官附近的神經(jīng)節(jié)及組織器官內(nèi)潛伏，經(jīng)唾液、尿液、生殖器分泌物間歇性排毒［4，16］，通常排毒時(shí)間為幾個(gè)小時(shí)，僅在初次感染、繼發(fā)感染或正在患其他疾病的猴子中偶見(jiàn)持續(xù)排毒4周～6周者［2］。

猴群中MBV感染的發(fā)病機(jī)理與HSV相似，病毒在上皮組織中進(jìn)行第1次增殖，然后由感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢攝入，通過(guò)軸突運(yùn)輸至神經(jīng)元細(xì)胞核中。在感染最初1周～2周內(nèi)也許能在復(fù)制點(diǎn)的表皮中分離到病毒，盡管那時(shí)候病變可能不明顯。宿主對(duì)HSV入侵的反應(yīng)是通過(guò)非特異性細(xì)胞免疫介導(dǎo)的免疫機(jī)制，主要涉及到天然殺傷細(xì)胞和單核吞噬細(xì)胞來(lái)破壞感染細(xì)胞，這種免疫發(fā)病機(jī)理對(duì)病變形成起了部分作用［2］。

3.2MBV對(duì)人類(lèi)的感染狀況

全球已有超過(guò)43例人感染MBV的報(bào)道，2/3集中在美國(guó)，其他分布在英國(guó)和加拿大［5］。陽(yáng)性猴的口腔、眼、生殖道分泌物、腦脊液及中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織、原代猴腎細(xì)胞培養(yǎng)物都是潛在的感染源，被猴咬傷、抓傷、暴露于猴組織培養(yǎng)材料、組織培養(yǎng)瓶碎片、在剖解過(guò)程中暴露于猴組織、針頭刺傷、籠具刮傷、黏液飛濺等都可能引起人的感染，但未見(jiàn)人暴露于猴外周血后被感染的報(bào)道［4，9］，人與人之間的傳播到目前為止也僅有一例，人感染MBV后進(jìn)行二次傳染的概率極低［5］。

MBV的潛伏期約為2d～30d，也有超過(guò)10年的，一旦發(fā)病，癥狀常在10d內(nèi)快速進(jìn)展［5］。典型的臨床經(jīng)過(guò)是暴露后約2d，在暴露點(diǎn)長(zhǎng)出小泡狀皮疹，并伴有發(fā)癢、疼痛、麻痹的癥狀，一些病人在感染部位近端出現(xiàn)淋巴結(jié)??；此后約10d～20d，出現(xiàn)發(fā)燒、肌痛、暴露處感覺(jué)異常、腹痛等，肺、肝等內(nèi)臟器官也可能有伴隨癥；末期出現(xiàn)腦膜炎、視網(wǎng)膜炎、結(jié)膜炎癥狀，而后多數(shù)死亡，未經(jīng)治療的感染者死亡率大約為80%，幸存者也會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)后遺癥［5，9］。

人類(lèi)MBV感染的發(fā)病機(jī)理似乎與HSV相似，病毒最初在皮膚內(nèi)復(fù)制，局部出現(xiàn)炎癥病變，而且病毒可入侵局部的淋巴結(jié)發(fā)生出血或局灶性壞死，隨后病毒沿末梢神經(jīng)進(jìn)入脊髓，最后到達(dá)腦。多器官受累的全身性MBV感染與HSV相關(guān)性內(nèi)臟感染相似，但是MBV感染引起的腦炎累及全腦，而HSV-1引起的腦炎局限于顳葉［2］。

3.3MBV感染發(fā)病機(jī)制

研究MBV發(fā)病機(jī)制的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不多，從歷史上看，兔子是研究MBV發(fā)病機(jī)制的最佳動(dòng)物模型，因?yàn)橥米訉?duì)MBV感染非常敏感，幾乎任何接種方法（包括吸入）都能使兔子快速發(fā)病。一些研究者用小鼠作為模型進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)小鼠年齡尤其是品系顯著影響MBV的感染能力，Balb/c小鼠在MBV作用下易感中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）疾病，而C57小鼠對(duì)所有測(cè)試的MBV分離株都有抵抗力。進(jìn)一步研究表明機(jī)體在感染位點(diǎn)局部產(chǎn)生有效的β-IFN反應(yīng)的能力可能是決定MBV感染能力的關(guān)鍵因素［17］。

4　MBV檢測(cè)方法

MBV屬于生物安全（BSL）4級(jí)病原體，濃縮MBV材料的研究應(yīng)在P4實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，而檢測(cè)可疑MBV材料應(yīng)在P3或以上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行［9］。

4.1病毒學(xué)方法

MBV的分離培養(yǎng)是感染的標(biāo)準(zhǔn)診斷方法，也是對(duì)感染性MBV的臨床樣品檢測(cè)和定量的唯一方法。目前用于培養(yǎng)MBV的細(xì)胞系主要有Vero細(xì)胞、Hela細(xì)胞及其他體外已建立的上皮細(xì)胞系，通過(guò)觀察接種臨床樣品后的細(xì)胞是否出現(xiàn)特征性細(xì)胞病變（CPE）和嗜酸性核內(nèi)包涵體來(lái)判斷MBV存在與否；LLC-MK2細(xì)胞支持MBV生長(zhǎng)而不支持HSV生長(zhǎng)，可用于二者的鑒別［2，5］。

Black D H等［18］將綠色熒光蛋白（GFP）的序列與MBV的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的序列相結(jié)合導(dǎo)入Vero細(xì)胞，再選擇性狀穩(wěn)定的細(xì)胞構(gòu)建了一個(gè)細(xì)胞系DBG3，此細(xì)胞系只有在MBV或其他相關(guān)的靈長(zhǎng)類(lèi)皰疹病毒感染時(shí)才有GFP表達(dá)，在倒置熒光顯微鏡下可直接觀察CPE及GFP。此方法減少了MBV暴露的機(jī)會(huì)，降低了感染的風(fēng)險(xiǎn)，而且通過(guò)GFP的表達(dá)檢測(cè)MBV比常規(guī)顯微鏡觀察CPE更加快速準(zhǔn)確。

4.2分子生物學(xué)方法

Hirano M等［19］用PCR方法擴(kuò)增MBV gG片段，而以HSV為模板在相同條件下擴(kuò)增沒(méi)有獲得產(chǎn)物，因此可以用此方法鑒別MBV和HSV。Perelygina L等［20］基于MBV E2490株gG基因的非保守序列設(shè)計(jì)引物建立了實(shí)時(shí)定量PCR方法，可用于MBV和與其密切相關(guān)的α皰疹病毒的鑒別診斷。PCR檢測(cè)的方法可以檢測(cè)到低至10個(gè)拷貝的MBV，靈敏、快速、特異性高，減少了病毒培養(yǎng)的危險(xiǎn)性［2，4，21］。

4.3血清學(xué)方法

HSV、SA8、狒狒皰疹病毒（Herpesvirus papio 2，HVP2）等與MBV有廣泛的抗原交叉性，這是血清學(xué)方法診斷MBV的一大阻力，但同時(shí)這些病原也可用作MBV的替代抗原，賀爭(zhēng)鳴等［22］用HSV-1 SM44株做抗原的ELISA方法與美國(guó)Bio Reliance公司用MBV做抗原的ELISA方法相比，檢測(cè)結(jié)果符合率為98.02%（差異不顯著）。使用替代抗原可以減少操作MBV的危險(xiǎn)性，但是檢測(cè)的靈敏度明顯低于用原病毒作為抗原所建立的檢測(cè)方法。目前較為常用的血清學(xué)檢測(cè)方法是玻片酶免法（IEA）［23］、ELISA法，Katz等設(shè)計(jì)了一種快速ELISA用于檢測(cè)猴或人血清中MBV、HSV-1、SA8抗體［2，5］。

Perelygina L等［24］對(duì)MBV各個(gè)糖蛋白的診斷潛能進(jìn)行了研究，糖蛋白B（gB）、糖蛋白C（gC）、糖蛋白D（gD）、膜相關(guān)糖蛋白G（mgG）分別作為抗原的ELISA方法的檢測(cè)敏感性分別為100%、97. 3%、88.0%、80.0%，表明這4種蛋白有比較高的診斷潛能，其中mgG不與HSV-1和HSV-2產(chǎn)生的抗體反應(yīng)，可能是MBV最具特異性的片段，對(duì)區(qū)分MBV抗體和其他α皰疹病毒產(chǎn)生的抗體有較大的價(jià)值。Perelygina等還將gB、gC、gD重組作為抗原包被，這種ELISA方法的敏感性是100%；David K等［25］將gB、gC、gD和mgG 4種蛋白重組建立recombinant-based ELISA（rELISA）方法，也證實(shí)rELISA比滴度ELISA（tELISA）和Western blot方法更客觀可靠。

Perelygina L等［24］曾在MBV gD表位庫(kù)中篩選出一個(gè)免疫優(yōu)勢(shì)表位（gD362-370），試驗(yàn)證實(shí)有95%MBV感染的猴血清樣品及80%MBV感染的人血清樣品中含有針對(duì)該表位的抗體，而HSV-1和HSV-2抗血清并不與該表位反應(yīng)。盡管后來(lái)證實(shí)合成肽組合比單一表位的敏感性更好，但是對(duì)免疫優(yōu)勢(shì)表位的探索和研究從未停止，張金陽(yáng)等用網(wǎng)絡(luò)分析數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)mgG進(jìn)行生物信息學(xué)分析和預(yù)測(cè)，預(yù)測(cè)到其含19個(gè)潛在抗原表位和14個(gè)線性抗原表位；葉華虎等［27］用在線軟件預(yù)測(cè)得到gD有7個(gè)可能的表位肽段，后經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)其中4個(gè)表位的敏感性較高。合成優(yōu)勢(shì)表位肽段作為抗原可避免操作MBV原病毒的危險(xiǎn)性，有利于建立安全高效的檢測(cè)方法。

值得注意的是，MBV可在感覺(jué)神經(jīng)節(jié)中潛伏，潛伏期間不進(jìn)行復(fù)制，所以取三叉神經(jīng)和骶神經(jīng)節(jié)樣本進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果才比較準(zhǔn)確，但是這對(duì)活體動(dòng)物有損傷，所以只能多次取口腔、結(jié)膜、生殖道拭子或血液進(jìn)行檢測(cè)，盡量避免因MBV潛伏期造成的假陰性結(jié)果［2，17］。

5　MBV的預(yù)防及治療

MBV的預(yù)防需遵循疾病控制和預(yù)防中心（CDC）制定的準(zhǔn)則，包括：①提高工作人員對(duì)MBV及其危險(xiǎn)性的認(rèn)知；②建立并維護(hù)沒(méi)有MBV的種群；③在獲取動(dòng)物樣品前，用物理或化學(xué)方法限制其活動(dòng)；④強(qiáng)制使用個(gè)人防護(hù)用具；⑤正確的事故報(bào)告和恰當(dāng)?shù)膫谔幚恚?6］。

有研究表明與猴子接觸后有1∶50～1∶250的潛在可能暴露于MBV，而且暴露的類(lèi)型和暴露之后到清洗暴露點(diǎn)之間拖延的時(shí)間是發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的重要決定因素［16］。被咬傷或抓傷或暴露于潛在感染源后應(yīng)立即用洗必泰或肥皂水清洗，清洗至少持續(xù)15 min；眼或黏膜暴露于MBV后應(yīng)立即用滅菌鹽水或水沖洗15min以上。清洗時(shí)應(yīng)輕輕按摩傷口，使其充分接觸洗液，建議不要切開(kāi)傷口。皮膚暴露可用碘酊使病毒失活［9］。

暴露后應(yīng)至P3或P4實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，最少應(yīng)檢測(cè)3次：第1次在暴露后及時(shí)進(jìn)行；第2次在暴露后3周～6周或有臨床癥狀出現(xiàn)時(shí)進(jìn)行，若血清水平變化或滴度明顯上升（≥4倍）則表明發(fā)生了急性感染；第3次應(yīng)在暴露后3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行［9］。

目前，阿昔洛韋或更昔洛韋是推薦的針對(duì)MBV的抗病毒制劑［16］，而對(duì)于孕婦，則推薦使用無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷，劑量為15mg/kg，因?yàn)闊o(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷的臨床使用經(jīng)驗(yàn)最豐富，對(duì)于外周神經(jīng)系統(tǒng)或CNS癥狀確定的患者，建議用比無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷更有效的二羥丙氧甲基鳥(niǎo)苷（DHPG）治療，劑量為5mg/kg，一日2次。但是這些藥物都不能完全消滅MBV，患者需終身用藥，中斷治療將可能導(dǎo)致病毒活化、排毒、再次感染［2，9］。

MBV的抗血清可以中和HSV，但HSV的抗血清中和MBV的能力很小，所以研究者們不提倡用HSV球蛋白進(jìn)行異型保護(hù)。Hull用福爾馬林滅活MBV制成疫苗，雖可引起抗體反應(yīng)，但抗體滴度較低，需經(jīng)常加強(qiáng)免疫（3個(gè)月1次），進(jìn)一步研究表明它在體內(nèi)引起異源HSV抗體反應(yīng)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)不具有結(jié)論性。Bennett等用表達(dá)MBV gD的重組牛痘病毒制成疫苗，8d內(nèi)使10/11兔得到保護(hù)。Loomis-Huff將MBV的gB基因與質(zhì)粒載體連接注射小鼠和恒河猴，可引起體液免疫反應(yīng)，發(fā)展了MBV的DNA疫苗［16，21］。MBV感染的潛伏性和復(fù)發(fā)性阻礙了疫苗的發(fā)展，近幾年對(duì)MBV疫苗的研究并未取得突破性進(jìn)展。

6　結(jié)語(yǔ)

NHP由于與人類(lèi)有相近的生長(zhǎng)、生理和進(jìn)化關(guān)系，已成為生物醫(yī)學(xué)研究中必不可少的動(dòng)物模型，其攜帶的病原體和易感的傳染性病原也成了人們研究的重點(diǎn)［18］。獼猴和人類(lèi)感染MBV后臨床表現(xiàn)的極大差異和人類(lèi)感染的高致死率引起人們的高度重視，將其列為BSL-4級(jí)病原，只能在P3或P4實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行研究，雖然在一定程度上限制了對(duì)MBV的研究，但是研究從未停止，對(duì)MBV的認(rèn)識(shí)不斷深入和完善。美國(guó)國(guó)家研究資源中心（NCRR）1988年發(fā)起建立無(wú)MBV的SPF恒河猴種群的項(xiàng)目，到目前為止，國(guó)內(nèi)外都已建成無(wú)MBV的猴群［20-21］，但非SPF猴仍在廣泛使用，而且MBV潛伏感染、間歇重新激活的特點(diǎn)使得準(zhǔn)確檢測(cè)出感染動(dòng)物相當(dāng)困難，MBV與HSV、SA8等病原體的抗原交叉性也增加了確診MBV感染的難度，這些都表明不可能完全消除MBV感染人類(lèi)的可能性。此外，HSV抗體不能中和MBV，目前也沒(méi)有可靠的疫苗，雖然阿昔洛韋或更昔洛韋能有效對(duì)抗MBV，但是也不能完全消滅MBV，所以，最重要的是預(yù)防，加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)，按照規(guī)范、安全的操作步驟進(jìn)行，被咬傷或抓傷時(shí)不要依賴(lài)猴的SPF狀態(tài)，應(yīng)立即處理傷口，及時(shí)檢測(cè)和治療。雖然感染MBV的人數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于被猴抓傷、咬傷的人數(shù)，但不能抱有僥幸心理，因?yàn)镸BV可在人體潛伏感染，很可能出現(xiàn)假陰性的檢測(cè)結(jié)果，要時(shí)刻關(guān)注自己的身體狀況［9］。

對(duì)MBV生物學(xué)特性的研究已較清楚，但其在獼猴和人體內(nèi)的發(fā)病機(jī)理及機(jī)體對(duì)MBV的免疫反應(yīng)有待進(jìn)一步研究，針對(duì)MBV的特異性診斷方法和特效藥物、疫苗也有待于繼續(xù)研究和開(kāi)發(fā)應(yīng)用。只有做好預(yù)防工作、建立快速準(zhǔn)確的診斷方法、開(kāi)發(fā)高效可行的治療手段，才有可能消除MBV感染人類(lèi)致死的危險(xiǎn)性。

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Progress on Monkey B Virus

YANG Yan-fei1，2，ZHOU Jie2，GAO Cheng2
（1.College of Veterinary Medicine，Yangzhou University，Yangzhou，Jiangsu，225009，China；2.Shanghai Research Center of Laboratory Animal，Shanghai，201203，China）

Abstract：Monkey B virus（MBV）is one of BSL-4zoonotic agents.It naturally infects conventional population of macaques，which may show asymptomatic or slight herpes lesions.While it transmits to humans，it can cause neurological symptoms or progressive encephalomyelitis with high mortality.MBV can establish latent infection in sensory ganglia，then periodic reactive and shedding，often lead to false negative testing result.Moreover，there is extensive antigenic cross-reactivity among MBV and HSV and SA8and so on，it usually causes false positive detection results.Therefore，it's a challenge to the test time and the sensitivity and specificity of detection methods.There is no specific vaccine and antiviral drugs.The comprehensive understanding of MBV and taking appropriate preventive measures is the most important.This will help you avoid the infection of MBV.

Key words：Monkey B virus；latent infection；detection；prevention

作者簡(jiǎn)介：楊燕飛（1991-），女，江蘇南通人，碩士研究生，主要從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病毒學(xué)研究。＊通訊作者

基金項(xiàng)目：上海市科委科技創(chuàng)新行動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目（13140900600）

收稿日期：2015-02-03

中圖分類(lèi)號(hào)：S855.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-5038（2015）07-0094-06