馮力彬　武艷　邢軍鋒(石家莊市藁城人民醫(yī)院檢驗科　河北　石家莊　0560;河北醫(yī)科大學第一醫(yī)院檢驗科　河北　石家莊　0500;石家莊市藁城人民醫(yī)院重癥醫(yī)學科　河北　石家莊　0560)

靜脈輸注脂肪乳對微柱凝膠法交叉配血的影響

馮力彬1武艷2邢軍鋒3
(1石家莊市藁城人民醫(yī)院檢驗科河北石家莊052160;2河北醫(yī)科大學第一醫(yī)院檢驗科河北石家莊050031;3石家莊市藁城人民醫(yī)院重癥醫(yī)學科河北石家莊052160)

摘要目的:探討靜脈輸注脂肪乳對微柱凝膠法交叉配血的影響。方法:運用微柱凝膠法對45例擬輸血患者靜脈輸注脂肪乳前后兩組標本進行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測和交叉配血試驗。結(jié)果:輸注脂肪乳后，45例患者標本各試驗未發(fā)現(xiàn)有明顯的異常凝集現(xiàn)象，只有1例出現(xiàn)1 +以下的異常凝集現(xiàn)象，輸注脂肪乳前后兩組無顯著性差異( P＞0. 05)。結(jié)論:靜脈輸注脂肪乳后采集的標本對微柱凝膠法交叉配血試驗的影響較小，可以按通常標本進行交叉配血試驗。

關(guān)鍵詞擬輸血;脂肪乳;微柱凝膠;交叉配血

常見的交叉配血方法主要有鹽水法、抗人球蛋白法、凝聚胺法、微柱凝膠試驗法。微柱凝膠試驗( MGT)是20世紀90年代進入國內(nèi)實驗室并用于交叉配血的新方法。在一些先進國家已成為常規(guī)的紅細胞血型血清學檢測技術(shù)［1］。微柱凝膠法具有標準化程度高、重復性強、試驗結(jié)果明確可靠、患者血標本用量少、操作簡單、結(jié)果易于觀察及保存時間長等優(yōu)點［2］。筆者運用微柱凝膠法對45例擬輸血患者靜脈輸注脂肪乳前后標本進行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測和交叉配血試驗，報告如下:

1.　資料與方法

1. 1一般資料

選擇2014年4月－10月本院45例擬輸血患者，在靜脈輸注脂肪乳前后分別采集靜脈血EDTA抗凝標本。這45例患者分別來自普通外科、骨科、重癥醫(yī)學科、血液內(nèi)科。交叉配血標本均來自河北省血液中心無償自愿獻血，實驗完畢立即置4℃冰箱保存。

1. 2試劑與儀器

( 1) ABO、RhD血型定型檢測卡

( 2)交叉配血抗人球蛋白檢測卡

( 3)不規(guī)則抗體抗人球蛋白檢測卡

( 4) ABO血型反定型試劑

包括4%A1紅細胞，4%B紅細胞

實驗時需稀釋為0. 5%－0. 8%濃度。

以上檢測試劑生產(chǎn)廠家:長春博訊生物技術(shù)有限公司

( 5)不規(guī)則抗體篩檢細胞

包括檢測細胞Ⅰ、檢測細胞Ⅱ、檢測細胞Ⅲ

實驗時需稀釋為0. 5%－0. 8%濃度。

生產(chǎn)廠家:長春博德生物技術(shù)有限公司

( 6) TD－3A型血型血清學用離心機

( 7) FYQ型免疫微柱37℃孵育器

以上儀器生產(chǎn)廠家:長春博研科學儀器有限公司

1. 3檢測方法

對45例擬輸血患者靜脈輸注脂肪乳前后標本分別進行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測和交叉配血試驗，嚴格按照微柱凝膠法檢測試劑盒說明書操作。各項操作步驟如下:

( 1)將微柱凝膠試劑卡的6只凝膠微管標號。

( 2)將待檢者0. 5%－0. 8%紅細胞懸液分別加入第一至第四只微管中，每管50ul。

( 3)將待檢者血清分別加入第五只和第六只微管，每管50ul。

( 4)將已知A型和B型紅細胞0. 5%－0. 8%濃度懸液分別加入第五只和第六只微管中，每管50ul。

( 5)即刻使用TD－3A型血型血清學用離心機離心5分鐘，900rpm 2分鐘，1500 rpm 3分鐘，取出，觀察結(jié)果。

1. 3. 2不規(guī)則抗體檢測

( 1)將試劑卡做好標記。

大月亮，細月亮，哥哥在堂屋里學篾匠，嫂嫂在廚房里蒸淘飯，淘飯蒸得噴噴香。不把得哥哥呷，不把得哥哥嘗，提起袋里撞你咯娘。

( 2)分離被檢者血清(或血漿)。

( 3)用低離子溶液將篩檢紅細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分別配成0. 5%－0. 8%濃度，分別加入標記好的微管中，各1滴(或50 ul)。

( 4)分別立即加入被檢者血清(或血漿) 1滴(或50 ul)。

( 5)加樣后的試劑卡，置37℃中孵育15分鐘。

( 6)使用TD－3A型血型血清學用離心機離心5分鐘，900rpm 2分鐘，1500 rpm 3分鐘，取出，觀察結(jié)果。

1. 3. 3交叉配血試驗

( 1)將受血者和獻血者的紅細胞和血清(或血漿)分離。

( 2)用低離子溶液分別將受血者與獻血者紅細胞配成0. 5%－0. 8%濃度紅細胞懸液。

( 3)將獻血者紅細胞1滴(或50 ul)與受血者血清(或血漿) 1滴(或50 ul)加入到主側(cè)管中。

( 4)將受血者紅細胞1滴(或50 ul)與獻血者血清(或血漿) 1滴(或50 ul)加入到次側(cè)管中。

( 5)加樣后的試劑卡，置37℃中孵育15分鐘。

( 6)使用TD－3A型血型血清學用離心機離心5分鐘，900rpm 2分鐘，1500 rpm 3分鐘，取出，觀察結(jié)果。

1. 3. 4統(tǒng)計學方法采用SPSS17. 0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)資料進行X2檢驗，P＜0. 05時差異有統(tǒng)計學意義。

2.　結(jié)果

2. 1這45例標本分別來自普通外科8例、骨科6例、重癥醫(yī)學科16例、血液內(nèi)科15例，血型分布: A型10例、B型16例、AB型6例、O型12例、以上RhD均陽性，有1例標本O型，RhD陰性(標本科室分布見表1)。

2. 2靜脈輸注脂肪乳前，45例標本各試驗無異常凝集現(xiàn)象，包括血型正反定型均相符，與相同血型的標本交叉配血均相合，即無凝集無溶血，不規(guī)則抗體檢測陰性。靜脈輸注脂肪乳后，45例患者標本各試驗未發(fā)現(xiàn)有明顯的異常凝集現(xiàn)象，只有1例出現(xiàn)1 +以下的異常凝集現(xiàn)象，來自血液內(nèi)科(具體結(jié)果詳見表2)。

3.　討論

凝膠分子篩是微柱凝膠技術(shù)的核心，凝膠分子之間存在著間隙，而這個間隙只可讓單個紅細胞通過。如果紅細胞發(fā)生凝集，凝膠微柱層析分子就會將其阻滯于凝膠之內(nèi)，而沒有發(fā)生凝集的紅細胞就會穿過凝膠分子之間的間隙運動至柱底，以此來區(qū)別有無凝集。

脂肪乳是一種營養(yǎng)補充藥，為人體提供能量和必需的脂肪酸，三甘油酯、卵磷脂和甘油是脂肪乳的主要成分。脂肪乳粒子體內(nèi)清除的速度與乳糜微粒相近，其大小也和乳糜微粒相差不多。而乳糜微粒在人血漿脂蛋白顆粒中體積是最大的。

從表2我們可以看出，45例標本輸注脂肪乳前后對比，通過X2檢驗，P＞0. 05，兩組無顯著性差異.

以上試驗出現(xiàn)的1例異常凝集標本，不排除有其他因素造成的異常凝集(如標本污染等)。當然，也存在另一種可能:在短時間內(nèi)輸注大量或高濃度脂肪乳時，血液中大量脂肪乳粒子積聚，在這個時候采集血標本，用微柱凝膠法進行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測和交叉配血，脂肪乳粒子就有可能聚集在凝膠分子間隙，阻礙紅細胞穿過微孔運動至柱底。從而在外觀上出現(xiàn)類似凝集的現(xiàn)象，影響判斷交叉配血所有試驗的結(jié)果。本試驗兩組對比雖然無顯著性差異，但輸注脂肪乳對微柱凝膠法交叉配血試驗的影響還需進一步研究.

綜上所述，靜脈輸注脂肪乳對微柱凝膠法交叉配血試驗的影響無統(tǒng)計學意義，說明靜脈輸注脂肪乳后采集的標本對微柱凝膠法交叉配血試驗的影響較小，輸過脂肪乳的標本可以按通常標本進行交叉配血。但是，靜脈輸注脂肪乳對微柱凝膠法交叉配血試驗影響的可能性還是存在的.如果微柱凝膠法交叉配血有凝集現(xiàn)象，可以用其他方法(如凝聚胺法等)重新交叉配血，或者在患者體內(nèi)脂肪乳降解后重新采集血標本進行交叉配血。在實際工作中，建議臨床醫(yī)師在靜脈輸注脂肪乳前或脂肪乳在人體內(nèi)被降解吸收后再采血，然后進行交叉配血，以避免脂肪乳對微柱凝膠法交叉配血試驗可能的影響。

參考文獻

［1］李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術(shù)［M］.北京，中國科學技術(shù)出版社，1999:274.

［2］王德付.微柱凝膠試驗在交叉配血中的應用［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2011，8( 16) :2045－2046.

【中圖分類號】R446. 11

【文獻標識碼】B

【文章編號】1009－6019( 2015) 12－0045－02

作者簡介:馮力彬，男，39歲，工作單位:石家莊市藁城人民醫(yī)院檢驗科，職稱:主管檢驗師。