王磊等

【摘 要】 目的：觀察雅解沙把對(duì)蛋黃乳致高脂血癥小鼠血清的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白-膽固醇（HDL–C）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL–C）的影響。方法：健康ICR小鼠100只，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、模型組、辛伐他丁陽性組（0.02g/kg）、雅解沙把高劑量組、雅解沙把低劑量組。除正常組、模型組灌胃給予相同體積蒸餾水外，其余組灌胃給予相應(yīng)藥物。蛋黃乳劑復(fù)制小鼠高脂血癥模型，觀察小鼠血清TC、TG、HDL–C、LDL–C水平變化。結(jié)果：與模型組比較，雅解沙把組能顯著降低小鼠血清TC、TG水平。結(jié)論：雅解沙把對(duì)高脂血癥模型小鼠具有一定的降血脂作用。

【關(guān)鍵詞】 傣藥；雅解沙把；高脂血癥；解脂毒

【中圖分類號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2015）04-0021-03

The effect research of Dai medicine Yajieshaba on solving lipid toxicity in the hyperlipemia model mice

WANG Lei DUAN Xiao-hua YIN Hong CHEN Pu CHEN Qing-hua ZHANG Chao*

Yunnan University of Traditional Chinese Medicine， Kunming 650500， China

Abstract：Objective To investigate the effects of Yajieshaba on egg yolk milk induced hyperlipemia mice serum total cholesterol（TC）， triglyceride（TG）， high-density lipoprotein cholesterol（HDL-C）， low density lipoprotein cholesterol （LDL-C）. Methods Healthy 100 ICR mice are randomly divided into 5 groups： normal control group， model group， simvastatin positive group （0.02g/kg）， high dose group of Yajieshaba， low dose group of Yajieshaba. In addition to the normal group， model group are intragastrically administered the same volume of distilled water， the other group are intragastrically administered with corresponding drugs. Egg yolk emulsion replicate mice hyperlipidemia model and observe the mice serum TC， TG ， HDL–C， LDL–C level changes. Results Compared with model group， Yajieshaba group can significantly reduce serum TC， TG level in mice. Conclusion Yajieshaba has a certain reducing blood lipid in hyperlipidemia model mice.

Keywords：Dai medicine； Yajieshaba； Hyperlipidemia； Solving lipid toxicity

傣醫(yī)認(rèn)為“雅解（解藥）”具有調(diào)節(jié)人體生理功能、解除人體的各種毒素、保持體內(nèi)功能的平衡和協(xié)調(diào)的功效。雅解，即解藥之意，是傣醫(yī)常用的特色藥物之一，是傣族醫(yī)學(xué)中最具特色的藥物及治療方法之一，已成為傣族醫(yī)學(xué)體系中的重要組成部分[1]。在長(zhǎng)期醫(yī)療實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累過程中，傣族人民發(fā)現(xiàn)上百種解除各種毒物及有害物質(zhì)的藥物及方劑，統(tǒng)稱為“雅解”[2]。雅解方藥在臨床應(yīng)用十分廣泛[3]?！敖馑帯痹诖鲎宓貐^(qū)具有使用面廣、療效較好、家喻戶曉、歷史悠久的特點(diǎn)，從古至今，在傣族民間家家都備有不同的“解藥”。幾千年來傣族人在應(yīng)用“解藥”方面總結(jié)了許多的經(jīng)驗(yàn)，認(rèn)為解藥具有調(diào)節(jié)人體的生理功能，解除人體的各種毒素，保持體內(nèi)“四塔”（風(fēng)、火、水、土）、“五蘊(yùn)”（色、識(shí)、受、想、行）功能的平衡和協(xié)調(diào)，解毒養(yǎng)顏之功[4]。“未病先解”、“先解后治”是傣醫(yī)獨(dú)特的治療疾病的“解毒”理論，是歷代傣醫(yī)經(jīng)過長(zhǎng)期的臨床探索與實(shí)踐的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)[5]。通過實(shí)地調(diào)研、收集、整理西雙版納州傣醫(yī)院等單位進(jìn)行的初步臨床研究，結(jié)果表明：雅解沙把有解食物毒、藥物毒、酒毒、煙毒、毒蟲毒、熱毒等作用。本實(shí)驗(yàn)在傣醫(yī)雅解理論的指導(dǎo)下，主要是以蛋黃乳復(fù)制急性高脂血癥模型為研究對(duì)象，擬探討“雅解沙把”對(duì)蛋黃乳所致小鼠脂毒是否有解毒的作用，為其解毒機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)，以期為臨床安全、合理用藥提供理論依據(jù)，同時(shí)為雅解理論及雅解臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物與試劑 “雅解沙把”（百解膠囊），滇藥制字（Z）20082252K，0.2g×60粒/瓶，5粒/次，每日3次；云南省西雙版納州傣醫(yī)院院內(nèi)制劑，由西雙版納州傣醫(yī)院提供；辛伐他汀片（杭州默沙東制藥有限公司，批號(hào)：20090001）；總膽固醇測(cè)定試盒TC（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：140551）；甘油三酯測(cè)定試劑盒TG（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：140551）；高密度脂蛋白測(cè)定試劑盒 HDL–C（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：140551）；低密度脂蛋白測(cè)定試劑盒 LDL–C（南京建成生物工程研究所，批號(hào)：140551）；蛋黃乳液（75%）。

1.2 動(dòng)物 健康ICR小鼠，雌雄各半，體重（20±2g），由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，合格證號(hào)：SCXK（川）2008-24，合格批號(hào)：OO14345；飼養(yǎng)以鼠糧、自來水，置于動(dòng)物飼養(yǎng)箱內(nèi)，以鋸末作籠墊，室溫（21±1）℃，光周期12L∶12D條件下飼養(yǎng)；適應(yīng)一周后開始實(shí)驗(yàn)。

1.3 儀器 酶標(biāo)儀（Infinite M200 PRO，瑞士Tecan公司）；分析天平（型號(hào)：AL104METTLER TOLEDO，Switzerland，0.0001g）；高速低溫離心機(jī)（CF16 RXⅡseries，HITACHI公司）；電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)（DY89-Ⅱ型，寧波新芝生物科技股份有限公司）；數(shù)字恒溫水浴鍋（HH-S28S，金壇市大地自動(dòng)化儀器廠）。

2 方法

2.1 雅解沙把提取物的制備 取“雅解沙把”生藥粉末500g放置于不銹鋼鍋中，分三次加入5倍、3倍、2倍體積的70%乙醇50℃水浴溫浸24h，過濾，將三次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮成稠浸膏，置于4℃冰箱中冷藏保存?zhèn)溆茫R用前按劑量現(xiàn)配至所需濃度。

2.2 試劑劑量設(shè)置與配制 蛋黃乳液的配制：取1～2d的新鮮雞蛋，除去蛋清，用消毒生理鹽水?dāng)嚢杌靹颍涑?5%的蛋黃乳液備用，4 ℃ 貯藏備用[6]。

原雅解沙把的濃度為：“雅解沙把”70%醇煎提取、過濾制備稠浸膏，其中含有生藥2g/ml溶液，臨用時(shí)稀釋成不同質(zhì)量濃度備用。動(dòng)物注射蛋黃乳后最佳取血點(diǎn)的確認(rèn)：取體重（20±2）g的健康ICR小鼠30只，按體重與性別隨機(jī)分到5組，每組6只，正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水（0.5ml/只），其余4組腹腔注射75%蛋黃乳（0.5ml/只），每組分別于注射后0、6、12、18、24、48h后小鼠眼眶靜脈叢取血，離心后測(cè)定血清TC、TG，找尋小鼠注射蛋黃乳液后膽固醇升高到極大值所對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)[7]。

2.3 高脂血癥模型復(fù)制 參考文獻(xiàn)方法[8-10]，除正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水（0.5ml/只）外，其余4組腹腔注射75%蛋黃乳（0.5ml/只），注射后雄性小鼠20h或者雌性小鼠5h后，末次給藥后1h，摘取眼球取血，取血前禁食不禁水12h。

2.4 實(shí)驗(yàn)分組與給藥 取100只（體質(zhì)量18～22g，雌雄兼用）健康ICR小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分成5組。分組為：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組（辛伐他汀片20mg/kg）、雅解沙把高劑量組、雅解沙把低劑量組，每組20只。每只小鼠按0.2ml/10g灌胃給藥，正常對(duì)照組和模型組灌胃給予等體積蒸餾水；給藥組灌胃于相應(yīng)組的藥物，給藥前禁食不禁水12h，連續(xù)給藥7d。

2.5 實(shí)驗(yàn)用藥劑量的選定 雅解沙把劑量組的配制：雅解沙把（百解膠囊）臨床用量：0.2g*5粒*3次=3g/人-1·d-1藥物濃度設(shè)置為等效量、9倍等效量?jī)蓚€(gè)劑量。根據(jù)人和動(dòng)物的體表面積折算法，計(jì)算得出“雅解沙把”小鼠口服給藥的等效量為0.39g/kg，再參考實(shí)驗(yàn)組前期所完成的“雅解沙把”抗炎實(shí)驗(yàn)的有效劑量（P<0.05）為9倍臨床等效劑量，故本實(shí)驗(yàn)小鼠選擇3.51g/kg、0.39g/kg為高、低劑量。

2.6 指標(biāo)檢測(cè)

2.6.1 一般情況 實(shí)驗(yàn)期間每天稱體重，觀察小鼠食欲行為、糞便、毛發(fā)及死亡情況，做好記錄，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死小鼠，稱量體重。

2.6.2 血清樣品制取 末次給藥后1h，小鼠摘取眼球取血，以3600r/min離心10min分離血清，離心溫度設(shè)置為4℃，樣本放置于4～8℃可穩(wěn)定7d，-20℃可穩(wěn)定一個(gè)月。

2.6.3 實(shí)驗(yàn)樣品測(cè)定 按總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定試劑盒說明書，依次測(cè)定血清中總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇含量，并做好記錄。

2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理 采用SPSS16.0數(shù)據(jù)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，數(shù)據(jù)方差齊進(jìn)行組間t檢驗(yàn)；方差不齊進(jìn)行組間t′檢驗(yàn)。組間差異比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

不同劑量雅解沙把醇提物對(duì)蛋黃乳致高脂血癥小鼠血脂水平的影響，分別測(cè)定各組實(shí)驗(yàn)小鼠血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C），實(shí)驗(yàn)與分析結(jié)果如下。

3.1 雅解沙把對(duì)蛋黃乳致小鼠高脂血癥TC、TG含量影響比較 模型組與正常組相比，模型組小鼠血清的TC、TG濃度均升高且差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說明高脂血癥小鼠模型復(fù)制成功。與模型組相比，雅低組、陽性組，TC均降低且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；與模型組相比，雅高組、辛伐他汀陽性組，TG均降低且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。說明雅解沙把在降TC、TG水平方面具有一定的作用，且雅高、雅低組降低TC、TG的側(cè)重點(diǎn)有所不同。見表1。

3.2 雅解沙把對(duì)蛋黃乳致小鼠高脂血癥TC、TG含量影響比較 模型組與正常組相比，模型組小鼠血清的LDL-C、HDL-C濃度水平均分別升高、降低且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說明高脂血癥小鼠模型復(fù)制成功。與模型組比較，雅高組、陽性組、雅低組的LDL-C有降低的趨勢(shì)，但與模型組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。表明雅解沙把對(duì)該模型的降血脂作用不是很明顯。見表2。

4 討論

“雅解”學(xué)說是傣醫(yī)學(xué)最具民族特色的理論之一，它以四塔、五蘊(yùn)為理論核心，“未病先解，先解后治”的解毒理論是其核心內(nèi)容，雅解能解除人體內(nèi)各種毒素，調(diào)節(jié)因精神因素所導(dǎo)致體內(nèi)“四塔、五蘊(yùn)”功能失調(diào)而發(fā)生的各種疾病，達(dá)到防病治病，保持人體健康之目的[11]。在長(zhǎng)期醫(yī)療活動(dòng)中傣族人民陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了上百種具有解毒功效的藥物及方劑，統(tǒng)稱為雅解。雅解功能以解毒為主，針對(duì)各種食物、藥物、動(dòng)物叮咬及各種原因過敏等所致的體內(nèi)毒素而設(shè)，它屬于傣醫(yī)“解”理論的重要組成部分[12]。傣醫(yī)廣義的“解藥”包括的內(nèi)容非常廣泛；狹義的“解藥”內(nèi)容包括：解除食物毒性、解除毒性動(dòng)物叮咬毒、解除毒熱、解除藥物毒性和解除藥物作用五個(gè)方面[13]。目前，從國(guó)人飲食的發(fā)展趨勢(shì)來看，飲食結(jié)構(gòu)已發(fā)生了較大改變，特別是高脂飲食的攝入明顯增加，脂肪攝入過量則產(chǎn)生“脂毒”（高脂血癥）。“雅解沙把”是傣醫(yī)廣泛用于治療煙、酒、藥物、食物中毒行之有效的方藥，臨床上除用于解“酒毒”外，更多的是用于解“食物毒”，包括解脂毒等。項(xiàng)目組成員前期和西雙版納州傣醫(yī)院臨床研究均表明多種傣醫(yī)解藥具有明顯的解毒、保肝、促進(jìn)消化功能的作用，臨床主要用于消化系統(tǒng)疾病、代謝性疾病等。

雞蛋黃中的膽固醇和脂肪含量十分豐富，腹腔注射75%的蛋黃乳后，外源性脂質(zhì)通過腹膜迅速進(jìn)入血液循環(huán)，從而快速升高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血脂。所以本實(shí)驗(yàn)采取腹腔注射75%蛋黃乳方法成功復(fù)制急性高脂血癥模型。本實(shí)驗(yàn)主要是以蛋黃乳復(fù)制急性高脂血癥模型為研究對(duì)象，擬探討“雅解沙把”對(duì)蛋黃乳所致的脂毒（高脂血癥）是否有解毒的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）是判定高脂血癥的重要指標(biāo)，雅解沙把灌胃7d后，對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清TC、TG 濃度水平均顯著降低，且雅高、雅低組降低TC、TG有所側(cè)重。提示：雅解沙把對(duì)高脂血癥模型小鼠具有降血脂的作用，也即是具有解脂毒的作用。

參考文獻(xiàn)

[1]方潔，許建新. 傣醫(yī)“雅解”發(fā)展與應(yīng)用[J].中國(guó)中藥雜志，2012，37（14）： 2190-2192.

[2]王輝，鄭進(jìn)，代蓉，等. 傣醫(yī)解藥雅解沙把對(duì)大鼠肝藥酶活性的影響[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志， 2012，18（11）：52-55.

[3]段小花，鄭進(jìn)，王輝，等. 傣藥雅解沙把解藥物毒作用的研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志， 2013. 34（10）：56-57.

[4]林艷芳，依專，巖罕單，等. 論特色傣藥——雅解（解藥）[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2002，14（2）：38-40.

[5]玉臘波，林艷芳. 傣藥“雅解”（解藥）臨床應(yīng)用舉隅[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志， 2008，14（7）：25-29.

[6]徐叔云，卞如濂，陳修. 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1203.

[7]凌樹森，張菊，孫維林. 小鼠高膽固醇血癥快速造型法的研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志， 1985，70（1）：15-17.

[8]閆志芳，王永輝，李季英，等. 建立高血脂癥動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究[J].山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2004，5（4）：15-16.

[9]翟羽佳，陳邦添，李善兵，等. TritonWR-1339誘發(fā)小鼠高脂血癥模型的研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)， 2011，27（8）：1178-1179.

[10]馮任南，郭福川，李穎，等. 急性高血脂小鼠模型蛋黃乳及Trition法建立[J].中國(guó)公共衛(wèi)生， 2010，26（9）：1116-1117.

[11]唐琭璐. 傣醫(yī)“雅解”學(xué)說運(yùn)用規(guī)律的初步研究[D]. 云南：云南中醫(yī)學(xué)院，2012：1-100.

[12]臺(tái)海川，林艷芳. 傣醫(yī)“解”的理論與解藥的現(xiàn)代研究初探[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志， 2009，15（10）：37-39.

[13]明全忠，林艷芳. 傣醫(yī)“解藥”探討[J].中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào)，1999，14（3）：8-10，80.

（收稿日期：2014.11.28）