楊江媛

【摘 要】 目的：考察貓須草的最佳提取工藝。方法：以貓須草提取物中總黃酮的含量為指標(biāo)，對(duì)提取工藝進(jìn)行考察，以確定貓須草的最佳提取工藝。結(jié)果：15倍量的水浸泡藥材10h后，80℃加熱提取2次，每次3h。結(jié)論：收率較好，該工藝條件可行。

【關(guān)鍵詞】 貓須草；總黃酮；提取；收率

【中圖分類號(hào)】R284.2 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2015）04-0024-02

貓須草Clerodendranthus spicatus （Thunb.）C. Y. Wu又名腎茶、牙努秒、貓須公，為唇形科腎茶屬植物。該屬植物全世界僅有5種，產(chǎn)于東南亞的印度尼西亞、馬來西亞等東南亞國家，澳大利亞有少量分布。我國僅有貓須草一種，主要分布于廣東、海南、廣西南部、云南南部、臺(tái)灣及福建，常生于林下潮濕處。從上世紀(jì)起，我國多地引種栽培，其中以云南種植最多[1]。貓須草清涼消炎，可全草入藥，味苦，性涼。書中記載貓須草用以治療小便熱、澀、疼痛等泌尿系統(tǒng)疾病。民間認(rèn)為貓須草具有利尿、抗菌、消炎、溶石、排石和抗腫瘤作用，用于治療急慢性腎炎、膀胱炎、尿路結(jié)石、風(fēng)濕下肢關(guān)節(jié)炎和咽炎有特殊療效[2]。有文獻(xiàn)報(bào)道貓須草中的主要化學(xué)成分為黃酮類化合物，為控制貓須草的質(zhì)量，提高貓須草中有效成分的含量，對(duì)貓須草的提取工藝進(jìn)行研究和優(yōu)化，為貓須草的優(yōu)質(zhì)開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 試驗(yàn)器材 電子天平（十萬分之一，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）、電子天平（萬分之一，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）、NKSY型智能恒溫水浴鍋（常州諾基儀器有限公司）、3695-Ⅱ型紫外分光光度計(jì)（菲爾伯恩實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司）、昆山超聲清洗儀（安徽東南儀誠試驗(yàn)室設(shè)備有限公司）

1.2 對(duì)照品 蘆?。ㄖ袊称匪幤窓z驗(yàn)所，批號(hào)：121268-200904）

1.3 藥材 貓須草（采購自昆明市菊花村中藥材市場）

2 方法與結(jié)果

2.1 總黃酮含量測定方法

2.1.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱取蘆丁對(duì)照品16.42mg，加甲醇適量置水浴上微熱使溶解，放冷，甲醇定容至50ml，搖勻，即得濃度為0.3284mg/ml的蘆丁對(duì)照品溶液。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液0.5、1、1.5、2、3、4、5、6ml，分別置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min，以相應(yīng)的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅤA），在509nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表1。

以蘆丁含量（μg/ml）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制出總黃酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=0.0107X+0.0012，R2=0.9993，線性范圍為6.568～78.816μg/ml。

2.1.3 供試品制備 稱取浸膏適量，精密稱定，置25 ml錐形瓶中，精密稱定，加甲醇10 ml超聲處理10 min，放冷，精密稱定，甲醇補(bǔ)足重量，搖勻。精密量取5 ml，置10 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取3ml，置25 ml量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“加水至6ml”起依法測定吸收度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的濃度（μg/ml），計(jì)算即得。

2.1.4 水提液供試品溶液的制備 稱取各個(gè)單因素考察后的干浸膏約0.5g至錐形瓶中，精密稱定，50%甲醇水30ml浸泡1h，超聲提取30 min，放冷，過濾，回收濾液至5ml，用0.45μm的微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。

2.2 藥材含量測定

2.2.1 樣品制備 稱取貓須草藥材2份，每份5g，加入100ml甲醇浸泡4h，80℃加熱提取1h，過濾，濾渣再加入100ml甲醇同法提取1h，反復(fù)提取4～5次至提取完全，合并濾液，減壓回收溶劑，濃縮液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中，揮干溶劑至恒重，稱定浸膏重量，待測。

2.2.2 藥材中總黃酮的含量 按照2.1.3 項(xiàng)下總黃酮含量測定的方法，測定藥材中總黃酮的含量，測定結(jié)果見表2。

2.3 提取工藝考察

2.3.1 浸泡時(shí)間 取藥材10g，按照提取工藝，加入10倍量水分別浸泡藥材1、2、4、6、10h后，70℃溫浸提取2h，過濾，收集濾液，濾渣同法提取1次，合并濾液，減壓回收溶劑至干，測定浸膏出膏率及總黃酮含量，濾渣烘干備用，結(jié)果見表3。

加權(quán)評(píng)分=干浸膏含量×50%+總黃酮含量×50%

表3數(shù)據(jù)表明，當(dāng)藥材提取前浸泡10h，浸膏含量及總黃酮含量均較高，加權(quán)評(píng)分最大，因此藥材浸泡時(shí)間為10h。

2.3.2 提取溫度 取藥材10g，按照提取工藝，加入10倍量水浸泡藥粉10h后，分別于40、50、60、70、80℃浸漬提取2h，過濾，收集濾液，濾渣同法提取1次，合并濾液，減壓回收溶劑至干，測定浸膏出膏率及總黃酮含量，濾渣烘干備用，結(jié)果見表4。

3 結(jié)論

對(duì)貓須草藥材進(jìn)行水提取后，對(duì)提取物中的總黃酮含量進(jìn)行測定后發(fā)現(xiàn)提取物中總黃酮含量提高了2～3倍。但是由于黃酮苷類易溶于水，而黃酮類化合物大多易溶于醇類，為進(jìn)一步提高貓須草中總黃酮的提取率，下一步實(shí)驗(yàn)擬對(duì)水提取后的貓須草藥渣進(jìn)行低溫干燥處理后再次進(jìn)行醇提工藝的考察，以提高藥材的利用率。

貓須草是我國西南地區(qū)特有的少數(shù)民族藥，經(jīng)過長期實(shí)踐，貓須草在治療泌尿系統(tǒng)疾病方面具有顯著的療效。然而，由于缺乏系統(tǒng)完整的研究，大多數(shù)民族藥還停留在地區(qū)甚至更小的范圍內(nèi)用藥，一些具有顯著療效的民族藥還沒有得到充分的推廣使用。對(duì)貓須草提取工藝的研究，不僅有利于民族醫(yī)藥的推廣使用，而且也對(duì)民族醫(yī)藥的發(fā)展起到極大的推動(dòng)作用。

參考文獻(xiàn)

[1]許娜，許旭東，楊峻山. 貓須草的研究進(jìn)展[J].中草藥，2010，41（5）：12-16.

[2]任文輝，洪儷芳.貓須草的藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥，2013，44（20）：2946-2950.

[3]高增平，王寶華，江佩芬.不同產(chǎn)地貓須草化學(xué)成分預(yù)試及熊果酸含量對(duì)比[J]. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，22（5）：78-79.

[4]顏文祝，呂于謀，沈文通.貓須草主要化學(xué)成分初步預(yù)試[J].海峽藥學(xué)，1995，7（3）：3-4.

（收稿日期：2014.11.20）