紀(jì)青　向耘

【摘 要】 目的：分析珠海市甲真菌病病原菌的流行特點(diǎn)，了解其種類和構(gòu)成情況，并合理控制流行蔓延。方法：選取臨床擬診斷為甲真菌病并且真菌培養(yǎng)陽(yáng)性的2184例患者臨床資料進(jìn)行分析，并進(jìn)行真菌分離及菌種鑒定。結(jié)果：2184份標(biāo)本中有1428份檢出真菌菌絲或孢子，皮膚癬菌、酵母菌及霉菌三種病原菌比例分別為42.75%、45.54%和11、71%。TDO和DLSO患者以酵母菌感染為主，而PSO和SWO患者以皮膚癬菌感染為主。結(jié)論：珠海市甲真菌病的病原菌以酵母菌為主，臨床上應(yīng)根據(jù)甲真菌病患者病原菌的培養(yǎng)結(jié)果慎重合理選擇抗真菌藥物，從而提高甲真菌病的治療效果。

【關(guān)鍵詞】 病原學(xué)；甲真菌病；流行病學(xué)

【中圖分類號(hào)】R519 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2015）04-0106-02

甲真菌病是一種傳染性疾病，此疾病的發(fā)病原因主要為甲板或甲下組織受到真菌感染，最常見(jiàn)的真菌包括酵母菌、皮膚癬菌等[1]。據(jù)相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查顯示，目前全世界有超過(guò)3%的人群患有甲真菌病，并且皮膚真菌感染患者中30%為甲真菌病患者[2]。臨床上發(fā)現(xiàn)甲真菌病的致病菌多種多樣，經(jīng)多名學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，南北差異對(duì)于甲真菌病的致病菌類型也有影響，潮熱地區(qū)更容易生長(zhǎng)酵母菌，而統(tǒng)計(jì)全國(guó)發(fā)病原因可知，以皮膚癬菌感染最為常見(jiàn)，其次是酵母菌、霉菌[3]。為了解珠海市甲真菌病的臨床分類、菌種構(gòu)成等情況，筆者分別采集2010年12月至2013年12月期間在珠海市第二人民醫(yī)院皮膚科、珠海市金灣區(qū)三灶醫(yī)院皮膚科等珠海市各醫(yī)院皮膚科門診就診的懷疑甲真菌病患者，仔細(xì)詢問(wèn)患者的病史及一般資料，了解真菌類型，并進(jìn)行鑒定?，F(xiàn)將報(bào)告總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年12月至2013年12月期間分別在珠海市第二人民醫(yī)院皮膚科、珠海市金灣區(qū)三灶醫(yī)院皮膚科、中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院皮膚科、遵義醫(yī)學(xué)院第五附屬（珠海）醫(yī)院皮膚科門診就診的臨床擬診斷為甲真菌病的患者2184例。其中男914例，女1270例，年齡1個(gè)月至84歲，平均年齡（38.1±18.5）歲，病程1個(gè)月至30年，平均病程（3.7±1.4）年。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)材料 ①20%KOH溶液；②含氯霉素沙保氏瓊脂平皿培養(yǎng)基（廣州市迪景微生物科技有限公司生產(chǎn)）；③含氯霉素、放線菌酮沙保氏瓊脂平皿培養(yǎng)基；④玉米粉吐溫和酵母培養(yǎng)基；⑤科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基。

1.2.2 標(biāo)本采集 分別刮取2184例患者的甲屑。標(biāo)本采集過(guò)程中應(yīng)注意對(duì)甲及甲周圍皮膚的無(wú)菌處理，避免標(biāo)本受到污染。首先采用75%酒精對(duì)甲及甲周圍皮膚進(jìn)行消毒，然后采用鈍刃的手術(shù)刀在患甲處刮取少量甲屑。

1.2.3 標(biāo)本直接鏡檢 將標(biāo)本置于載玻片，后在標(biāo)本上方滴加1滴20%KOH作為封固液。制片完成后，即可采用光學(xué)顯微鏡對(duì)標(biāo)本進(jìn)行觀察。觀察過(guò)程中查到孢子或菌絲即為真菌陽(yáng)性。所有標(biāo)本均做培養(yǎng)進(jìn)行菌種鑒定。

1.2.4 培養(yǎng)和菌種鑒定 將標(biāo)本分別多點(diǎn)接種于沙保氏瓊脂平皿培養(yǎng)基，將平皿置于27℃恒溫箱中培養(yǎng)4周，分別于第1、2、3、4周觀察培養(yǎng)基內(nèi)菌落生長(zhǎng)情況，未觀察到真菌生長(zhǎng)即可視為陰性。若有真菌生長(zhǎng)，通過(guò)對(duì)菌落形態(tài)外觀、生長(zhǎng)形態(tài)、特殊培養(yǎng)、小培養(yǎng)、生化反應(yīng)和鏡下特征進(jìn)行菌種鑒定。念珠菌通過(guò)轉(zhuǎn)種科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基、或API20CAUX測(cè)試條鑒定。

1.3 觀察評(píng)價(jià)指標(biāo) 根據(jù)“醫(yī)學(xué)真菌學(xué)-實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)指南”分析各菌種種類，若培養(yǎng)基中僅觀察到皮膚癬菌生長(zhǎng)，即可判定皮膚癬菌為病原菌；若未觀察到皮膚癬菌，則培養(yǎng)基中相同菌落數(shù)超過(guò)4個(gè)，可將該真菌作為病原菌；若觀察到培養(yǎng)基中同時(shí)有兩種及兩種以上菌落數(shù)超過(guò)4個(gè)的真菌生長(zhǎng)，即可判斷為混合感染。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)確診患者的性別、平均年齡等，以及真菌學(xué)檢查陽(yáng)性率、陰性率及病原菌菌種構(gòu)成比率和分布情況。

2 結(jié)果

2.1 菌種及分布 2184份標(biāo)本中有1428份真菌培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為65.4%，其中男女患者比例為1.39∶1。共分離出1469株真菌，其中酵母菌699株（45.54%），皮膚癬菌628株（42.75%），霉菌172株（11.71%）。42例混合感染患者占所有真菌培養(yǎng)陽(yáng)性患者的2.94%，分析混合感染的種類分別有以下幾種組合，須癬毛癬菌+近平滑念珠菌4例，白念珠菌+近平滑念珠菌20例，近平滑念珠菌+青霉菌3例，混合熱帶念珠菌、近平滑念珠菌兩種真菌的有4例，混合熱帶念珠菌、白念珠菌共有4例，白念珠菌+鐮刀菌5例，白念珠菌+曲霉菌2例。各菌種分布情況見(jiàn)表1。

2.2 各臨床類型菌種構(gòu)成 各臨床類型菌種構(gòu)成見(jiàn)表2，由表可得，不同患者感染的真菌種類各不相同，當(dāng)發(fā)現(xiàn)酵母菌感染時(shí)應(yīng)主要懷疑TDO和DLSO患者，而發(fā)現(xiàn)皮膚癬菌感染時(shí)主要懷疑PSO和SWO患者。

3 討論

甲真菌病又稱甲癬，俗稱“灰指甲”，是指各真菌侵犯甲板或甲下導(dǎo)致甲感染所引起的疾病[4]。真菌感染以免疫功能低下及糖尿病等有基礎(chǔ)疾病患者多見(jiàn)，近年來(lái)隨著人民生活水平的提高，糖尿病患者逐漸增多。相關(guān)研究提示，酵母菌成為甲真菌病主要致病菌有可能與此有關(guān)[5-6]。20世紀(jì)80年代就有學(xué)者對(duì)甲真菌病進(jìn)行流行病學(xué)研究，但由于研究方法不統(tǒng)一，多為回顧性總結(jié)，因此結(jié)果可比性較差[7]。

本次研究發(fā)現(xiàn)，皮膚癬菌、酵母菌及霉菌三種甲真菌病的病原菌比例分別為42.75%、45.54%和11、71%，而國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究顯示，甲真菌病的主要致病菌為皮膚癬菌，而其次才是酵母菌和霉菌，與本次研究結(jié)果不符[8]。考慮造成此研究結(jié)果的可能因素為各地區(qū)存在氣候條件和生活習(xí)慣的差異，可進(jìn)一步與同緯度相似氣候條件做進(jìn)一步對(duì)比分析。并且不同臨床類型患者的主要致病菌不同，本次研究中TDO和DLSO患者與PSO和SWO患者，分別以酵母菌和皮膚癬菌感染為主。

綜上所述，珠海市甲真菌病的病原菌以酵母菌為主，臨床上應(yīng)根據(jù)甲真菌病患者病原菌的培養(yǎng)結(jié)果慎重合理選擇抗真菌藥物，從而提高甲真菌病的治療效果。

參考文獻(xiàn)

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[8]聶振華.中國(guó)不同區(qū)域淺部真菌病及致病菌調(diào)查比較分析[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2010，9（4）：264-265.

（收稿日期：2014.11.15）endprint