馮真真,陸建福,霍劍鋒
婦科門診患者性傳播疾病病原體感染臨床檢測分析
馮真真,陸建福*,霍劍鋒
婦科門診患者;解脲支原體;沙眼衣原體;淋球菌、熒光定量PCR
性傳播疾病(sexually transmitted diseases,STD)是一類以性接觸為主要傳播方式的泌尿生殖道感染性疾病。STD病原體主要有以下幾種:解脲支原體(UU)、沙眼衣原體(CT)、淋球菌(NG)、人乳頭瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)、部分真菌等。其中UU、CT、NG是3種最常見的性傳播疾病的病原體。其中解脲支原體是支原體感染最常見的一種,其感染率有逐年上升的趨勢[1]。目前臨床上對婦科門診患者分泌物三項(UU+CT+NG)檢測結(jié)果中NG及Ct陽性者常規(guī)進行治療,而UU檢測陽性率較高,其中覆蓋部分健康無癥狀人群,是否應給予常規(guī)治療目前尚存在爭議[2]。因此,明確上述病原體在有癥狀婦科門診患者中的感染情況對臨床處理有重要的指導意義。
1.1一般資料隨機抽取2013年10月—2014年9月婦科門診患者共162例,年齡15~60歲,平均36.5歲。
1.2方法
1.2.1標本采集所有婦科患者均用陰道窺器暴露陰道及宮頸,以特殊無菌棉拭子除去宮頸外口多余黏液,另取一無菌棉拭子伸入宮頸口內(nèi)1~2 cm,旋轉(zhuǎn)360°后停留30 s,取出置于無菌試管內(nèi)。樣本一經(jīng)采集,立即送至檢測實驗室,如不能馬上送檢樣本,必須在-20℃條件下保存并于兩周內(nèi)進行檢測。
1.2.2儀器與試劑熒光定量PCR法采用上海宏石醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的SLAN熒光定量PCR檢測系統(tǒng);R16型高速臺式冷凍離心機;K30B型干式恒溫器(杭州奧盛儀器有限公司);BHC-1100BZ型生物安全柜(安徽航天科技有限公司)。解脲支原體、沙眼衣原體和淋球菌FQ-PCR診斷試劑盒均為上海復興醫(yī)學科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)。
1.2.3檢測方法按試劑盒說明書操作及判定結(jié)果。
2.1工作曲線每次FQ-PCR的陰、陽性對照結(jié)果均正確。UU-DNA、CT-DNA和NG-DNA的定量陽性質(zhì)控標準品經(jīng)FQ-PCR以起始拷貝數(shù)的自然對數(shù)為橫坐標,以循環(huán)閾值為縱坐標,所得工作曲線均為一條直線型標準曲線(相關(guān)系數(shù)分別為-0.9998、-1.0000、-0.9999)。
2.2陽性檢出率FQ-PCR從162例標本中檢出陽性57例占35.19%。其中UU 46例(28.40%),CT 9例(5.56%),NG 2例(1.23%),UU+CT 6例(3.70%),UU+NG 1例(0.62%),CT+ NG 1例(0.62%),UU+CT+NG 0例。
UU是目前已知能獨立生活的最小微生物,其大小介于細菌和病毒之間,是女性泌尿生殖道常見的一種支原體,在成年女性生殖道中的定植率約為40%~80%,且妊娠期較高[2]。UU是引起非淋菌性尿道炎的主要病原體之一,還可引起宮頸炎及盆腔感染性疾病,并與不孕不育、早產(chǎn)、流產(chǎn)、低體重胎兒等病癥相關(guān)聯(lián)。國際上將UU分為生物1群和生物2群,共包含14個血清型,認為不同血清型UU致病性不同,可能某個或某些血清型與疾病發(fā)生有關(guān),目前臨床常用的UU檢測方法不能區(qū)分其血清型。UU引起的婦科患者泌尿生殖道感染逐年增多,濫用抗生素也使UU耐藥現(xiàn)象日益嚴重。
CT是革蘭氏陰性、需氧的專性胞內(nèi)病原體,可引起多種生殖道感染,如女性的宮頸炎及盆腔炎等,生殖道CT感染具有流行率高和無癥狀攜帶者多的特點[3],這種特點增加了早期診斷、治療和控制傳播的困難,部分CT感染婦女主訴下腹脹痛、白帶增多、異味,檢查時發(fā)現(xiàn)宮頸潮紅、宮頸柱狀上皮異位或?qū)m頸管口有黏液膿性分泌物,僅靠這些癥狀和體征,容易誤診為泌尿道感染或?qū)m頸炎而漏診大部分CT感染患者。因此CT感染明確診斷主要依靠實驗室檢查。
UU及CT兩種病原體均主要寄居于人體泌尿生殖道,所引起的臨床癥狀及體征難以區(qū)分,其感染泌尿系統(tǒng)主要通過性接觸傳播,多為隱匿性感染,可無特殊臨床表現(xiàn),常被忽略。并且無論有無癥狀一樣可導致婦女宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎等生殖道疾?。?-6]。
本研究顯示婦科患者中檢出NG感染者僅2例,檢出率極低,為1.23%。因此一旦檢測出NG陽性,即應積極治療。在162例患者中,總陽性率為40.12%,單一感染57例,占35.19%;混合感染為8例,占4.94%。這些相關(guān)數(shù)據(jù)與國內(nèi)相關(guān)文獻報道存在一定的差異,這說明不同地區(qū)性傳播疾病的流行存在一定的差異,另外可能與標本來源及留取方法存在一定的關(guān)系?;旌细腥境R奀T與UU的二重感染,這與文獻報道的CT與UU合并感染在混合感染中占首位與國內(nèi)相關(guān)文獻報道的一致。
UU、CT和NG是危害婦女患者生殖道健康的主要病原體,而在生殖道的混合感染比單項感染危害更大[7],建議臨床婦科醫(yī)師在診治婦女患者泌尿生殖道疾病的過中,對三種病原體同時檢測,力求早期發(fā)現(xiàn),及時治療,提高治愈率。
實時熒光定量PCR技術(shù)(real-time fluorescent quan-titative PCR,F(xiàn)Q-PCR)是利用了PCR對DNA的高效擴增,探針技術(shù)的高特異性和光譜技術(shù)的敏感性以及定量的特點,可準確、靈敏地反映UU、CT和NG的感染數(shù)量和治療恢復情況,對UU、CT和NG診斷和療效的觀察具有重要的指導作用。同時熒光定量PCR法具有高特異、高敏感的特點,能夠廣泛的運用于各種實驗室檢測。
[1]黃美瓊,李北坤,陸翠群.女性不孕患者解脲支原體感染檢測及耐藥性分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2009,6(10):773-774.
[2]趙超,劉暢,張果,等.婦科門診生殖道感染患者及無癥狀女性淋球菌、沙眼衣原體及解脲脲原體感染情況分析[J].中國婦幼保健,2014,29(16):2549-2551.
[3]Korenromp EL,Sudaryo MK,de Vlas SJ,et al.What proportion of episodes of gonorrhoea and chlamydia becomes symptomatic [J].Int J STD AIDS,2002,13(2):91-101.
[4]Cheney K,Chen MY,Donovan B,et al.Chlamydiat rachomatis infection among antenatal women in Sydney[J].Aust N Z J Public Health,2006,30(1):85-87.
[5]林永恩.女性泌尿生殖道支原體、解脲體支原體感染與不孕的相關(guān)性分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,19(22):2822-2823.
[6]程家明,鄭定容.淋球菌、沙眼衣原體和解脲脲原體混合感染臨床分析[J].醫(yī)學信息,2011,24(5)2612-2613.
[7]賀望嬌.522例患者沙眼衣原體、解脲脲原體和淋球菌感染情況分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2013,10(7):826-827.
[2015-03-19收稿,2015-04-17修回][本文編輯:宋敏]
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