寧艷春，尹利榮，劉秀榮，郭劍，劉寶蓮，韓寶生，王鳳蘭，劉海靜，劉恒，馬曉慧(天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，天津00000;唐山市婦幼保健院;保定市望都縣醫(yī)院)

卵母細(xì)胞形態(tài)異常對(duì)體外受精-胚胎移植臨床結(jié)局的影響

寧艷春1，尹利榮1，劉秀榮2，郭劍2，劉寶蓮2，韓寶生2，王鳳蘭2，劉海靜2，劉恒2，馬曉慧3
(1天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，天津300000;2唐山市婦幼保健院;3保定市望都縣醫(yī)院)

摘要:目的探討卵母細(xì)胞形態(tài)異常對(duì)體外受精-胚胎(IVF-ET)移植臨床結(jié)局的影響。方法收集523例患者的1 147個(gè)成熟卵母細(xì)胞按照形態(tài)分為四組，其中形態(tài)正常組295個(gè)、透明帶厚組236個(gè)、周隙大組301個(gè)以及顆粒粗組315個(gè)(后三組為形態(tài)異常卵母細(xì)胞)。比較四組的正常受精率、補(bǔ)救卵胞漿內(nèi)單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優(yōu)胚率、著床率以及臨床妊娠率。結(jié)果透明帶厚組成熟卵母細(xì)胞正常受精率明顯低于其他三組、R-ICSI率高于其他三組(P均＜0.05)。周隙大組、顆粒粗組卵裂率低于形態(tài)正常組、透明帶厚組(P均＜0.05)。與形態(tài)正常組比較，形態(tài)異常三組優(yōu)胚率、著床率、臨床妊娠率均降低(P均＜0.05)。結(jié)論卵母細(xì)胞形態(tài)異?？赡苡绊慖VF-ET臨床結(jié)局。

關(guān)鍵詞:受精，體外;胚胎移植;卵母細(xì)胞;臨床結(jié)局

有研究顯示，卵母細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征可以預(yù)示受精和早期胚胎發(fā)育的能力，理想的成熟卵母細(xì)胞應(yīng)該是極體呈圓形或橢圓形、表面光滑、細(xì)胞質(zhì)顆粒均勻清晰、卵周隙小、透明帶清晰透明［1～3］。但也有研究認(rèn)為，卵母細(xì)胞形態(tài)與受精及早期胚胎發(fā)育無(wú)關(guān)［4］。因此，本研究收集三組不同形態(tài)的成熟卵母細(xì)胞，比較其正常受精率、補(bǔ)救卵胞漿內(nèi)單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優(yōu)胚率、著床率以及臨床妊娠率，分析不同形態(tài)成熟的卵母細(xì)胞對(duì)體外受精-胚胎移植(IVF-ET)臨床結(jié)局的影響。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集2012年6月～2014年2月在唐山婦幼保健院生殖遺傳科進(jìn)行IVF-ET的患者523例，年齡21～35歲，不孕病程(5.69±1.96)年?；颊唧w質(zhì)量指數(shù)(20.56±3.52) kg/m2，竇卵泡數(shù)(5.62±1.23)個(gè)，促卵泡刺激素(8.59±3.65) mIU/mL，黃體生成素(5.36±2.12) mIU/mL，雌二醇(23.15±3.56) pg/mL?；颊呋A(chǔ)內(nèi)分泌正常，月經(jīng)規(guī)律，且無(wú)輔助生殖技術(shù)禁忌證。將符合IVF-ET條件523例患者的1 147個(gè)成熟卵母細(xì)胞按照形態(tài)分為四組，其中形態(tài)正常組295個(gè)、透明帶厚組236個(gè)、周隙大組301個(gè)以及顆粒粗組315個(gè)(后三組為形態(tài)異常卵母細(xì)胞)。

1.2IVF-ET四組加精4～6 h后觀察受精情況，如果受精率小于30%，則進(jìn)行R-ICSI。取卵日記錄R-ICSI率，ET當(dāng)天記錄優(yōu)胚率。ET后14 d檢測(cè)血β-hCG確定生化妊娠，ET后4周B超檢查確定臨床妊娠。比較四組的正常受精率、R-ICSI率、卵裂率、優(yōu)胚率、著床率以及臨床妊娠率。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以珋x±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

透明帶厚組正常受精率明顯低于其他三組，RICSI率高于其他三組(P均＜0.05)。周隙大組、顆粒粗組卵裂率低于形態(tài)正常組(P均＜0.05)。與形態(tài)正常組比較，形態(tài)異常三組優(yōu)胚率、著床率、臨床妊娠率均降低(P均＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1　四組正常受精率、卵裂率、R-ICSI率、優(yōu)胚率、著床率、臨床妊娠率比較(%，±s)

注:與其他三組比較，*P＜0.05;與形態(tài)正常組、透明帶厚組比較，△P＜0.05;與形態(tài)正常組比較，▲P＜0.05。

組別　n　正常受精率　卵裂率　R-ICSI率　優(yōu)胚率　著床率　臨床妊娠率形態(tài)正常組　295　85.36±6.35　97.62±3.56　3.21±1.35　36.59±2.63　63.56±6.35　53.26±6.25透明帶厚組　236　58.35±3.26*　93.56±4.25　12.36±2.36*　20.25±5.26▲　35.26±5.59▲　32.56±5.26▲周隙大組　301　82.59±2.95　79.63±5.69△　2.36±1.58　25.36±3.91▲　40.25±4.65▲　28.38±3.65▲顆粒粗組　315　84.58±5.36　74.21±6.85△　2.95±1.48　23.28±4.63▲　40.56±5.63▲　30.59±2.69▲

3　討論

卵母細(xì)胞是人類進(jìn)行有性生殖的配子之一，其質(zhì)量的好壞直接決定受精卵以及胚胎后期的分裂發(fā)育、著床、分化潛能。卵母細(xì)胞形態(tài)異常因促排卵過(guò)程中各種因素導(dǎo)致的，但具體原因并不完全明了［5，6］。透明帶是包繞在卵胞膜周圍的一層由顆粒細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)，在受精以及著床方面有重要作用。本研究中透明帶厚的成熟卵母細(xì)胞正常受精率明顯低于其他三種成熟的卵母細(xì)胞，R-ICSI率高于其他三種成熟的卵母細(xì)胞，說(shuō)明了透明帶增厚可能會(huì)通過(guò)影響精子的穿透，影響正常的受精率，提高R-ICSI率。而且透明帶增厚也會(huì)影響胚胎的孵出，從而影響其著床。這就需要采取激光打孔卵母細(xì)胞透明帶削薄技術(shù)，輔助其孵化著床［7］，但這種操作有可能增加單卵雙胎的概率。

在IVF控制性促排卵過(guò)程中，卵母細(xì)胞的胞核和胞質(zhì)不像自然周期一樣同時(shí)成熟，兩者成熟具有不同步性［8］。顆粒粗的成熟卵母細(xì)胞是胞核可能已經(jīng)成熟但胞質(zhì)還未成熟的一種表現(xiàn)［9］。本研究結(jié)果顯示，顆粒粗的卵母細(xì)胞雖然受精率與形態(tài)正常的卵母細(xì)胞沒(méi)有差異，但是卵裂率和優(yōu)胚率明顯低于形態(tài)正常組，這就導(dǎo)致了后期的臨床妊娠率低，受精后胚胎進(jìn)一步發(fā)育的潛能較差。周隙大的卵母細(xì)胞也是在IVF過(guò)程中常見(jiàn)的一種異常形態(tài)。在卵母細(xì)胞發(fā)育的過(guò)程中，極體剛剛從卵胞膜中排出來(lái)卵母細(xì)胞，極體扁平，卵周隙很小。卵周隙大的卵母細(xì)胞是否是一種卵母細(xì)胞過(guò)度成熟、卵周隙過(guò)度擴(kuò)張的表現(xiàn)有待進(jìn)一步研究。本研究中卵周隙大的卵母細(xì)胞受精率和正常卵母細(xì)胞沒(méi)有差異，但是其后期的卵裂率、優(yōu)胚率以及臨床妊娠率明顯降低，說(shuō)明卵周隙大的卵母細(xì)胞胞質(zhì)、細(xì)胞器、酶類、蛋白質(zhì)等供胚胎后期發(fā)育的一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有可能已接近退化，從而影響胚胎的后期發(fā)育。

綜上所述，IVF-ET過(guò)程中卵母細(xì)胞是一種重要的配子，其形態(tài)可能影響IVF-ET臨床結(jié)局。因此在控制性促排卵的過(guò)程中，臨床醫(yī)生應(yīng)該注意適當(dāng)調(diào)節(jié)促卵泡素的起始劑量，盡量為實(shí)驗(yàn)室提供形態(tài)正常、胞核和胞質(zhì)都成熟的正常形態(tài)的卵子。同時(shí)也要根據(jù)卵母細(xì)胞的異常形態(tài)采取相應(yīng)的措施，如卵胞漿內(nèi)單精子注射、透明帶削薄等，以提高IVF-ET整體臨床妊娠率。

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(收稿日期:2014-08-29)

通信作者:尹利榮

文章編號(hào):1002-266X(2015)21-0050-02

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B

中圖分類號(hào):R714.13

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.21.019