吳純偉，關(guān)琴笑，路 麗，趙 路，容悅瑩，梁生旺，王淑美

(廣東藥學(xué)院 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

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通脈復(fù)方中川芎揮發(fā)油提取及包合工藝研究

吳純偉，關(guān)琴笑，路 麗，趙 路，容悅瑩，梁生旺，王淑美*

(廣東藥學(xué)院 中藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

目的：對(duì)通脈復(fù)方中川芎揮發(fā)油的提取及β-環(huán)糊精包合的最佳工藝進(jìn)行研究。方法：采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，以揮發(fā)油的提取率為指標(biāo)，考察萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間的最佳條件；以揮發(fā)油的包合率為指標(biāo)，考察β-環(huán)糊精與揮發(fā)油比例、包合時(shí)間及包合溫度等因素的最佳條件。結(jié)果：川芎揮發(fā)油最佳提取工藝為萃取壓力28MPa，萃取溫度45℃，萃取時(shí)間40min。川芎揮發(fā)油最佳包合工藝為川芎揮發(fā)油與β-CD的比例為1∶8 (mL∶g)，在包合溫度為50℃的條件下包合1h。結(jié)論：優(yōu)選的揮發(fā)油提取及包合工藝穩(wěn)定可行。

通脈；揮發(fā)油；提?。话?/p>

復(fù)方通脈由川芎、丹參、葛根三味藥組成，具有活血通脈的功效，用于治療缺血性心腦血管疾病，如腦缺血、腦血栓、動(dòng)脈硬化、心絞痛、冠心病等。臨床多用于冠心病的治療[1]。方中川芎的揮發(fā)油，為方劑中活血行氣、祛風(fēng)止痛的有效成分[2]。由于揮發(fā)油在生產(chǎn)和儲(chǔ)存過程中易氧化、易揮發(fā)，從而降低療效。因此，本實(shí)驗(yàn)對(duì)揮發(fā)油提取工藝及β-CD包合工藝進(jìn)行優(yōu)選，以保證制劑的質(zhì)量及其臨床療效。

1 儀器和試藥

LC-20AT高效液相色譜儀、LCSOLUTION(VER.1.21)工作站；CTO-20A柱溫箱(日本島津)；FY221-50-60型超臨界萃取儀(南通市飛宇石油科技開發(fā)有限公司)；BSZZ4S型電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；DK-S26型電熱恒溫水浴鍋(上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

川芎藥材購自于廣州致信藥材有限公司，經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院劉基柱教授鑒定為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖。甲醇、乙腈(瑞典歐森巴克環(huán)境化學(xué)公司，色譜純)，其他試劑為分析純。

2 川芎揮發(fā)油提取工藝研究

2.1 川芎提取正交試驗(yàn)方法設(shè)計(jì)[3-4]

本實(shí)驗(yàn)以超臨界萃取法提取揮發(fā)油，以萃取壓力(A)、萃取溫度(B)、萃取時(shí)間(C)作為考察因素，各設(shè)計(jì)3個(gè)水平，以揮發(fā)油提取率為指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)方法，按照L9(34)正交表設(shè)計(jì)試驗(yàn)，優(yōu)選揮發(fā)油的提取工藝。因素水平設(shè)計(jì)見表1，正交試驗(yàn)結(jié)果、方差分析見表2、表3。

表1 提取工藝因素水平

表2 提取工藝正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 提取工藝方差分析結(jié)果

注：F0.05(2,2)=19.00，*P<0.05；F0.01(2,2)=99.00，**P<0.01。

以揮發(fā)油體積為試驗(yàn)指標(biāo)，對(duì)揮發(fā)油提取結(jié)果進(jìn)行直觀分析，比較3個(gè)因素的極差，Rc>Rb>Ra，故影響因素的大小順序?yàn)镃>B>A。由上述方差分析結(jié)果可知，因素萃取溫度(B)、萃取時(shí)間(C)各水平間有顯著性差異，再結(jié)合揮發(fā)油各水平含量及實(shí)際生產(chǎn)，優(yōu)選最佳揮發(fā)油提取工藝為A2B2C2，即：萃取壓力為28MPa，萃取溫度為45℃，萃取時(shí)間為40min。

2.2 驗(yàn)證試驗(yàn)

按上述最佳提取工藝進(jìn)行3次試驗(yàn)，提取揮發(fā)油體積分別為1.18mL，1.17mL，1.20mL。結(jié)果表明，該提取工藝穩(wěn)定可行。

3 揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合研究

3.1 川芎揮發(fā)油包合工藝正交試驗(yàn)方法設(shè)計(jì)[5-6]

通過預(yù)實(shí)驗(yàn)，采用飽和水溶液法，以β-環(huán)糊精∶揮發(fā)油(g∶mL)，包合時(shí)間(min)，包合溫度為因素(℃)為考察因素，每個(gè)因素確定3個(gè)水平，以包合物得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用L9(34)正交表，優(yōu)選出揮發(fā)油的包合工藝。因素水平見表4，正交試驗(yàn)結(jié)果、方差分析分別見表5、表6。

表4 包合工藝因素水平

表5 包合工藝正交試驗(yàn)結(jié)果

表6 包合工藝方差分析結(jié)果

注：F0.05(2，2)=19.00，*P<0.05;F0.01(2，2)=99.00,**P<0.010。

直觀分析表明，三個(gè)因素對(duì)評(píng)價(jià)指標(biāo)的影響程度由大到小排列順序?yàn)椋篈>C>B，即揮發(fā)油與β-CD的比例對(duì)指標(biāo)的影響最大，包合時(shí)間影響最小。由方差分析結(jié)果可知，因素?fù)]發(fā)油與β-CD的比例(A)、包合溫度(C)各水平間有顯著性差異。因此最終確定最佳包合工藝條件為A3B2C2，即：川芎揮發(fā)油與β-CD的比例為1∶8 (mL∶g)，包合溫度為50 ℃，包合時(shí)間為1h。

3.2 驗(yàn)證試驗(yàn)

按上述最佳包合工藝條件進(jìn)行3次試驗(yàn)，揮發(fā)油包合得率分別為74.18%、75.44%、73.97%。結(jié)果表明，該包合工藝穩(wěn)定可行。

4 討論

本研究運(yùn)用正交試驗(yàn)對(duì)揮發(fā)油提取和包合工藝進(jìn)行研究，確定揮發(fā)油最佳提取工藝為萃取壓力28MPa，萃取溫度45℃，萃取時(shí)間40min；揮發(fā)油最佳包合工藝為川芎揮發(fā)油與β-CD的比例為1∶8(mL∶g)，在包合溫度為50℃的條件下包合1h。有文獻(xiàn)報(bào)道，正交試驗(yàn)結(jié)果得50℃攪拌揮發(fā)油的得率最高，這是因?yàn)棣?CD在50℃的溶解度高于室溫，既可使揮發(fā)油能更多的包合，同時(shí)又可避免高溫?cái)嚢瓒饟]發(fā)油逸散[7]。

川芎中的揮發(fā)油為復(fù)方通脈中的主要有效成分，易揮發(fā)且遇熱、光不穩(wěn)定，無法保證制劑的質(zhì)量和臨床療效。經(jīng)β-CD包合后，液態(tài)變成固態(tài)，掩蓋揮發(fā)油的不良?xì)馕叮|(zhì)量穩(wěn)定，有利于生產(chǎn)保存以及制劑的療效[8]。

[1] 肖純,孫明,周宏研.通脈顆粒治療冠心病心絞痛的臨床研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2004,14(9):57-61.

[2] 國家藥典委員會(huì).中國藥典[S].一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：70.

[3] 郁威,張鋒,蘇克曼.超臨界CO2萃取當(dāng)歸和川芎的研究[J].中成藥,2002, 6(24): 411-415.

[4] 張虹,柳正良,王洪泉.超臨界萃取法提取川芎中有效成分的研究[J].中草藥, 2001, 32 (12): 1077-1079.

[5] 張海英,李偉.正交法優(yōu)化異株百里香揮發(fā)油提取及β-環(huán)糊精包合工藝研究[J].中藥材, 2010,33(12):1942-1946.

[6] 朱冉,郭玫,魏舒暢,等.當(dāng)歸揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備工藝及定性分析[J].中藥材, 2012,35(8):1322-1326.

[7] 靳怡然,杜英峰,袁志芳,等.戒毒膠囊制備工藝中揮發(fā)油提取及其β-環(huán)糊精包合工藝的研究[J].中成藥,2008,30(11)：1710-1713.

[8] 賈曉斌,高成林,陳彥,等.小兒腹瀉暖臍散中揮發(fā)油的提取及其β-環(huán)糊精包合物的制備研究[J].中成藥,2009,31(4)：632-633.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

Study on the Technological Process of the Extraction and the β-Cyclodextrin Inclusion of the Volatile Oil in Tongmai

Wu Chunwei，Guan Qinxiao，Lu Li，Zhao Lu，Rong Yueying，Liang Shengwang，Wang Shumei*

(Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China)

Objective:To study on the technological process of the extraction and the β-Cyclodextrin inclusion of the volatile oil in Tongmai.Methods:With the index of the yield of volatile oils, the extraction technology of volatile oils from Tongmai was optimized by orthogonal test with factors of extraction pressure, temperature and time. With the index of inclusion rate, inclusion process of β-CD was optimized by orthogonal test with factors of β-CD to volatile oils, inclusion temperature and mixing time. Results:The optimized extract process of volatile oil was that the extraction pressure is 28 Mpa at 45℃ for 40min. The β-CD inclusion processl was that the proportion of β-CD and volatile oil was 8∶1 (g∶mL) at 50 ℃ for mixing 1 h.Conclusion:This method established for the extraction of volatile oil and β-cyclodextrin inclusion was feasible and steady.

Tongmai; Volatile oil; Extraction; Inclusion

2014-09-02

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81274060)；廣東省中醫(yī)藥局基金項(xiàng)目(20112152)

吳純偉(1990-)，男，廣東藥學(xué)院碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量控制。

王淑美(1966-)，女，廣東藥學(xué)院教授，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量控制。E-mail：shmwang@sina.com

R283

A

1673-2197(2015)03-0022-02

10.11954/ytctyy.201503009