祖 雙，劉黎峰，梁 潔，劉明穎，肖 雪2,,4，羅國安

(1.吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司，吉林 延邊 133700；2. 廣東藥學院，廣東 廣州 510006；3.清華大學 分析中心，北京 100084；4. 中山大學 南沙研究院， 廣東 廣州 511458)

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兩種相似度表征參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜質量研究

祖 雙1，劉黎峰1，梁 潔2*，劉明穎3，肖 雪2,3,4，羅國安3

(1.吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司，吉林 延邊 133700；2. 廣東藥學院，廣東 廣州 510006；3.清華大學 分析中心，北京 100084；4. 中山大學 南沙研究院， 廣東 廣州 511458)

目的：用兩種相似度評價方法進行參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜相似度的評價，為其質量控制提供依據(jù)。方法：采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)和程度相似度對參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜進行相似度評價。結果：兩種方法對參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜相似度均有有效表征。結論：程度相似度可作為參芪王漿養(yǎng)血口服液的質量控制方法。

參芪王漿養(yǎng)血口服液；指紋圖譜；相似度

參芪王漿養(yǎng)血口服液是由人參、黃芪、當歸、蜂王漿等原料經(jīng)現(xiàn)代生產(chǎn)工藝制成，主要功能為補益氣血、養(yǎng)心安神，可用于氣血兩虛證，癥見神倦乏力、食欲不振、失眠等[1]。在研究過程中，我們采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)對其進行了相似度評價研究[2-4]，發(fā)現(xiàn)其表征參芪王漿養(yǎng)血口服液的整體質量存在些許不足。因此本試驗引入了程度相似度技術[5-7]對參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜進行相似度評價研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀(包括G13158 DAD檢測器、G1312A低壓四元泵、在線脫氣機、自動進樣器、柱溫箱)(Agilent科技有限公司，美國)，KQ-500E超聲波清洗器(昆山超聲設備有限公司)，Mill-Q Synthesis超純水純化系統(tǒng)(美國Millipore公司)，Excellence XP205型十萬分之一分析天平(Mettler Toledo公司)，SL300N型電子天平(上海精密科學儀器有限公司)等。

1.2 材料

乙腈(色譜純、Fisher公司)，甲酸(分析純，北京現(xiàn)代東方精細化工有限公司)，超純水自制。參芪王漿養(yǎng)血口服液由吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司提供。

1.3 軟件

中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)(國家藥典委員會)，程度相似度評價軟件V1.0(清華大學羅國安教授研究團隊自主研發(fā))

2 方法與結果

2.1 色譜條件[8]

Agilent Zorbax-SB C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動相：采用梯度洗脫，A相為水，B相為乙腈(0～20min，B：1.0～8.0%；20～35min，B：8.0～40%；35～60min，B：40～95%；60～65min，B：95%～95%)；流速：1.0mL/min，DAD檢測器，柱溫35 ℃，檢測波長為203nm，進樣量為5μL。所得到的指紋圖譜見圖1。

2.2 中藥色譜指紋圖譜相似度評價

采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)進行相似度評價，選取13個共有峰為參照，將9個批次指紋圖譜導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)，時間窗設置為0.1min，以S1為基準，設為中位數(shù)，自動匹配，生成對照圖譜，并采用夾角余弦法計算相似度，結果見表1。

圖1 參芪王漿養(yǎng)血口服液203nm檢測結果

2.3 程度相似度評價

程度相似度軟件V1.0是清華大學羅國安教授研究團隊自主研發(fā)的一款用于評價指紋圖譜量化相似度軟件，其主要原理是通過比較各色譜峰峰面積的差異，來表征指紋圖譜的相似度。本試驗選取“2.2”項下13個指標峰的峰面積作為原始參數(shù)，同時求算13個指標峰的平均值，導入程度相似度軟件，以平均值為目標指標，計算各個指標峰的程度相似度，并計算13個指標峰的平均程度相似度作為該指紋圖譜的程度相似度。結果見表1。

表1 9批成品相似度評價結果

3 討論

按照國家藥典委員會關于“中藥注射液指紋圖譜研究的技術要求(暫行)通知”，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)計算的相似度均≥0.85，其結果表明，參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜方法可操作性強、重復性好，也說明了在此指紋圖譜條件下參芪王漿養(yǎng)血口服液中含有的物質基礎變化不大。此相似度評價技術可以作為參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜的初步評價基礎。

采用程度相似度軟件得到的相似度數(shù)據(jù)參差不齊，整體數(shù)據(jù)偏低，同時程度相似度計算的是各個指標峰的峰面積，其代表了該指標峰所表征的物質含量，因此，程度相似度的數(shù)據(jù)一定程度上表明了參芪王漿養(yǎng)血口服液中主要指標成分的含量差異較大。

目前諸多中藥(原藥材、提取物、中間體、成品等)采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)進行質量評價，均取得了較好的研究結果[9]。我們建議在保證采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)得到良好的質量保證之后，開展對中藥的主要成分進行含量穩(wěn)定性的控制研究，而采用程度相似度技術則是一個較好的選擇。

[1] 金光日，洪海. 參芪王漿養(yǎng)血口服液中10-羥基-2-癸烯酸(10-HAD)的含量測定[J].長春中醫(yī)藥大學學報，2007，23(5)：32-33.

[2] 羅國安，梁瓊麟，王義明.中藥指紋圖譜-質量控制與新藥研發(fā)[M].北京：化學工業(yè)出版社，2009.

[3] 羅國安，王義明.中藥指紋圖譜的分類和發(fā)展[J]. 中國新藥雜志，2002(11):46-51.

[4] 肖雪，羅國安，王義明，等.中藥板藍根高效液相色譜法指紋圖譜研究[J].江西中醫(yī)學院學報，2010，22(3)：67-69.

[5] 段和祥，劉永鎖，羅國安，等.程度相似度結合聚類分析在金銀花藥材質量評價中的應用[J]. 中成藥，2007，29(3)：318-321.

[6] 劉永鎖，孟慶華，蔣淑敏，等. 相似系統(tǒng)理論用于中藥色譜指紋圖譜的相似度評價[J]. 色譜，2005，23(2)：158-163.

[7] 聶磊，曹進，羅國安，等.中藥指紋圖譜相似度評價方法的比較[J].中成藥，2005，27(3)：249-252.

[8] 祖雙，梁潔，劉明穎，等.參芪王漿養(yǎng)血口服液高效液相指紋圖譜研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2014,11(2)：19-21.

[9] 曹進，饒毅，沈群，等. 中藥指紋圖譜及其建立原則[J].中藥新藥與臨床藥理，2001，12(3)：200-203.

(責任編輯：宋勇剛)

The Quality Study of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root by Two Kinds of Similarity Methods

Zu Shuang1, Liu Lifeng1, Liang Jie2*, Liu Mingying3, Xiao Xue2, 3, 4, Luo Guoan3

(1.Jilin Aodong Medicine Industry Group Co., Ltd., Yanbian 133700, China; 2.Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 3.Analysis Center, Tsinghua Unviersity, Beijing 100084, China; 4.Nansha Research Institute, Sun Yat-sen University, Guangzhou 511458, China)

Objective:To evaluate the quality of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root (NOLRJGA) by two kinds of similarity methods.Methods:The chromatographic fingerprint similarity evaluation system (2004 A) and the extent similarity were used to evaluate the fingerprints of NOLRJGA.Results: The two kinds of similarity methods were useful to evaluate the quality of NOLRJGA. Conclusion:The extent similarity could be an effective method to control the quality of NOLRJGA.

Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root, Fingerprint, Similarity

2014-09-27

祖雙(1970-)，男，吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司主管藥師，研究方向為中藥質量控制。

梁潔(1969-)，女，廣東藥學院副教授，研究方向為食品質量安全及中藥質量控制。

R284

A

1673-2197(2015)03-0030-02

10.11954/ytctyy.201503012