王緒明，李凡彩，曾思恩，李 艷，劉麗江＊

（1.江漢大學江大病理診斷中心組織病理診斷部，湖北武漢430056；2.江漢大學醫(yī)學院病理學與病理生理學教研室；3.桂林醫(yī)學院病理學教研室及桂林醫(yī)學院附院病理科）

B型超聲引導下半自動活檢穿刺聯(lián)合免疫組織化學標記在肺腫瘤術前組織學診斷中的評價

王緒明1，2，3，李凡彩3，曾思恩3，李 艷1，2，劉麗江1，2＊

（1.江漢大學江大病理診斷中心組織病理診斷部，湖北武漢430056；2.江漢大學醫(yī)學院病理學與病理生理學教研室；3.桂林醫(yī)學院病理學教研室及桂林醫(yī)學院附院病理科）

肺癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，據(jù)2013年中華人民共和國衛(wèi)生與計劃生育委員會統(tǒng)計顯示，在中國肺癌患者死亡率居惡性腫瘤患者死亡率的第一位［1］。目前肺癌的早期診斷還比較困難，半自動穿刺活檢對患者損傷小，結(jié)合免疫組織化學檢測，能在術前明確肺部腫瘤的良惡性、甚至病理組織學分型，對早期提高肺腫瘤患者的術前診斷正確率和生存率具有重要的意義。本研究就肺部腫塊病例術前的活檢穿刺標本聯(lián)合或不聯(lián)合免疫組織化學染色切片的病理診斷結(jié)果與術后大體標本的H＆E染色切片聯(lián)合免疫組織化學染色切片的病理診斷結(jié)果進行比較，評價B型超聲引導下半自動活檢穿刺聯(lián)合免疫組織化學標記在肺腫瘤術前診斷中的優(yōu)越性。

1 材料與方法

1.1 臨床信息 入組患者包括男性（43人）和女性（18人），年齡23－80歲，平均年齡55.6歲。手術結(jié)束以后，對61例手術標本進行大體檢查均發(fā)現(xiàn)腫物，最大徑從0.6cm－7cm。

1.2 穿刺標本制片 在B型超聲（惠普IE33彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率2－4MHz）引導下，選用TSK 18G×160mm半自動活檢穿刺針（日本TSK株式會社）進行肺部腫物穿刺活檢。穿刺組織標本數(shù)量為3條／例。所有穿刺送檢標本全部常規(guī)石蠟包埋、H＆E染色及免疫組織化學染色。

1.3 肺腫瘤術后標本取材、制片 分別記錄腫瘤的部位、大小、性狀；取材要求為：腫瘤區(qū)域＞4塊，瘤旁區(qū)（腫瘤旁2cm以內(nèi)區(qū)域）＞2塊，其余區(qū)域（腫瘤旁2cm以外區(qū)域）＞1塊。對于顯微鏡下未見典型病變或病變與穿刺標本診斷結(jié)果不符的病例重復取材2次。肺門淋巴結(jié)全部取材。常規(guī)石蠟包埋，切片制片，H＆E染色和免疫組織化學染色。

1.4 閱片評價項目 每例的穿刺活檢標本及手術切除標本（H＆E染色切片和免疫組織化學染色切片）均由兩位副教授／副主任及以上級別的醫(yī)師一起閱片得出其病理組織學分型。對不能明確診斷的病例，記錄原因包括腫瘤組織＜10%、細胞退變、大片壞死、組織擠壓等。

2 結(jié)果

2.1 手術前穿刺標本病理診斷 穿刺組織條直徑為0.1－0.2cm，長為0.5－1.3cm，多數(shù)標本均取得足以診斷的組織標本。單純H＆E染色切片的穿刺標本中從形態(tài)學角度診斷為炎癥10例，肺癌30例，良性間葉源性腫瘤0例，不能明確診斷的標本21例；聯(lián)合應用H＆E染色切片及免疫組織化學染色切片的穿刺標本中診斷為炎癥20例，肺癌36例，良性間葉源性腫瘤4例，不能明確診斷的標本1例。不能明確診斷的主要原因是送檢組織太少，組織明顯擠壓，少部分穿刺標本僅見少許異型細胞而無法分類。

2.2 手術后標本病理診斷 結(jié)合免疫組織化學染色的術后大體標本中診斷為炎癥21例，肺癌36例，良性間葉源性腫瘤4例。

2.3 B型超聲引導下半自動活檢穿刺聯(lián)合免疫組織化學標記診斷符合率 見表1、圖1－6。結(jié)果顯示，對于原因不明的肺部腫塊的術前活檢穿刺標本，單純從形態(tài)學角度進行診斷，鱗癌確診率為15.3%（2／14），腺癌確診率為18.2%（2／11），小細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌確診率為11.1%（1／9），腺鱗癌確診率為0%（0／2），間葉源性良性腫瘤確診率為0%（0／4），炎癥性病變的確診率為47.6%（10／21）；聯(lián)合免疫組織化學標記后，術前活檢穿刺標本的鱗癌確診率92.9%（13／14），腺癌確診率為100%（11／11），小細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌確診率為100%（9／9），腺鱗癌確診率為100%（2／2），間葉源性良性腫瘤確診率為100%（4／4），炎癥性病變的確診率為95.2%（20／21）。

表1 61例活檢穿刺標本與術后大體標本病理診斷結(jié)果比較

圖1 HE10×10瘤細胞彌漫分布

圖2 Vim（＋）20×10結(jié)合其他免疫組化指標，提示腫瘤來源于間葉組織

圖3 HE10×10纖維組織內(nèi)有成巢浸潤

圖4 CK（＋）10×10結(jié)合其他免疫的細胞組化指標提示上皮來源惡性腫瘤

圖5 10×10纖維組織中有成巢浸潤

圖6 Cg－A（＋）40×10結(jié)合其他免疫的小細胞組化指標提示神經(jīng)內(nèi)分泌細胞來源惡性腫瘤

3 討論

手術加放療及化療仍是當前肺癌的主要治療手段，因此術前正確的病理學評價顯得尤為重要。當患者臨床癥狀不典型，而腫瘤遠離大的支氣管腔，支氣管鏡無法到達時，對于纖維支氣管鏡不能見到的病變，活檢陽性率僅22%－60%［2，3］，因此穿刺活檢就成為術前診斷的比較可靠的指標之一。有研究者認為［4］，細針穿刺活檢安全性高，但因其穿刺標本量少，診斷率較低。有研究報道［5］，采用細針抽吸活檢，在45例惡性腫瘤中，細胞學檢查陽性率為75%，但可進一步分類的僅有55%，診斷符合率較低，制約著臨床診斷和治療的及時有效進行［6－8］。

近年來，本院采用B型超聲引導下的肺穿刺活檢，對一些遠離支氣管的肺部病變進行穿刺活檢，對于常規(guī)H＆E染色難以診斷的病例，輔以免疫組織化學標記后結(jié)果顯示，B型超聲引導下肺穿刺活檢聯(lián)合免疫組織化學標記對于肺上皮源性惡性腫瘤的確診符合率達100%，炎癥診斷符合率為95.2%，間葉源性良性腫瘤的診斷符合率達100%，該診斷符合率遠遠高于文獻報道的纖維支氣管鏡活檢和細針穿刺活檢的診斷率［2－4］。

我們發(fā)現(xiàn)，B型超聲引導下的肺穿刺活檢結(jié)合免疫組織化學染色方法提高肺上皮源性惡性腫瘤的分類診斷的確診率，鱗癌確診率92.9%（13／14），腺癌確診率為100%（11／11），小細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌確診率為100%（9／9），腺鱗癌確診率為100%（2／2）；對于肺間葉源性良性腫瘤的診斷符合率達到100%（4／4），大體標本最后證實其中包含神經(jīng)纖維瘤1例，肺硬化性血管瘤1例，神經(jīng)鞘膜瘤2例。但是B型超聲引導下的肺穿刺活檢結(jié)合免疫組織化學染色方法依然不能有效克服送檢腫瘤組織太少，組織大片壞死，細胞明顯退變，少部分B型超聲引導下的肺穿刺活檢標本僅見少許異型細胞而無法分類等問題，分析原因可能是由于穿刺部位的腫瘤組織有壞死、出血等繼發(fā)改變，因此組織質(zhì)地脆，穿刺針難以有效獲取支持診斷的組織，或是未能取到腫瘤部位，造成即使做免疫組化也難以診斷，遇到這種情況，一般建議通過再次活檢，以便獲得有效的組織結(jié)構(gòu)支持診斷。

綜上所述，B型超聲引導下的肺穿刺活檢結(jié)合免疫組織化學染色方法，有效的提高了肺腫瘤的術前良惡性鑒別診斷率及上皮源性腫瘤的分類診斷確診率，對于明確術前診斷，彌補纖維支氣管鏡的不足，節(jié)約醫(yī)療資源，降低醫(yī)療成本，降低患者手術風險具有重大意義。

［1］中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.《2013中國衛(wèi)生統(tǒng)計年鑒》

［2］楊景偉，崇文玲，張剛，等.肺癌術前纖維支氣管鏡檢查的診斷價值［J］.中國微創(chuàng)外科雜志，2013，13（6），528.

［3］王西華，王西勇，楊遠.非直視經(jīng)纖支鏡肺活檢聯(lián)合細胞學檢查對周圍型肺癌的診斷價值［J］.中國內(nèi)鏡雜志，2012，18（6）：571.

［4］王海彥，莊一平，張晉，等.CT引導下經(jīng)皮細針穿刺活檢檢測中晚期肺癌表皮生長因子受體基因突變［J］.中國介入影像與治療學，2013，10（1）：33.

［5］余 力，朱新生，區(qū)士歡.胸部病變CT導引經(jīng)皮穿刺活檢的病理診斷［J］.中華腫瘤雜志，1999，21（3）：213.

［6］唐云蘭，高 峰.CT引導下經(jīng)皮穿刺針吸活檢術在肺周圍腫塊診斷中的臨床應用研究［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2008，16（7）：1151.

［7］Laurent F，Latrabe V，Vergier B，et al.CT－guided transthoracic needle biopsy of pulmonary nodules smaller than 20mm：results with an automated 20－gange coaxial cutting needle［J］.Clin Radiol，2000，55（4）：281.

［8］張春芳，陸珍鳳，印洪林，等.642例CT引導下經(jīng)皮肺穿刺活檢病理診斷分析［J］.臨床與實驗病理學雜志，2011，27（4）：376.

王緒明，男，博士，江漢大學醫(yī)學院。參考文獻：

2014－08－22）

1007－4287（2015）10－1737－03

廣西自然科學基金資助項目（桂科自0848014）；江漢大學博士科研啟動基金（1010－08110001）

＊通訊作者