王 薇，茹 穎，宋紅梅，連冬梅

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院兒科，北京100730

槐杞黃顆粒對極大量蛋白尿阿霉素腎病大鼠免疫功能影響

王 薇，茹 穎，宋紅梅，連冬梅

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院兒科，北京100730

目的 探討槐杞黃顆粒單獨應(yīng)用或與潑尼松聯(lián)用對阿霉素腎病大鼠細(xì)胞免疫及體液免疫功能的影響以及對蛋白尿的作用。方法 雄性SD大鼠50只，隨機平均分為5組 (n=10)。4組經(jīng)尾靜脈注射鹽酸多柔比星 (6.5 mg/kg)制作腎病模型，另一組注射生理鹽水為正常對照組。2周后造模成功，每日灌胃治療6周。給藥劑量如下:正常對照組 (A組)及腎病生理鹽水組 (B組)給予生理鹽水2 ml;腎病潑尼松組 (C組)給予潑尼松液2 mg/kg;腎病槐杞黃組 (D組)給予槐杞黃顆粒液2 g/kg;腎病槐杞黃潑尼松聯(lián)用組 (E組)給予槐杞黃液2 g/kg及潑尼松液2 mg/kg。比較各組死亡率、體重變化趨勢、24 h尿蛋白增長量，血清IgA、IgG、IgM，以及淋巴細(xì)胞亞群CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD45RA+B細(xì)胞、CD161a+NK細(xì)胞比率的差異。結(jié)果 所有大鼠均成功造模，24 h尿蛋白均值為(0.389±0.273)g/24 h。C、E組死亡率顯著高于A、B組 (P＜0.05)，C、D、E 3組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。正常對照組體重持續(xù)增長，其余4組給藥2周前體重呈增長趨勢，之后呈下降趨勢，4組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。4組腎病大鼠給藥6周后24 h尿蛋白量均增長，增長量分別為 (0.313±0.266)、 (0.404±0.235)、 (0.120±0.628)、 (0.480±0.229)g/24 h，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。5組之間CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD45RA+B細(xì)胞、CD161a+NK細(xì)胞在全血中的比率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。B組的IgA、IgG及IgM顯著高于A組;C組的IgA、IgG及IgM均顯著低于B組;D組IgA顯著低于B組，IgG顯著低于A、B組，IgM顯著高于A、C組;E組IgA、IgG顯著高于A、C、D組，IgM顯著高于A、C組 (P均＜0.05);各指標(biāo)其他兩組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 極嚴(yán)重腎病大鼠體液免疫功能亢進，槐杞黃可發(fā)揮雙向免疫調(diào)節(jié)作用，單用時可下調(diào)亢進的免疫功能，與潑尼松效果相近;與潑尼松聯(lián)用時，可上調(diào)潑尼松對機體的免疫抑制作用，與潑尼松相拮抗。本研究未發(fā)現(xiàn)各種治療對細(xì)胞免疫的影響及對尿蛋白增長量的作用。

槐杞黃;阿霉素腎病大鼠;免疫調(diào)節(jié);潑尼松;藥物拮抗作用

Med J PUMCH，2015，6(5):343－347

腎病綜合征存在體液及細(xì)胞的免疫功能失調(diào)，目前治療主要應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素和/或免疫抑制劑。阿霉素腎病大鼠模型被廣泛應(yīng)用于腎病研究，其病理學(xué)改變類似人類的微小病變腎病或局灶節(jié)段性腎小球硬化?；辫近S顆粒是由槐耳菌質(zhì)、枸杞子、黃精配制而成的中成藥，有抗炎、抗過敏、改善微循環(huán)、去除陳舊組織、增強免疫力、促進組織修復(fù)的作用。本研究將探討槐杞黃顆粒單獨應(yīng)用或聯(lián)合潑尼松治療對阿霉素腎病大鼠細(xì)胞免疫及體液免疫功能的影響以及對蛋白尿的治療作用。

材料和方法

阿霉素腎病大鼠模型造模及分組

一月齡雄性SPF級SD大鼠50只 (統(tǒng)一購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司)，體重約140 g，隨機編號分為5組，每組10只，組別:生理鹽水組 (正常對照組，A組)、腎病生理鹽水組 (腎病自然病程發(fā)展對照組，B組)、腎病潑尼松組 (陽性對照組，C組)、腎病槐杞黃組 (D組)、腎病槐杞黃潑尼松聯(lián)用組 (E組)。適應(yīng)性喂養(yǎng)2周，采用新型尾緣靜脈注射方法造模，目前該技術(shù)方法已獲專利授權(quán) (專利號:ZL 2013 2 0402449.1)。生理鹽水組經(jīng)尾靜脈注射生理鹽水0.5 ml;其余4組經(jīng)尾靜脈注射6.5 mg/kg鹽酸多柔比星 (深圳萬樂藥業(yè)有限公司)造模。注射2周后24 h尿蛋白＞100 mg/24 h，為造模成功。

藥物配制及給藥方法

造模成功1周后，開始給藥。所有藥物均為每日新鮮配制。潑尼松液:將10 mg醋酸潑尼松片 (天津力生制藥股份有限公司)研磨后溶于生理鹽水，使終體積為30 ml，制成0.33 mg/ml混懸液;槐杞黃液:將10 g槐杞黃顆粒 (啟東蓋天力藥業(yè)有限公司)溶于生理鹽水制成0.33 g/ml混懸液;潑尼松+槐杞黃液:將10 mg潑尼松片研磨后及10 g槐杞黃顆粒溶于生理鹽水，終體積為30 ml。各組每日灌胃給藥6周:A、B組給予生理鹽水2 ml;C組給予潑尼松液2 mg/kg;D組給予槐杞黃液2 g/kg;E組給予潑尼松+槐杞黃液6 ml/kg(劑量為槐杞黃2 g/kg、潑尼松2 mg/kg)。

24 h尿蛋白定量

造模前、后及給藥6周后各進行一次24 h尿蛋白定量。動物禁食禁水，置于代謝籠中24 h留尿，以避免食料堵塞代謝籠或飲水稀釋尿液造成的誤差。24 h后量取尿量，應(yīng)用美國貝克曼庫爾特5800全自動生化分析儀雙縮脲法檢測24 h尿蛋白。

流式細(xì)胞術(shù)檢測淋巴細(xì)胞亞群及ELISA法檢測血清IgA、IgG、IgM

給藥6周后，用5 ml/kg水合氯醛腹腔注射麻醉動物，開腹取腹主動脈抗凝血2 ml，促凝血4 ml。新鮮抗凝血用于流式淋巴細(xì)胞檢測，所用流式檢測抗體為BD公司 RAT CD3-APC(貨號 557030)、RAT CD4-PE (554838)、RAT CD8A-FITC(554856)、RAT CD45RAFITC(554883)及CD161A NKR-P1A PE(555009);相對應(yīng)同型對照也均為BD公司生產(chǎn)，貨號分別為550883、553457、550616、551954及550617。按照說明書進行操作，每個樣品有兩管檢測管及兩管同型對照，其中CD3、CD4、CD8置于同一管中檢測T細(xì)胞各亞群比例，CD3、CD45RA、CD161A置于同一管中檢測T細(xì)胞、B細(xì)胞及NK細(xì)胞比例。促凝血3900×g離心分離血清后，分別應(yīng)用大鼠 IgA、IgG、IgM ELISA試劑盒 (北京海誠遠(yuǎn)宏科技有限公司)檢測血清中IgA、IgG及IgM，所有樣品均設(shè)置復(fù)孔，取均值用于統(tǒng)計分析。

統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。應(yīng)用方差分析對計量資料進行各組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義則進行兩兩多重比較，如果方差齊，則選用LSD比較，方差不齊，選用Tamhane比較;對計數(shù)資料選用卡方檢驗。具體如下: (1)應(yīng)用卡方檢驗對各組動物的生存率進行比較。(2)對造模前、造模成功時、給藥1周、2周、3周、4周、5周、6周時各組體重進行趨勢分析，并應(yīng)用多重比較進行組間比較。(3)對給藥6周后較造模成功時各組24 h尿蛋白的增長量進行方差分析，比較各組間是否存在差異，如果存在則應(yīng)用多重比較對各組進行兩兩比較。(4)對各組動物的血清IgA、IgG、IgM及CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD45RA+B細(xì)胞、CD161a+NK細(xì)胞各項指標(biāo)分別進行方差分析判斷是否存在差異，如果存在則應(yīng)用多重比較對各組進行兩兩比較。

結(jié)果

腎病造模結(jié)果

造模的40只大鼠2周后24 h尿蛋白定量均大于100 mg/24 h，24 h尿蛋白定量為 (0.389±0.273) g/24 h、(1.254±0.764)g/(kg·24 h)。造模成功率為100%。

各組存活情況比較結(jié)果

A、B組全部存活，C組死亡3只，D組死亡2只，E組死亡4只。因50%單元格期望計數(shù)＜5，所以應(yīng)用似然比卡方檢驗，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P= 0.022)。兩兩似然比卡方檢驗提示:A、B組分別與C組、E組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)，C、D、E 3組之間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

體重變化趨勢

經(jīng)Tamhane多重比較，B、C、D、E組體重的重復(fù)分析結(jié)果示4組間兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均＞0.05)，A組與其他4組兩兩比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P均=0.000)。經(jīng)趨勢分析，A組體重一直呈上升趨勢，其余4組在給藥2周前體重呈上升趨勢，之后呈下降趨勢 (圖1)。

24 h尿蛋白變化量比較結(jié)果

造模成功、給藥6周時的24 h尿蛋白定量數(shù)據(jù)及尿蛋白的增長量見表1。除A組外，其余4組的尿蛋白均升高。對尿蛋白的增長量進行方差檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P=0.000)。各組兩兩多重比較示:A組與B、C、E 3組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)，與D組差異無統(tǒng)計學(xué)意義;B、C、D、E 4組之間兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

圖1 5組大鼠的體重變化趨勢圖

淋巴細(xì)胞亞群比較結(jié)果

各組T淋巴細(xì)胞亞群 (CD3/4/8)中CD3+、CD3+CD4+及CD3+CD8+細(xì)胞比率及T/B/NK細(xì)胞亞群中CD3+(T)、CD45RA+(B)及CD161a+(NK)細(xì)胞比率見表2。經(jīng)方差分析，5組大鼠淋巴細(xì)胞各亞群比率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (P均＞0.05)。

血清IgA、IgG、IgM比較結(jié)果

方差分析比較大鼠的血清IgA、IgG及IgM，5組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P均=0.000)。Tamhane多重比較結(jié)果示:B組的IgA、IgG及IgM均顯著高于A組;C組的IgA、IgG及IgM均顯著低于B組;D組IgA顯著低于B組，IgG顯著低于A、B組，IgM顯著高于A、C組;E組IgA、IgG顯著高于A、C、D組，IgM顯著高于A、C組 (P均＜0.05);各指標(biāo)其他兩組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (表3)。

表1 5組大鼠24 h尿蛋白變化量 (±s，g/24 h)

表1 5組大鼠24 h尿蛋白變化量 (±s，g/24 h)

與A組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別 造模成功時 給藥6周時 增長量A組0.038±0.022 0.021±0.007 －0.170±0.021 B組 0.244±0.161 0.557±0.372 0.313±0.266*C組 0.370±0.120 0.774±0.208 0.404±0.235*D組 0.551±0.490 0.671±0.257 0.120±0.628 E組 0.361±0.130 0.841±0.185 0.480±0.229＊＊

表2 5組大鼠CD3/4/8 T細(xì)胞及T/B/NK細(xì)胞比率比較 (±s，%)

表2 5組大鼠CD3/4/8 T細(xì)胞及T/B/NK細(xì)胞比率比較 (±s，%)

組別T/B/NK CD3+ CD3+CD4+ CD3+CD8+ CD3+ CD45RA+ CD161a CD3/4/8 + A組 55.49± 8.21 42.14± 6.50 14.01±4.81 55.17± 7.88 21.14± 9.32 20.55±7.42 B組 62.40± 4.04 49.99± 6.32 12.72±3.80 60.77± 3.53 19.43± 7.18 16.57±6.66 C組 60.53± 9.05 41.70±20.27 8.41±4.82 60.26± 8.35 14.95± 5.38 19.53±9.85 D組 59.39±12.77 46.85±10.18 14.31±5.62 59.08±13.93 23.89±10.81 15.61±8.73 E組 57.77± 5.06 47.20± 4.27 11.38±3.43 54.70± 4.26 24.15± 4.20 17.43±7.07 P值0.430 0.166 0.540 0.450 0.484 0.603

表3 5組大鼠血清IgA、IgG、IgM比較 (±s，μg/ml)

表3 5組大鼠血清IgA、IgG、IgM比較 (±s，μg/ml)

與A組比較，*P＜0.05;與B組比較，?P＜0.05;與C組比較，*P＜0.05;與D組比較，§P＜0.05

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討論

常規(guī)的尾緣靜脈注射阿霉素方法可能出現(xiàn)注射針未進入血管推注，多次進針推注造成漏液、劑量不準(zhǔn)，無法判斷進入血管的精確藥量，藥物進入皮下造成鼠尾壞死脫落甚至死亡等情況，造模成功率較低。本研究采用了新技術(shù)進行造模，目前已獲專利授權(quán)。該技術(shù)可確保注射針在大鼠靜脈內(nèi)然后進行藥物推注，對進入大鼠靜脈的藥物進行精確定量，嚴(yán)格按照預(yù)計劑量給藥。經(jīng)新技術(shù)6.5 mg/kg鹽酸阿霉素造模的50只大鼠全部存活，且鼠尾無一脫落，造模成功率100%，24 h尿蛋白定量達(dá)到 (0.389± 0.273)g/24 h、 (1.254±0.764)mg/(kg·24 h)。雖然造模成功率高，但尿蛋白量過大，到研究后期，每日尿蛋白流失量高達(dá)動物體重的1/300，使本研究中的腎病大鼠病情過重，研究終點時死亡率較高，一定程度上影響了藥物療效的觀察。

在極大量蛋白尿的嚴(yán)重腎病情況下A、B組均存活，C、E組死亡率顯著高于A、B組，D組與其余4組均無差異。在研究過程中，給藥治療2周后，C、E組骨質(zhì)疏松明顯，爬行困難，活動減少，牙齒脫落無法進行正常食療，改以軟食。造模的4組大鼠活躍度逐日下降。推測在極其嚴(yán)重腎病情況下，藥物的一些不良反應(yīng)可能加速大鼠死亡。

腎病造模的4組動物在給藥2周前體重呈上升趨勢，之后呈下降趨勢。每日尿蛋白大量流失導(dǎo)致動物體重下降。在極大量蛋白尿的嚴(yán)重腎病基礎(chǔ)上，治療6周后4組動物的尿蛋白均增加，B、C、D、E 4組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，A組顯著低于B、C、E組，但與D組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。說明在這種嚴(yán)重腎病情況下，槐杞黃可能會減少尿蛋白的增長量，但由于存活例數(shù)較少，與未治療的B組相比差異不明顯。Zhu等［1］的研究中，2 mg/kg槐杞黃治療2周可以降低阿霉素腎病大鼠的蛋白尿水平，并且使體重增長。該研究應(yīng)用5 mg/kg阿霉素造模，在給予阿霉素注射第2天即給予槐杞黃治療，其模型對照組造模15 d的尿蛋白水平為 (56.90±17.30)mg/24 h，未達(dá)到100 mg/24 h的腎病水平。該研究動物用藥早，病情輕。其研究結(jié)果說明槐杞黃對阿霉素造成的損傷有保護作用，但因模型未達(dá)到腎病水平，所以不能提示槐杞黃對腎病的治療效果。本研究的局限性在于模型尿蛋白過高，動物病情過重，經(jīng)治療后尿蛋白均未下降，但腎病槐杞黃組的尿蛋白增長量與正常組相近，且有一只大鼠從造模成功時的1.82 g/24 h降到了0.36 g/24 h。進一步研究應(yīng)降低阿霉素注射劑量使尿蛋白水平維持在略高于100 mg/24 h水平，并增加樣本量對尿蛋白變化進行觀察。

未治療的腎病大鼠的IgA、IgG及IgM均顯著高于正常對照，說明阿霉素腎病模型的體液免疫功能亢進，免疫應(yīng)答加強。潑尼松治療可以將升高的IgA、IgG及IgM下調(diào)至正常水平;槐杞黃可以下調(diào)IgA及IgG，治療效果與潑尼松相近，但對IgM的下調(diào)作用不明顯;槐杞黃與潑尼松聯(lián)用與未治療的腎病生理鹽水組無差異，提示在極嚴(yán)重腎病情況下，兩者聯(lián)用對亢進的體液免疫功能沒有明顯的調(diào)低作用。王紫等［2］對IgA腎病模型小鼠應(yīng)用槐杞黃治療4周，血清IgA比模型組顯著降低，但未達(dá)到正常對照組水平，與本研究結(jié)果互相支持。槐杞黃可以上調(diào)反復(fù)呼吸道感染患兒的IgG與IgA［3-4］，反復(fù)呼吸道感染患兒體液免疫功能低下，槐杞黃可起到增強免疫力的作用。結(jié)合本研究結(jié)果，筆者認(rèn)為槐杞黃是一種雙向免疫調(diào)節(jié)劑，在機體體液免疫亢進時可以對體液免疫進行下調(diào);反之，在機體免疫功能低下時，可以對其上調(diào)。

國內(nèi)多個研究在激素治療兒童腎病綜合征的基礎(chǔ)上加用槐杞黃顆粒，發(fā)現(xiàn)與單用激素治療的對照組相比，聯(lián)合用藥組 IgG［5-8］、IgA［5-7］及 IgM［5-6］均顯著升高，CD3、CD4均增高［5-6，8-9］，CD8下降［5-6，9］，NK升高［6］。這些研究認(rèn)為槐杞黃增強了人體的體液及細(xì)胞免疫功能，對治療腎病有益。本研究發(fā)現(xiàn)潑尼松及槐杞黃單獨應(yīng)用時都可將過高的體液免疫水平調(diào)節(jié)至正?；蚪咏?。兩者聯(lián)用時，結(jié)果與上述研究相似但結(jié)論不同:兩藥聯(lián)用IgA、IgG、IgM均顯著高于潑尼松單獨應(yīng)用，但在腎病大鼠中這代表未能將病態(tài)的、過高的體液免疫水平下調(diào)。阿霉素腎病大鼠處于體液免疫亢進的狀態(tài)，單獨應(yīng)用槐杞黃起免疫抑制作用。筆者推測槐杞黃在與潑尼松聯(lián)用時，由于潑尼松屬于免疫抑制劑，將亢進的體液免疫狀態(tài)調(diào)低，此時槐杞黃則發(fā)揮上調(diào)免疫功能的作用，因此表現(xiàn)出與激素拮抗的結(jié)果。結(jié)合槐杞黃與潑尼松聯(lián)用的大鼠死亡率、尿蛋白的增長量，以及對體液免疫的調(diào)節(jié)作用，推測對于極嚴(yán)重的腎病大鼠，槐杞黃與潑尼松聯(lián)用可能出現(xiàn)互相拮抗的作用，需要分時段使用或避免兩者聯(lián)用。本研究的淋巴細(xì)胞亞群分析5組之間未發(fā)現(xiàn)明顯差異，可能是由于各組樣本量過少，需要增加樣本量進一步研究。

綜上所述，在極嚴(yán)重腎病SD大鼠中，槐杞黃單獨應(yīng)用時能將過高的體液免疫水平下調(diào)到正常或接近正常，對IgA及IgG的治療效果與潑尼松無差異;槐杞黃是一種雙向免疫調(diào)節(jié)劑，與潑尼松聯(lián)用可能存在拮抗作用，需要分時段使用或避免聯(lián)用。由于動物病情過重，以及例數(shù)較少，未發(fā)現(xiàn)治療或未治療的腎病大鼠各組間細(xì)胞免疫以及尿蛋白增長量的差異，需要進一步增加樣本量并制備病情較輕的腎病模型進一步研究。

［1］Zhu C，Huang S，Ding G，et al．Protective effects of Huang Qi Huai granules on adriamycin nephrosis in rats［J］．Pediatr Nephrol，2011，26:905-913．

［2］王紫，陳瑜，羅軍，等．槐杞黃干預(yù)小鼠IgA腎病模型的療效觀察以及機制探討［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2011，12:974-978．

［3］張愛啟，付姝麗，紀(jì)玲玲．槐杞黃顆粒對反復(fù)呼吸道感染兒童免疫功能的影響［J］．哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，45:269-271．

［4］郭慧玲．槐杞黃顆粒治療小兒反復(fù)呼吸道感染療效觀察［J］．臨床醫(yī)學(xué)，2011，31:121-122．

［5］曹廣海，劉翠華，云鷹．槐杞黃顆粒對腎病綜合征患兒體液免疫及細(xì)胞免疫的影響［J］．世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，8:585-587．

［6］唐學(xué)兵，趙波，黃高貴，等．槐杞黃顆粒對兒童原發(fā)性腎病綜合征免疫功能的影響 ［J］．云南中醫(yī)中藥雜志，2011，32:29．

［7］王筱雯，欒江威，李弢，等．槐杞黃顆粒對嬰幼兒腎病復(fù)發(fā)的影響及作用機制的臨床研究［J］．湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，13:21-22．

［8］馮仕品，謝敏，王莉，等．槐杞黃顆粒聯(lián)合糖皮質(zhì)激素治療小兒原發(fā)性腎病綜合征的臨床研究 ［J］．四川醫(yī)學(xué)，2011，32:1870-1872．

［9］葉婷婷，王黎萍，田少江，等．槐杞黃顆粒對慢性腎衰竭患者細(xì)胞免疫功能的影響［J］．中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2013，14:254-255．

Effects of Huai Qi Huang Granules on Immune Function of Adriamycin Nephrosis Rats with Massive Proteinuria

WANG Wei，RU Ying，SONG Hong-mei，LIAN Dong-mei

Department of Pediatrics，Peking Union Medical College Hospital，Chinese Academy of Medical Sciences＆Peking Union Medical College，Beijing 100730，China

ObjectiveTo investigate the effects of Huai Qi Huang granules administered alone or combined with predisone on humoral immunity，cellular immunity，and proteinuria of adriamycin nephrosis rats．MethodsA total of 50 SD rats were randomly divided into 5 groups(all n=10)，in which 4 groups were injected with a single dose of 6.5 mg/kg adriamycin into the caudal vein to establish nephrosis model，while the other group was injected with normal saline(NS)as normal control．Two weeks later，the nephrosis rat model was established successfully．The rats were treated by daily intragastric administration for 6 weeks:the normal control group(group A)and the nephrosis+NS group(group B)were treated with 2 ml NS;group C(nephrosis+predisone group)，D(nephrosis+Huai Qi Huang group)，and E(nephrosis+predisone+Huai Qi Huang group)were treated with 2 mg/kg prednisone，2 g/kg Huai Qi Huang granule solution，and 2 mg/kg prednisone plus 2 g/kg Huai Qi Huang granule solution，respectively．The 5 groups were compared in terms of death rate，weight changes trend，24-hour urinary protein increment，serum IgA，IgG and IgM，and percentages of lymphocyte subsets of CD3+T cells，CD3+CD4+T cells，CD3+CD8+T cells，CD45RA+B cells，CD161a+NK cells．ResultsAll nephrosis rats model were successfully made，with 24-hour urinary protein being(0.389± 0.273)g/24 h．The death rates of group C and group E were significantly higher than those of group A and group B(P＜0.05)，while no significant difference was found among group C，group D，and group E．The body weight of group A was sustainably growing;in contrast，the body weight of the other 4 groups grew in the 2 weeks before administration of treatment，but dropped thereafter，with no significant difference among the 4 groups．Six weeks after administration，24-hour urinary protein of the 4 nephrosis groups were all increased，by(0.313± 0.266)，(0.404±0.235)，(0.120±0.628)，and(0.480±0.229)g/24 h，respectively，with no signficant difference in increment．There was no significant difference in the percentages of lymphocyte subsets(CD3+T cells，CD3+CD4+T cells，CD3+CD8+T cells，CD45RA+B cells，CD161a+NK cells)among the 5 groups．IgA，IgG，and IgM were higher in group B than in group A;IgA，IgG，and IgM in group C were lower than in group B;in group D，IgA was lower than in group B，IgG lower than in group A and group B，IgM higher than in group A and group C;and in group E，IgA and IgG were higher than in group A，group C and group D，IgM higher than in group A and group C;the differences were all of statistical significance(all P＜0.05)．In addition，there was no significant difference of IgA，IgG，or IgM in the comparison between every other two groups．ConclusionsHumoral immunity in severe nephrosis rats is hyperfunctional．Huai Qi Huang is a bidirectional immune modulator．It could down-regulate hyperactive humoral immunity when used alone，similar to the effect of prednisone．When combined with prednisone，it could antagonize the immunosuppression effect of prednisone on the body．No regulation effect of different treatments on cellular immunity or proteinuria was found in this study．

Huai Qi Huang;adriamycin nephrosis rats;immunoregulation;prednisone;antagonism effect

SONG Hong-meiTel:010-69156271，E-mail:songhm1021@hotmail．com

R967

A

1674-9081(2015)05-0343-05

10.3969/j.issn.1674-9081.2015.05.006

2014-08-13)

宋紅梅 電話:010-69156271，E-mail:songhm1021@hotmail．com