葉筱燕，戴永江，蒙秉新，王遠(yuǎn)志，梁雄安

(1.海南省人民醫(yī)院皮膚科，?？?570102；2.海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚科，?？?570311)

論著·臨床研究

系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血CXCL9表達(dá)水平及其臨床意義

葉筱燕1，戴永江2△，蒙秉新1，王遠(yuǎn)志1，梁雄安2

(1.海南省人民醫(yī)院皮膚科，?？?570102；2.海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚科，?？?570311)

目的 檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者外周血中CXCL9表達(dá)水平并探討其臨床意義。方法 采用ELISA法檢測20例SLE患者(試驗(yàn)組)和20例健康對照者(對照組)外周血CXCL9表達(dá)水平。比較CXCL9在兩組血清中表達(dá)的差異，分析CXCL9與SLE患者年齡、病程及SLE病情活動(dòng)指數(shù)(SLEDAI)的相關(guān)性。結(jié)果 試驗(yàn)組和對照組外周血CXCL9水平分別為(1 549.14±362.74)pg/L和(602.54±83.70)pg/L。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，試驗(yàn)組外周血CXCL9水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；試驗(yàn)組外周血CXCL9水平與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r=0.892，P<0.01)。結(jié)論 CXCL9可能參與了SLE的發(fā)病過程。

紅斑狼瘡，系統(tǒng)性：趨化因子CXCL9；外周血

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種累及多系統(tǒng)、器官組織的自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，目前尚未完全明確。近年來有關(guān)T淋巴細(xì)胞異常的免疫反應(yīng)對SLE的誘導(dǎo)和維持作用得到了公認(rèn)，其典型表現(xiàn)為自身T細(xì)胞活化，導(dǎo)致血清中出現(xiàn)大量的自身抗體，免疫穩(wěn)態(tài)遭到破壞，提示細(xì)胞因子對自身反應(yīng)性T細(xì)胞的活化、效應(yīng)性細(xì)胞因子的產(chǎn)生在SLE的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起著重要的作用[1-2]。趨化因子9(C-X-C motif 9，CXCL9)屬于趨化因子CXC家族的成員，其對T細(xì)胞及單核細(xì)胞具有誘導(dǎo)和趨化作用，CXCL9與CXCL10、CXCL11等趨化因子有共同的受體CRCX3。已有文獻(xiàn)指出SLE患者外周血單一核細(xì)胞CXCR3 mRNA呈現(xiàn)高表達(dá)，可能參與了SLE的發(fā)病過程[3]，因此推測CXCL9可能與SLE發(fā)病相關(guān)。本研究通過探討SLE患者血清中CXCL9表達(dá)水平及其與SLE疾病活動(dòng)指數(shù)(SLEDAI)的相關(guān)性，為進(jìn)一步探討SLE的發(fā)病機(jī)制提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年10月至2012年9月海南省人民醫(yī)院和海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院就診的20例SLE患者為試驗(yàn)組，年齡16～52歲，平均(29.90±10.24)歲。病程約3個(gè)月至10年，平均(2.91±2.84)年。診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除免疫性疾病、惡性腫瘤、并發(fā)肝腎功能不全、慢性炎癥性疾病患者；排除近1個(gè)月內(nèi)使用過免疫抑制劑或細(xì)胞毒性藥物的患者。抽取同期在本院門診體檢的健康人員20例為對照組，均為女性，年齡25～48歲，平均(34.35±6.65) 歲。實(shí)驗(yàn)組與對照組的年齡具有可比性。所有患者及健康對照者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 血清采集：SLE患者確診后，未給予治療，于次日凌晨8：00空腹抽取靜脈血5 mL，即刻離心收集血清，吸取上清液，液氮-70 ℃冷凍保存，相同方法收集對照組血清。

1.2.2 主要試劑 CXCL9鼠抗人單克隆抗體ELISA檢測試劑盒，購自R&D System。Elx800型酶標(biāo)檢測儀為美國BIO-TEK公司產(chǎn)品。

1.2.3 檢測方法 采用ELISA法檢測血清CXCL9含量，嚴(yán)格按照試劑盒說明書及相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作。

1.2.4 SLEDAI的測量 采用SLEDAI-2000評價(jià)SLE患者病情活動(dòng)度。SLEDAI-2000是由原SLEDAI改進(jìn)而來，主要變化表現(xiàn)在蛋白尿、皮疹、脫發(fā)、黏膜潰瘍4項(xiàng)的定義。SLEDAI-2000不再要求上述病變必須是新發(fā)或復(fù)發(fā)，持續(xù)存在的病變同樣可以計(jì)分，因此可以更好地體現(xiàn)SLE病情活動(dòng)度[4-5]。為保證數(shù)據(jù)的客觀性，本次SLEDAI評分由一名副主任醫(yī)師執(zhí)行。

2 結(jié)果

2.1 SLEDAI評分 SLE患者SLEDAI評分4～16分，平均(7.40±2.84)分。1～4分為穩(wěn)定期，≥5分為活動(dòng)期。根據(jù)評分結(jié)果判定，20例SLE患者中，19例為活動(dòng)期，1例為穩(wěn)定期。

2.2 對照組與試驗(yàn)組外周血中CXCL9水平的比較 對照組的血清CXCL9值為(602.54±83.70)pg/L，試驗(yàn)組為(1 549.14±362.74)pg/L，結(jié)果顯示試驗(yàn)組血清CXCL9表達(dá)水平明顯高于對照組(圖1)。經(jīng)t′檢驗(yàn)，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

圖1 兩組外周血CXCL9水平的比較

2.3 SLE患者外周血CXCL9水平與SLEDAI的相關(guān)分析 采用Spearman等級相關(guān)檢驗(yàn)SLE患者外周血CXCL9水平與SLEDAI評分的相關(guān)性，顯示CXCL9在SLE患者外周血的水平與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r=0.892，P<0.01)，見圖2。

圖2 SLE患者外周血CXCL9水平與SLEDAI的相關(guān)性

2.4 SLE患者外周血CXCL9水平與年齡、病程的相關(guān)性分析 見表1。

表1 SLE患者外周血CXCL9與年齡、病程的相關(guān)性分析

采用Spearman等級相關(guān)分析，結(jié)果顯示，SLE患者外周血CXCL9水平與年齡、病程無相關(guān)性(P>0.05)。

3 討論

SLE是一種以大量自身抗體產(chǎn)生、補(bǔ)體激活及免疫復(fù)合物沉積為特征的自身免疫性疾病，目前病因尚不明確。近年來有研究表明，趨化因子在SLE的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用[6]。趨化因子是由組織或炎性細(xì)胞產(chǎn)生的具有化學(xué)趨化作用的多肽，分為C、CC、CXC、CX3C 4 個(gè)亞族[7]。CXCL9屬于趨化因子CXC 亞家族，CXC趨化因子亞家族根據(jù)第一個(gè)半胱氨酸前是否具ELR(谷氨酸-亮氨酸-精氨酸)功能區(qū)，可分為ELR型和非ELR型趨化因子，大部分的非ELR趨化因子是淋巴細(xì)胞的高效趨化劑[8-9]。CXCL9屬于非ELR型趨化因子，其通過與效應(yīng)細(xì)胞上特異性受體CXCR3的結(jié)合，活化各類白細(xì)胞并趨化至病灶處，在機(jī)體的免疫防御中發(fā)揮作用。目前已證實(shí)，CXCL9在許多疾病中起重要作用，包括外部感染、自體免疫性疾病、移植排斥、腫瘤治療等[10-12]。本試驗(yàn)中，作者觀察到SLE患者外周血中CXCL9的表達(dá)明顯高于健康對照組，提示在SLE發(fā)病過程中，機(jī)體在損傷因子刺激下，大量分泌趨化因子CXCL9，使效應(yīng)性T淋巴細(xì)胞大量定向遷移，從而啟動(dòng)了與自身免疫有關(guān)的病變。同時(shí)，CXCL9在SLE患者外周血中的水平與SLEDAI評分呈顯著正相關(guān)(r=0.892，P<0.01)，也證實(shí)了CXCL9在SLE患者發(fā)病中具有重要作用。

本次試驗(yàn)由于穩(wěn)定期SLE患者例數(shù)較少，因此無法對CXCL9在活動(dòng)期SLE患者和穩(wěn)定期SLE患者外周血中的水平作一比較，有待于在后續(xù)研究中繼續(xù)探討。盡管目前對CXCL9導(dǎo)致SLE的確切發(fā)病機(jī)制尚不明確，但本試驗(yàn)結(jié)果提示CXCL9在SLE的發(fā)病過程中起著關(guān)鍵性作用，有待于更深入透徹的研究。另外，探討CXCL9在SLE中的作用機(jī)制，可能有助于SLE患者的治療。

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Clinical significance of CXCL9 expression in peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus

YeXiaoyan1,DaiYongjiang2△,MengBingxin1,Wangyuanzhi1,LiangXiong′an2

(1.DepartmentofDermatology,HainanPeople′sHospital,Haikou,Hainan570102,China;2.DepartmentofDermatology,theAffiliatedHospitalofHainanMedicalCollege,Haikou,Hainan570311,China)

Objective To investigate the expression and significance of CXCL9 in systemic lupus erythematosus (SLE).Methods The level of CXCL9 in peripheral blood from 20 patients with SLE and 20 normal controls were measured by enzyme linked immunosorbent assay.Compare the difference of the expression level of CXCL9 in peripheral blood between two groups and analyzed their correlation with ages,duration,SLE diseases activity index(SLEDAI).Results The level of CXCL9 in peripheral blood in patients with systemic lupus erythematosus was(1 549.14±362.74)pg/L,but in normal controls was(602.54±83.70)pg/L.The level of CXCL9 in peripheral blood in patients with systemic lupus erythematosus was obviously higher than that in controls by statistical analysis,there was significant difference between the two groups (P<0.01).The expression level of CXCL9 in peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus was positively correlated with SLEDAI (r=0.892,P<0.01).Conclusion CXCL9 may be involved in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus.

lupus erythematosus，systemic;chemokine;CXCL9;peripheral blood

葉筱燕(1965-)，副主任醫(yī)師，主要從事變態(tài)反應(yīng)相關(guān)疾病研究。△

,E-mail：13976909016@163.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2015.05.027

R593.241

A

1671-8348(2015)05-0655-02

2014-10-20

2014-12-10)