李榕，張曉麗，徐晶

(南昌市血站,江西 南昌330025)

新生兒溶血病(HDN)是臨床引起新生兒病理性黃疸主要原因之一，常因母嬰血型不合所導(dǎo)致，多見(jiàn)于ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)，其中，Rh血型系統(tǒng)新生兒溶血病伴隨的臨床癥狀較重，但ABO和RhD以外血型抗體引起的HDN在國(guó)內(nèi)也時(shí)有報(bào)道[1-3]，鮮見(jiàn)非特異性自身抗體引起HDN的報(bào)道。最近，我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)了1例由非特異性自身抗體引起的HDN，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 患兒，男，出生第1天即出現(xiàn)重度溶血；產(chǎn)婦，25歲，無(wú)輸血史，孕產(chǎn)1次。

1.2 儀器和試劑 血型血清學(xué)用離心機(jī) (長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司TD-3A型)，日本久保田離心機(jī)(KA-2200)，水浴恒溫震蕩器(江蘇金壇中大儀器廠 SHA-C)。 血型定型卡(廠家：GRIFOLS)，Rh 血型抗原分型卡(廠家：GRIFOLS)，Coombs 卡(廠家：GRIFOLS)，ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)，篩選細(xì)胞(廠家：BIO-RAD)，譜細(xì)胞(廠家：BIO-RAD)，試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 檢測(cè)方法 血型鑒定，直接抗人球蛋白試驗(yàn)，游離抗體試驗(yàn)，不規(guī)則抗體篩查與鑒定，按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]及GRIFOLS微柱凝膠法說(shuō)明書(shū)操作。用產(chǎn)婦血清，患兒血清及患兒紅細(xì)胞放散液進(jìn)行抗體篩查試驗(yàn)[5]，再利用譜細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定。產(chǎn)婦血清采用倍比稀釋法，以試管中出現(xiàn)凝集強(qiáng)度達(dá)到1+的最后一管稀釋倍數(shù)的倒數(shù)作為本次測(cè)定的抗體效價(jià)。采用ZZAP(二硫蘇糖醇+蛋白水解酶)處理產(chǎn)婦紅細(xì)胞，用處理后直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性紅細(xì)胞進(jìn)行自身吸收3個(gè)循環(huán)，自身吸收后血清做抗體篩查試驗(yàn)[6-8]及抗體鑒定試驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 產(chǎn)婦

2.1.1 血型 O，CcDee。

2.1.2 抗體篩選 產(chǎn)婦血清與Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ篩選細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果 與3個(gè)細(xì)胞都呈陽(yáng)性反應(yīng)2+。紅細(xì)胞自身吸收3個(gè)循環(huán)后，血清抗體篩查試驗(yàn)為陰性。見(jiàn)表1。

表1 抗體篩查試驗(yàn)

2.1.3 放散前直接抗人球蛋白試驗(yàn) 4+。ZZAP處理后，直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果為陰性。見(jiàn)表2。

表2 直接抗人球蛋白試驗(yàn)

2.1.4 抗體鑒定 產(chǎn)婦血清及自身吸收后血清與11個(gè)譜細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.1.5 抗體效價(jià) 用產(chǎn)婦倍比稀釋的血清與標(biāo)準(zhǔn)O細(xì)胞進(jìn)行鹽水及抗人球蛋白試驗(yàn)，效價(jià)分別為4和256。

2.2 患兒

2.2.1 血型 O，CcDee。

2.2.2 抗體篩選 患兒血清及紅細(xì)胞放散液分別與Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ篩選細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果3個(gè)細(xì)胞都呈陽(yáng)性反應(yīng)。見(jiàn)表1。

2.2.3 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 4+。見(jiàn)表2。

2.2.4 患兒血清及紅細(xì)胞放散液抗體鑒定 患兒血清及患兒紅細(xì)胞放散液與11個(gè)譜細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.5 游離試驗(yàn) 患兒血清與A，B細(xì)胞3+，與O細(xì)胞2+。

2.3 父親

2.3.1 血型 O，CcDee。

表3 產(chǎn)婦血清、患兒血清及患兒紅細(xì)胞放散液抗體鑒定結(jié)果

3 討論

新生兒溶血病是由于血型不合引起的同種被動(dòng)免疫性疾病。引起HDN的血型抗體，主要是ABO系統(tǒng)，其次為Rh系統(tǒng)，其他如MNS，Kell，Duffy，Kidd等血型系統(tǒng)不合引起的HDN極為少見(jiàn)。在HDN中，ABO血型系統(tǒng)引起的溶血病約85%，Rh血型系統(tǒng)引起的溶血病約14.6%[9]。血型不合妊娠是引起HDN的主要原因，HDN除ABO系統(tǒng)外很少發(fā)生在第一胎。這是因?yàn)樽匀唤缰谐鼳BO系統(tǒng)外少有與人類(lèi)紅細(xì)胞上血型抗原相同或相似的抗原存在，以至孕婦血清中血型系統(tǒng)抗體很少存在天然抗體或免疫性抗體。只有在輸血、妊娠流產(chǎn)時(shí)刺激母親的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體，以后再妊娠含該抗體的胎兒時(shí)才可能發(fā)生HDN[10，11]，一般都是因?yàn)楦赣H遺傳給胎兒的抗原恰為母親所缺少引起的。胎兒紅細(xì)胞通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入母體可刺激母體產(chǎn)生免疫性抗體，此抗體再通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，使胎兒紅細(xì)胞溶血。而此患兒ABO，Rh血型與父母都相同，排除了ABO-HDN和Rh-HDN發(fā)生的可能性。根據(jù)患兒紅細(xì)胞放散液中抗體與11個(gè)譜細(xì)胞反應(yīng)，凝集強(qiáng)度相同，都為4+；鑒于產(chǎn)婦無(wú)輸血史，采用ZZAP處理紅細(xì)胞后進(jìn)行3個(gè)循環(huán)的自身吸收，產(chǎn)婦紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性，血清抗體篩查試驗(yàn)亦為陰性，表明該抗體為非特異性的自身抗體，未合并同種抗體。由此可見(jiàn)，非特異性抗體也能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，引起新生兒溶血病。該患兒起病急，黃疸迅速加重，出生一天總膽紅素便達(dá)到351μmol/L，說(shuō)明非特異性抗體引起新生兒溶血病也不容忽視，應(yīng)引起大家的高度重視。

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