曹萍，于成功

(1.南京醫(yī)科大學(xué)鼓樓臨床醫(yī)學(xué)院 消化內(nèi)科，江蘇 南京 210000；2.南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 消化內(nèi)科，江蘇 南京 210008)

?

雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對(duì)感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響

曹萍1，于成功2Δ

(1.南京醫(yī)科大學(xué)鼓樓臨床醫(yī)學(xué)院 消化內(nèi)科，江蘇 南京 210000；2.南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 消化內(nèi)科，江蘇 南京 210008)

目的 研究雙歧桿菌三聯(lián)活菌散(小培菲康)對(duì)感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響。方法 選取2010年10月～2014年10月期間收治120例急性腹瀉患者作為研究對(duì)象，選取同一時(shí)期來(lái)進(jìn)行健康查體的30例作為健康對(duì)照組，將患者分為2組：其中小培菲康組60例(小培菲康1 g/次，3次/d)，對(duì)照組60例(常規(guī)治療)。比較患者治療的臨床療效和治療前后腸道菌群和血清炎癥因子的變化。結(jié)果 小培菲康組治療有效率100.00%，對(duì)照組有效率96.67%，2組患者的臨床療效比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.52，P<0.05)。2組患者的腹瀉、嘔吐和發(fā)熱消失時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，2組患者脫水癥狀的消失時(shí)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與健康對(duì)照組相比，治療前小培菲康組和對(duì)照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值較低，腸桿菌計(jì)數(shù)較高(P<0.05)；治療后，小培菲康組和對(duì)照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值均較治療前顯著上升，腸桿菌計(jì)數(shù)顯著下降(P<0.05)，小培菲康組患者腸桿菌、B/E改善較對(duì)照組顯著(P<0.05)。治療前小培菲康組和對(duì)照組患者的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平顯著高于健康對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療后，2組患者治療后的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平顯著下降(P<0.05)，其中小培菲康組下降程度較對(duì)照組顯著(P<0.05)。結(jié)論 雙歧桿菌三聯(lián)活菌散可以通過(guò)調(diào)整腸道菌群和免疫調(diào)節(jié)作用而發(fā)揮作用，促進(jìn)感染性腹瀉患者的恢復(fù)。

感染性腹瀉；雙歧桿菌三聯(lián)活菌散；腸道菌群；炎癥因子

急性感染性腹瀉是常見(jiàn)的消化內(nèi)科疾病，臨床上既往將控制感染、消滅病原體作為重要的治療措施[1]。研究發(fā)現(xiàn)，急性感染性腹瀉患者多存在腸道菌群的紊亂和細(xì)菌內(nèi)毒素吸收，故微生態(tài)制劑在該疾病治療中的應(yīng)用價(jià)值引起了臨床上的重視[2]。本次研究旨在研究雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對(duì)感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年10月～2014年10月期間南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院消化內(nèi)科收治120例急性腹瀉患者作為研究對(duì)象，所有患者均符合《中國(guó)腹瀉病診斷治療方案》[3]中的成人感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)。所有患者均在腹瀉48 h內(nèi)入院，伴有不同程度的腹痛、發(fā)熱、惡心嘔吐等癥狀。根據(jù)就診順序?qū)颊哌M(jìn)行編號(hào)并采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為2組：小培菲康組60例，其中男性39例，女性21例，患者年齡21～49歲，平均(38.6±4.8)歲；對(duì)照組60例，其中男性41例，女性19例，患者年齡20～50歲，平均(39.7±5.5)歲。2組患者的年齡、性別和病情嚴(yán)重程度比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

選取同一時(shí)期來(lái)本院進(jìn)行健康查體的30例作為健康對(duì)照組，其中男性19例，女性11例，年齡22～47歲，平均(38.8±5.1)歲。

1.2 治療方法 2組患者均采取對(duì)癥，根據(jù)病情給予抗炎、降溫、止吐和補(bǔ)液治療，注意維持患者的水電解質(zhì)平衡?；颊咦≡浩陂g嚴(yán)格注意飲食衛(wèi)生，禁止食用生冷、辛辣刺激和油膩食物，保證熱量和蛋白質(zhì)充足。

小培菲康組患者在上述治療的基礎(chǔ)上口服雙歧桿菌三聯(lián)活菌散(上海信誼藥廠，批號(hào)：20100602)，每次1 g，3次/d，飯后溫水沖服。上述治療持續(xù)3 d。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 臨床療效：評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)腹瀉病診斷治療方案》[3]。顯效：治療72 h后糞便性能及次數(shù)恢復(fù)正常，全身癥狀消失；有效:治療72 h糞便性能及次數(shù)明顯好轉(zhuǎn)，全身癥狀明顯好轉(zhuǎn)；無(wú)效：治療72 h后，糞便性能及次數(shù)無(wú)明顯改變或增多，全身癥狀無(wú)明顯改善或加劇?？傆行?(顯效+有效)/總病例數(shù)×100.00%。記錄患者的腹瀉、嘔吐、發(fā)熱及脫水等癥狀的消失時(shí)間。

1.3.2 腸道菌群的變化[4]：患者治療前后均采用收集濕便樣本置于無(wú)菌便盒內(nèi)，保溫后于30 min內(nèi)送檢。腸道菌群檢測(cè)采用活菌平板計(jì)數(shù)法，將雙歧桿菌、乳桿菌培養(yǎng)基置于厭氧罐中,放入?yún)捬醢l(fā)生劑然后封閉, 再放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48～72 h；腸桿菌、腸球菌培養(yǎng)基直接放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h。計(jì)數(shù)并記錄每個(gè)平板上的菌落數(shù)，可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏。應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)。腸道定植抗力(colonization resistance, CR)計(jì)算采用B/E 值,即雙歧桿菌與腸桿菌數(shù)值之比[5]。采用相同方法檢測(cè)健康對(duì)照組患者的腸道菌群。

1.3.3 血清炎癥因子水平的變化：所有患者入院時(shí)和治療3 d后均抽取靜脈血5 mL置于抗凝試管中，離心后分離血清并做好標(biāo)記，于-80 ℃下保存樣本，批量送檢。血清內(nèi)毒素水平檢測(cè)采用光度測(cè)量法，試劑盒由湛江博康海洋生物有限公司(20100807)提供。采用ELISA方法檢測(cè)大鼠的血清IL-6和TNF-α水平，試劑盒由鄭州安塞生物科技有限公司提供(批號(hào)：20101007)。CRP測(cè)量采用免疫增強(qiáng)比濁法，試劑盒由南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司提供(批號(hào)：20100902)。同時(shí)檢測(cè)健康對(duì)照組患者血清炎癥因子水平。上述操作由本院檢驗(yàn)科協(xié)助完成。

2 結(jié)果

2.1 2組患者的臨床療效比較 治療后，小培菲康組47例患者治療顯效，13例患者治療有效，治療有效率100.00%，對(duì)照組34例患者治療有效，24例患者治療顯效，有效率96.67%，2組患者的臨床療效比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.52，P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 2組患者的臨床療效比較 [n(%)]Tab.1 Comparison of clinical efficacy between the two groups [n(%)]

△P<0.05，與對(duì)照組相比，compared with control group after treatment

2.2 癥狀消失時(shí)間 2組患者的腹瀉、嘔吐和發(fā)熱消失時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，脫水癥狀的消失時(shí)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2 2組患者的癥狀消失時(shí)間±s，h)Tab.2 Comparison of symptom disappearance time between two groups ±s，h)

△P<0.05，與對(duì)照組相比，compared with control group after treatment

2.3 各組的腸道菌群比較

治療前與健康對(duì)照組相比，小培菲康組和對(duì)照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值較低，患者腸桿菌計(jì)數(shù)較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后，小培菲康組和對(duì)照組患者的雙歧桿菌、乳桿菌、B/E值均較治療前顯著上升，腸桿菌計(jì)數(shù)顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，小培菲康組患者腸桿菌、B/E改善較對(duì)照組顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表3 各組的腸道菌群比較濕便)Tab.3 Comparison of intestinal flora among different groups ±s，logCFU/g wet excrement)

#P<0.05，與健康對(duì)照組相比，compared with healthy control group；*P<0.05，與治療前相比，compared with before treatment；△P<0.05，治療后與對(duì)照組相比，compared with control group after treatment

2.4 各組血清炎癥因子水平比較 治療前與健康對(duì)照組相比，小培菲康組和對(duì)照組患者的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后，2組患者治療后的內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和CRP水平較治療前顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中小培菲康組下降程度較對(duì)照組顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)， 見(jiàn)表4。

表4 各組血清炎癥因子水平比較±s)Tab.4 Comparison of inflammation factors level among different ±s)

#P<0.05，與健康對(duì)照組相比，compared with healthy control group；*P<0.05，與治療前相比，compared with before treatment；△P<0.05，治療后與對(duì)照組相比，compared with control group after treatment

3 討論

急性感染性腹瀉是由病原微生物感染引起的腹瀉，患者常存在嚴(yán)重的菌群失調(diào)，腸道內(nèi)環(huán)境發(fā)生紊亂，腸道屏障功能下降[6]。本次研究中，旨在研究雙歧桿菌三聯(lián)活菌散對(duì)感染性腹瀉患者腸道菌群和炎癥因子的影響。

研究中，與健康人群相比，感染性腹瀉患者的雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量下降，而腸桿菌數(shù)量上升，患者B/E值下降。B/E值即為雙歧桿菌和腸球菌的比值，可以反映內(nèi)源性厭氧菌對(duì)致病菌的抑制能力，用以反映生物學(xué)屏障功能。B/E值小于1提示腸道的抗感染能力受損。感染性腹瀉的患者腸道B/E值平均值明顯降低，提示患者的腸道生物學(xué)屏障作用受損[7-8]。

研究結(jié)果顯示，感染性腹瀉患者血清中的內(nèi)毒素水平和炎性因子水平明顯上升。C反應(yīng)蛋白是衡量炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo)，作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，它對(duì)感染，損傷等非特異性的炎癥反應(yīng)具有較高的診斷價(jià)值[9]。與健康人相比，感染性腹瀉患者的CRP水平明顯上升，說(shuō)明患者體內(nèi)存在嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。其原因如下：腸道內(nèi)的微生物代謝持續(xù)產(chǎn)生內(nèi)毒素，當(dāng)機(jī)體防御功能下降時(shí)，病原體可以侵入腸道上皮刷狀緣，在細(xì)胞外繁殖產(chǎn)生腸毒素。正常情況下，腸道黏膜的屏障功能可以阻止內(nèi)毒素的吸收，但感染性患者存在腸道菌群紊亂，內(nèi)毒素可以通過(guò)腸道黏膜上皮進(jìn)入血液[10-11]。既往研究顯示，內(nèi)毒素是TNF-α產(chǎn)生的最強(qiáng)誘導(dǎo)因子。由于細(xì)菌、炎癥反應(yīng)和內(nèi)毒素的共同刺激，機(jī)體巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞活化，大量TNF釋放入血。TNF-α在機(jī)體感染性疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用，可以促進(jìn)機(jī)體釋放IL-6、IL-8和血小板活化因子，而后者可以正反饋?zhàn)饔糜趩魏司奘上到y(tǒng)，促進(jìn)TNF的釋放，放大機(jī)體炎癥反應(yīng)[12]。因此，糾正腸道菌群紊亂、清除內(nèi)毒素和控制炎癥反應(yīng)在急性感染性腹瀉的治療中具有重要意義。

本次研究中，經(jīng)過(guò)抗炎、降溫、止吐和補(bǔ)液等治療后，患者的病情明顯好轉(zhuǎn)，治療具有一定的效果。與對(duì)照組相比，小培菲康組患者療效更為明顯，患者治療后的腸桿菌計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-6和CRP下降更為明顯，而B(niǎo)/E值基本恢復(fù)至正常水平。小培菲康內(nèi)含有雙歧桿菌、乳桿菌和腸道糞球菌，上述菌群分口服后分別定植于腸道上、中、下部，改善腸道的屏障功能，從而抑制內(nèi)毒素的吸收并減輕與內(nèi)毒素相關(guān)的腸粘膜損傷[13]。同時(shí)，雙歧桿菌、乳桿菌和腸道糞球菌等益生菌可以激活腸道局部的淋巴組織，增強(qiáng)腹腔內(nèi)的巨噬細(xì)胞活性，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，抑制機(jī)體的炎性反應(yīng)[14]。綜上所述，小培菲康可以通過(guò)調(diào)整腸道菌群和免疫調(diào)節(jié)作用而發(fā)揮作用，改善感染性腹瀉患者的癥狀。

[1] 繆曉輝,冉陸,張文宏,等.成人急性感染性腹瀉診療專(zhuān)家共識(shí)[J].中華傳染病雜志,2013,31(12):705-714.

[2] Qu M, Deng Y, Zhang X, et al.Etiology of acute diarrhea due to enteropathogenic bacteria in Beijing, China[J].J Infect,2012,65(3):214-222.

[3] 方鶴松, 魏承毓. 中國(guó)腹瀉病診斷治療方案[J]. 中國(guó)實(shí)用兒科雜志, 1998, (6):381-384.

[4] 劉慧.非酒精性脂肪性肝病患者腸道菌群變化與胰島素抵抗及血清LPS、TNF-α、IL-6的相關(guān)性研究[D].安徽醫(yī)科大學(xué),2013.

[5] 易安妮,張慧曄,劉賓,等.益生元對(duì)抗生素引起的腸道菌群失調(diào)的作用[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2012,24(4):318-320,323.

[6] 趙敏.感染性腹瀉相關(guān)問(wèn)題研究進(jìn)展[C].2011北京地區(qū)肝病·感染學(xué)術(shù)年會(huì)論文集，2011:7-10.

[7] 朱朝敏,幸琳琳.感染性腹瀉的發(fā)病機(jī)制[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2010,25(19):1456-1457.

[8] 劉勇.感染性腹瀉患者病原菌及藥敏研究[J].中外健康文摘,2013(28):26-27.

[9] 付水,莊國(guó)華,李宏,等.降鈣素原、白介素-6、C反應(yīng)蛋白和白細(xì)胞在感染性腹瀉鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].疾病監(jiān)測(cè),2014,29(5):359-363.

[10] 何梅英,徐光耀,賈秀平,等.枯草桿菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊治療感染性腹瀉及對(duì)患者血清C反應(yīng)蛋白的影響[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2015,21(1):26-28.

[11] 陳超,鄭成中.致病性大腸桿菌胃腸感染小鼠模型血漿Th1、Th2、Th17淋巴細(xì)胞因子變化及意義[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,10(19):37-39.

[12] 張勝安.布拉氏酵母菌對(duì)小兒急性腹瀉的治療作用及對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響[J].中國(guó)生化藥物雜志,2012,33(5):662-664.

[13] 金宏偉.培菲康聯(lián)合藿香正氣軟膠囊治療老年人腸道菌群失調(diào)性腹瀉的療效觀察[J].中國(guó)藥業(yè),2013,22(18):14-15.

[14] 夏麗紅.酪酸梭菌活菌散治療兒童腹瀉的療效及機(jī)制[J].中國(guó)生化藥物雜志,2012,33(2):184-186.

(編校：譚玲)

Effect of triple viable bacterium of bacillus on intestinal microflora and inflammation factors in patients with infectious diarrhea

CAO Ping1, YU Cheng-gong2Δ

(1. Department of Gastroenterology, Drum Tower of Clinical Medicine, Nanjing Medical University, Nanjing 210000, China; 2. Department of Gastroenterology, The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School, Nanjing 210008, China)

ObjectiveTo study effect of triple viable bacterium of bacillus (small peifeikang) on the intestinal microflora and inflammation factors in patients with infectious diarrhea. MethodsFrom October 2010 to October 2014, 120 patients with infectious diarrhea were chosen as study objects, 30 cases of health examination were selected as healthy control group, All patients were divided into 2 groups: 60 patients in small peifeikang group and 60 patients in control group. The therapeutic effect and the change of intestinal microflora and inflammation factors were compared between two groups. ResultsThe effective rate of small peifeikang groupwas 100.00%, while that of control group was 96.67%,the difference had statistical significance(χ2=5.52,P<0.05). The symptom disappearance time of diarrhea, vomiting and fever had statistical difference between two groups (P<0.05), that of dehydration had no statistical significance. After treatment, in small peifeikang group and control group, the number of bifidobacterium, lactobacillus, and B/E value had decreased significantly (P<0.05), and the number of intestinal bacteriahad increased significantly(P<0.05).The distribution of intestinal flora in small peifeikang group was better than that of control group, and the difference had statistical significance(P<0.05).After treatment, in small peifeikang group and control group, the level of endotoxin, IL - 6, TNF-α and CRP had decreased significantly(P<0.05). The extent of decreasing in small peifeikang group was more significant than that of control group, and the difference had statistical significance(P<0.05).ConclusionThe triple viable bacterium of bacillus can promote the recurrence of patients with infectious diarrhea by adjusting the distribution of intestinal microflora, and by its immune regulation function.

infectious diarrhea; triple viable bacterium of bacillus;intestinalmicroflora; inflammation factors

曹萍，女，碩士，研究方向：炎癥性腸病與腸道菌群的關(guān)系，E-mail： caoping0513@163.com；于成功，通訊作者，男，博士，教授，研究方向：炎癥性腸病，E-mail：yuchenggong0110@163.com。

R574

A

1005-1678(2015)06-0062-04