郝慶秀，劉超，金艷，張燕，李曉明，康利平，郭蘭萍

(道地藥材國家重點實驗室培育基地，中國中醫(yī)科學院 中藥資源中心，北京 100700)

·中藥農(nóng)業(yè)·

彝藥滿山香的資源調(diào)查和鑒別研究△

郝慶秀，劉超，金艷，張燕，李曉明，康利平，郭蘭萍*

(道地藥材國家重點實驗室培育基地，中國中醫(yī)科學院 中藥資源中心，北京 100700)

目的：對彝藥滿山香藥材的來源、野生植物資源實地調(diào)查和樣品采集，性狀和薄層鑒別進行研究，以期為滿山香野生藥材資源的合理利用和保護提供參考。方法：本草考證、實地采樣調(diào)查、性狀鑒別和薄層鑒別。結(jié)果：滿山香藥材的來源為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子的根和藤莖。滿山香植物生長在河谷、山坡常綠闊葉林中或陽光充足的山坡石縫中，成簇生長，種群稀少，蘊藏量小；滿山香植物嫩枝葉呈暗紅色，根莖剝?nèi)テげ亢箫@出鮮艷的粉紅色；藥材粉末呈棕黃色或棕綠色。薄層色譜在365 nm波長下有特征的熒光斑點，在與β-谷甾醇和胡蘿卜苷對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯現(xiàn)相同顏色的斑點，用薄層色譜方法可以方便地鑒別滿山香藥材。

滿山香；資源調(diào)查；性狀特征；薄層鑒別；β-谷甾醇；胡蘿卜苷

民族藥作為我國傳統(tǒng)醫(yī)藥的一部分，有確切而獨特療效，尤其是對一些頑癥、重癥、危癥有獨特的效果?！皾M山香”為彝族常用藥材，具有舒筋活血、消腫止痛的功能，用于治療骨折、慢性胃腸炎、風濕性關(guān)節(jié)炎、痛經(jīng)、外傷出血等癥，彝族醫(yī)生常鮮用。目前，云南某制藥廠用滿山香藥材作為原料藥生產(chǎn)的膠囊，用于中風中經(jīng)絡(luò)，瘀血阻絡(luò)證的治療[1]。文獻報道滿山香的果實、根莖、葉都有藥效作用[2]，從其藤莖中分離得到的木脂素類化合物具有廣泛的生物學活性，在體外對腫瘤細胞增殖有明顯的抑制作用，對肺癌、鼻咽癌、胃癌、子宮癌等癌癥有療效[3]，其藤莖的總提取物能抑制體外血清誘導(dǎo)的平滑肌細胞增殖，有防治高血壓、動脈粥樣硬化作用[4-5]。目前滿山香同名異物或異名同物的情況比較普遍，全國各地有多種植物作為滿山香藥材的來源使用，不同專著中記載的滿山香藥材基原不同，例如有木蘭科植物合蕊五味子Schisandra.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith及鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.的干燥根和莖[3][6-9]、杜鵑花科白珠樹屬植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch.) Rehd根和莖[10-12]、蕓香科九里香屬滿山香MurrayapaniculapaL.Jack根[13]、報春花科植物細梗香草LysimachiacapillipiesHemsl的根莖[14]，這些植物藥材有相似的功效，性狀特征不易鑒別。目前，對滿山香藥材的基礎(chǔ)研究比較薄弱，制藥廠藥材主要來源于野生采集的滿山香植物的根和藤莖，而根莖的長期采伐會對滿山香植物自然資源造成不可逆的破壞。本文開展了滿山香藥材的品種考證、資源調(diào)查、鑒別等研究，為滿山香野生資源的保護和利用、保證臨床準確用藥提供參考。

1 來源考證

滿山香(彝族語，軟藤)作為彝藥收載于《云南省藥品標準》[7][15]，來源為木蘭科植物合蕊五味子S.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith及鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.的干燥根和莖?！吨参锩麑崍D考》[16]卷九山草類記載：“滿山香，生南安。黑莖屈盤，葉如椿葉有赭紋，根亦糾曲。俚醫(yī)以治跌打損傷、風氣，煎水洗之?！辈⒏綀D(見圖1)，經(jīng)考證，此種指的是杜鵑花科植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch.) Rehd，又名透骨香、搜山虎。《植物名實圖考》中記載“黃龍?zhí)?，生云南山中，藤巨如臂，紋裂成鱗；細蔓紫色，長葉綠潤；開五瓣團花，中含圓珠，殷紅一色，株老則青?！备鶕?jù)該書中描述和繪圖(見圖1)，考證其原植物與滿山香S.propinqua(Wall.) Baill.相近或一致。歷版的《中華人民共和國藥典》均未收載滿山香?！吨腥A本草》[17]和《中藥大辭典》[18]分別記載有“黃龍?zhí)佟焙汀靶⊙佟?，其中“黃龍?zhí)佟眲e名滿山香，來源為五味子科植物合蕊五味子(KadsurapropinquaWall；SchisalidrapropinquaWall.var.intermediaA.C.Smith)，“小血藤”來源為五味子科五味子屬植物鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.(見圖2)?！恫菽颈惴健穂19]中亦記載有小血藤，來源為木蘭科五味子屬植物鐵箍散S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.；《中國植物志》[6](經(jīng)濟植物手冊)記載滿山香，來源為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua(Wall.)Baill.var.intermediaA.C.Smith及其變種鐵箍散S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.五味子屬植物的分類學訂正研究的報道[20]，從分布區(qū)、葉片形態(tài)、葉緣情況、花被片數(shù)目和雄蕊數(shù)目、花梗長短等方面綜合考察后，把S.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith、S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.等名稱作歸并處理，并定名為S.propinqua。本研究通過查閱本草文獻及相關(guān)的植物學著作、以及查閱中國科學院昆明植物研究所標本館有關(guān)S.propinqua(Wall.)Baill.標本，認為彝藥滿山香的基源植物應(yīng)是木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua，異名有黃龍?zhí)佟⑿⊙?、鐵箍散等。整理有關(guān)滿山香藥材的傳統(tǒng)藥物學信息見表1。

圖1 《植物名實圖考》中繪滿山香(A)、黃龍?zhí)?B)

圖2 《中華本草》中繪黃龍?zhí)?合蕊五味子)(A)、小血藤(鐵箍散)(B)

表1 滿山香藥材的傳統(tǒng)藥物學信息

2 實地調(diào)查和樣品采集

2.1 滿山香的資源與生境特征

滿山香主要分布在云南中部至南部，生于海拔2000～2200 m的河谷、山坡常綠闊葉林中。其變種鐵箍散在陜西、甘肅南部、江西、河南、湖北、湖南、四川、貴州有分布，生于溝谷、巖石山坡林中，海拔500～2000 m[6]。在全國中藥資源普查隊的幫助下，在云南等地進行滿山香野生植物資源調(diào)查及樣品采集，發(fā)現(xiàn)滿山香野生植物成簇生長，種群稀少，居群內(nèi)個體數(shù)量少，資源蘊藏量較小。滿山香生長環(huán)境主要分兩種類型，一是生長在河谷、山坡常綠闊葉林下，在有機質(zhì)含量較高的腐殖土、濕潤肥沃的生境，植物藤莖發(fā)達，無主根，以須根為主；二是生長在山坡石縫中陽光充足的地方，植物枝葉茂盛，主根發(fā)達。

2.2 滿山香植物形態(tài)特征

A嫩枝，B剝?nèi)淦ぬ偾o，C花蕾，D花，E聚合果，F(xiàn)制作的標本圖3 植物滿山香的形態(tài)特征

實地調(diào)查滿山香植物的形態(tài)特征(見圖3)，落葉木質(zhì)藤本，全株無毛，新生枝褐色或暗紅色，有銀白色角質(zhì)層。葉堅紙質(zhì)，卵形、長圓狀卵形或狹長圓狀卵形，先端漸尖，基部鈍或漸尖，具疏離的胼胝質(zhì)齒，近全緣。花橙黃色，單生或2～3朵聚生于葉腋；肉質(zhì)花托近球形，聚合果，種子近球形或橢圓體形，種皮淺灰褐色，光滑，種臍狹長，長約為寬的1/3，稍凹入。花期6～7月。與《中國植物志》[6]記載的木蘭科五味子屬植物合蕊五味子滿山香的描述一致。

另據(jù)實地調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，當?shù)厮庌r(nóng)根據(jù)植物的嫩枝葉呈現(xiàn)的暗紅色(當?shù)厮庌r(nóng)叫“紅尖尖”)特點在山上尋找滿山香，并根據(jù)根和藤莖剝?nèi)テげ亢蟪尸F(xiàn)出鮮艷的粉紅色的特點確定滿山香。另外，滿山香新鮮莖葉嚼后粘液狀。通過收集了該植物的形態(tài)特點、俗稱、藥用部位、療效等信息與表1中文獻描述一致。經(jīng)實地調(diào)查、咨詢當?shù)厮庌r(nóng)、藥商和鄉(xiāng)村醫(yī)生，以及通過鑒別收集的藥材性狀，表明生產(chǎn)中使用的滿山香是木蘭科五味子屬植物合蕊五味子的根和藤莖。

2.3 樣品采集

本次實地調(diào)查共采集10個樣地的滿山香樣品，并制作植物標本11份，標本現(xiàn)保存于中國中醫(yī)科學院中藥資源中心，經(jīng)郭蘭萍研究員考證均為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua。同時，走訪調(diào)查了國內(nèi)幾大藥材市場，如云南昆明菊花藥材市場、安徽亳州藥材市場、河北安國藥材市場、廣州清平藥材市場以及江西樟樹藥材市場，均未見有滿山香藥材出售。采集滿山香樣品的信息見表2。

表2 滿山香樣品信息

3 藥材滿山香的性狀特征

滿山香植物的根及藤莖較難折斷，折斷面呈刺片狀，鮮藥材的藤莖和葉片嚼之粘液質(zhì)較多；根及莖較粗者切斜片，較細者直接切斷，置陰涼通風處晾干。藥材呈長圓柱形、或橢圓形，直徑0.1～3.7 cm不等，表面棕褐色或棕黑色，有縱皺紋及棕黃色皮孔。質(zhì)地硬脆，略輕，皮部與木部易分離，皮部棕褐色，木部黃白色或棕黃色；髓部紅棕色或呈空洞。藥材氣香，味辛涼、澀。粉末呈棕黃色或棕綠色，嚼之發(fā)粘。

4 薄層鑒別

文獻報道[25-27]從滿山香藥材中分離到了五味子丙素、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、香草酸、原兒茶酸和紅景天苷等成分，參考研究報道，購買對照品五味子丙素(批號20130510，純度≥98.0% HPLC)、β-谷甾醇(批號20130506，純度≥98.0% HPLC)、胡蘿卜苷(批號20130409，純度≥98.0% HPLC)、香草酸(批號20130506，純度≥98.0% HPLC)、紅景天苷批號20130412，純度≥98.0% HPLC)、原兒茶酸(批號20130511，純度≥98.0% HPLC)，均由北京北研馨綠生物技術(shù)有限公司提供。取各對照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的對照品溶液，取滿山香對照藥材粉末1 g，加氯仿30 mL，超聲提取30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1 mL使溶解，作為供試品溶液，參照《中華人民共和國藥典》2010版一部附錄ⅪB薄層色譜法)，通過比較不同展開劑展開效果，最終選擇以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(9∶3∶1)為展開劑，于同一硅膠GF254薄層板上點樣，展開，取出，晾干，置于紫外燈(365，254 nm)下檢視，結(jié)果見(圖4)。在365 nm波長下，只顯示滿山香對照藥材樣品的熒光斑點，而無對照品熒光斑點(圖4A)；在254 nm波長下，對照品五味子丙素、香草酸和原兒茶酸有斑點，而對照藥材樣品在相應(yīng)位置似有微弱的斑點，不能肯定是否有此類成分，鑒別專屬性不強；β-谷甾醇，胡蘿卜苷，紅景天苷對照品無斑點(圖4B)。將薄層板噴10%硫酸乙醇液，在105 ℃加熱，致斑點顯現(xiàn)，則對照品β-谷甾醇和胡蘿卜苷可見清晰的斑點，滿山香對照藥材的氯仿提取物和甲醇提取物的色譜中，在β-谷甾醇和胡蘿卜苷相應(yīng)的位置上顯示相同顏色的斑點(圖4C)。

按以上方法，取不同產(chǎn)地的滿山香藥材粉末1 g，制成供試品溶液。吸取供試品溶液和β-谷甾醇、胡蘿卜苷對照品溶液各10 μL，點于同一硅膠GF254薄層板上展開，在365 nm波長下所有供試品都有明顯的熒光斑點，此斑點為滿山香藥材的特征斑點(見圖5A)，在展開后的薄層板上噴以10%硫酸乙醇液，在105 ℃加熱，致斑點顯現(xiàn)，在日光下檢視，在與β-谷甾醇和胡蘿卜苷對照品色譜相應(yīng)的位置上，不同產(chǎn)地滿山香藥材樣品的色譜圖上顯現(xiàn)相同顏色的斑點(見圖5B)；用滿山香對照藥材，可以方便地使用上述薄層方法予以鑒別。

5 討論

野生植物資源是中藥和民族藥制藥產(chǎn)業(yè)重要的材料來源。目前，滿山香藥材來源于野生植物資源，制藥廠以收購藥農(nóng)采集的野生滿山香藥材為主，少數(shù)民族醫(yī)生則四季采集，自采自用。本次調(diào)查的滿山香野生植物成簇生長，一般在坡度70度以上的陡坡或陽光充沛的山坡石峰中，居群稀少，居群內(nèi)個體數(shù)量也很少，野生滿山香植物蘊藏量較小，與文獻[6]報道的滿山香分布較廣但蘊藏量相對較小的描述一致。另外，野生滿山香的生長年限不易斷定。當?shù)厮庌r(nóng)只能根據(jù)其根莖的直徑大小，粗略地估計其生長年限大約在3、5年、或10年、20年不等?！对颇鲜∷幤窐藴省分袧M山香的藥用部位為根及莖，根莖的長期采挖可能導(dǎo)致其資源的破壞，甚至引起地區(qū)性滅絕。因此，建議開展?jié)M山香野生植物的人工馴化，進行引種栽培，以保證滿山香藥材資源的持續(xù)利用。

本研究薄層鑒別圖譜中，可能含有文獻報道[7-9]的五味子丙素、香草酸和原兒茶酸成分，但是含量低，薄層鑒別不明顯；另外，在本研究條件下，圖譜中未發(fā)現(xiàn)紅景天苷對照品的蹤跡，滿山香藥材中是否含有紅景天苷成分，需要改變實驗手段，或利用其它研究途徑予以證實。雖然本研究通過優(yōu)化提取條件和薄層分離條件，建立了滿山香藥材的薄層鑒別方法。但是，β-谷甾醇和胡蘿卜苷在植物中普遍存在，本文建立的鑒別方法難以反映藥材的質(zhì)量。并且，不同產(chǎn)地來源的滿山香藥材，薄層色譜上的差異不明顯。對于不同產(chǎn)地來源的滿山香藥材的鑒別，需要通過改進檢測手段(如：遺傳特征鑒別、特征化學成分鑒別等方法)進一步研究。因此，建議開展?jié)M山香藥材的質(zhì)量標準研究，考察產(chǎn)地、生長年限、采樣季節(jié)等條件對藥材質(zhì)量的影響，建立質(zhì)量標準對藥材的質(zhì)量進行控制。

致謝：感謝第四次全國中藥資源普查隊和昆明制藥集團股份有限公司在實地調(diào)查和樣品采集過程中提供的幫助，感謝昆明制藥集團股份有限公司提供滿山香對照藥材樣品。

[1] 燈銀腦通膠囊.[EB/OL].http://drugs.medlive.cn/drugref/html/1903722.shtml

[2] 劉海濤，齊耀東，許利嘉，等.中國五味子科植物傳統(tǒng)藥物學調(diào)查[J].中國中藥雜志，2012，37(10)：1353-1359.

[3] 張民慶.抗腫瘤中藥的臨床應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1998.

[4] XU L J，Huang F，Chen S B ，et al.A New Triterpene and Dibenzocyclooctadiene Lignans from Schisandra propinqua (WALL.) BAILL[J].Chem.Pharm.Bull.2006，54(4)：542-545.

[5] 黃鋒.鐵箍散藥理活性研究[D].北京：協(xié)和醫(yī)科大學，2005.

[6] 中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學出版社，1996.

[7] 云南省衛(wèi)生局編.云南省藥品標準[S].云南衛(wèi)生局出版，滇Q/WS 489-1974.

[8] 紅河州衛(wèi)生局.紅河中草藥[M/OL].1971.

[9] 云南省玉溪地區(qū)革命委員會衛(wèi)生組.玉溪中草藥[M/OL].1971.

[10] 謝宗萬，鄔家林.天寶本草新編[M].北京：中醫(yī)古籍出版社，2001.

[11] 鄔家林，謝宗萬.分類草藥性新編[M].北京：中醫(yī)古籍出版社，2007.

[12] 徐治國.中藥學[M].成都：四川科學技術(shù)出版社2007.

[13] 潘超美.中草藥原植物鑒別圖冊[M].南寧：廣西科學技術(shù)出版社，2007.

[14] 王浴生.中藥藥理與應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1983.

[15] 李耕冬.彝醫(yī)植物藥[M].成都：四川民族出版社，1992.

[16] (清)吳其浚.植物名實圖考[M].北京：中華書局，1963.

[17] 國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會編.中華本草[M].上海：上?？萍汲霭嫔纾?999.

[18] 南京中醫(yī)藥大學.中藥大辭典[M].上海：上?？茖W技術(shù)出版社，2006.

[19] (清)劉善述.草木便方[M].重慶：重慶出版社：1988.

[20] 林祁.五味子屬植物的分類學訂正[J].植物分類學報，2000，38(6)：532-550.

[21] 潘遠根，謝照明.湖南藥物志(第1卷)[M].長沙：湖南科學技術(shù)出版社，2004.

[22] 趙汝能.甘肅中草藥資源志[M].蘭州：甘肅科學技術(shù)出版社，2004.

[23] 中國科學院四川分院農(nóng)業(yè)生物研究所.四川野生經(jīng)濟植物志：上冊[M].成都：四川人民出版社，1963.

[24] 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編[M].北京：人民衛(wèi)生出版，1975.

[25] 陳業(yè)高，秦國偉，謝毓元.滿山香化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2001，26(10)：694-697.

[26] 吳彤，李燕，孔德云，等.藤香樹莖藤的化學成分[J].中國藥學雜志，2010，45(12)：902-905.

[27] 周英，楊峻山，王立為，等.鐵箍散化學成分的研究I[J].中國藥學雜志，2002，37(4)：260-261.

StudyonResourcesInvestigationandIdentificationofSchisandrapropinqua(Wall.)Baill.

HAOQingxiu，LIUChao，JINYan，ZhangYan，LIXiaoming，KANGLiping，GUOLanping*

(StateKeyLaboratoryBreedingBaseofDao-diHerbs，NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica，ChinaAcademyofChineseMedicalSciences，Beijing100700，China)

Objective：To investigate the wild plant resources and establish identification methods for the herb Manshanxiang，an herb of Yi nationality.Methods：Herbal textual research，field investigation，sample collection and morphological characteristics identification，and TLC identification were applied to the study.Results：The source of herb Manshanxiang is the plant roots and cane ofSchisandrapropinqua(Wall.) Baill.(S.propinqua).The reserve of wild plantS.propinquawas low.S.propinquagenerally grows in clusters under the evergreen broad-leaved valley，or in sunny slopes，or in rock crevices.The shoots were in dark red and the rhizome showing bright pink after stripped epidermis.All samples extracts showed characteristics fluorescence spots at wavelength 365 nm，and showed the same color spot compared with the reference substance ofβ-sitosterol and daucosterol on the corresponding position by TLC.Conclusion：The reserve ofS.propinquawas low.The wild plant ofS.propinquahad its characteristic.Herbal medicine ofS.propinquacan be identified by TLC.

Schisandrapropinqua；resources investigation；characteristics；TLC；β-sitosterol；daucosterol

2015-01-05)

國家科技支撐計劃(2012BAI29B02)；國家自然科學基金重點項目(81130070)；國家中醫(yī)藥管理局行業(yè)科研專項(201107009，201207002)；北京中醫(yī)藥薪火傳承3+3工程項目；中國中醫(yī)科學院“名醫(yī)名家傳承”項目(CM20143001)

*

郭蘭萍，研究員，研究方向：中藥資源生態(tài)研究；Tel：(010)64014411-2830，E-mail：glp01@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.7.013