王會良+潘家宜+何華平+等

摘要：為了探索不同貯藏條件對桃（Amygdalus L.）花粉生活力的影響，以湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院桃種質(zhì)資源圃保存的桃種質(zhì)資源為試材，運(yùn)用SAS 9.1.3對8個品種（系）、3種貯藏條件下花粉活力變化情況進(jìn)行比對分析。結(jié)果表明，不同貯藏條件下不同桃品種（系）的花粉生活力和耐貯藏能力不同?；ǚ凵盍﹄S著貯藏時間的延長而下降，其中，常溫干燥條件下貯藏的花粉萌發(fā)率下降最快，冷藏條件下下降較慢，冷凍條件下保存效果最好，所以桃花粉適宜的貯藏條件為干燥、冷凍環(huán)境。

關(guān)鍵詞：桃（Amygdalus L.）；花粉；生活力；貯藏條件

中圖分類號：S662.1；Q944.42 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）20-5046-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.20.030

Effect of Storage Condition on Pollens Viability of Peach

WANG Hui-liang1，PAN Jia-yi2，HE Hua-ping1，GONG Lin-zhong1，WANG Fu-rong1，LIU Yong1，ZHU Xiao-min1

（1. Institutel of Fruit and Tea， Hubei Academy of Agricultural Science， Wuhan 430209， China；

2. College of Horticulture and Garden， Yangtze University， Jingzhou 434023， Hubei， China）

Abstract： In order to explore the effects of different storage conditions on peach （Amygdalus L.） pollen viability， eight peach cultivars were collected in peach germplasm nursery of Hubei Academy of Agricultural Sciences.The change of pollen viability of the eight peach cultivars under three kinds of storage conditions were compared and analyzed using SAS 9.1.3. The results showed that the pollen viability and storage capability of different cultivars changed with the storage conditions and time in different ways. The longer storage time， the lower pollen viability. The pollen viability under natural conditions decreased very fast， while those under refrigeration conditions （0～4℃） decreased slower； and the storage effect was the best under frozen condition. The studies suggested that dry and frozen was suitable conditions for peach pollens storage.

Key words： peach （Amygdalus L.）； pollen； viability； storage condition

花粉保存時間的長短以及花粉萌發(fā)率的高低對于同一果樹不同品種間授粉樹的搭配以及不同開花期品種間雜交授粉的成功與否具有十分重要的意義。目前針對其他果樹花粉生活力及貯藏方面的研究較多，但在桃（Amygdalus L.）花粉生活力和貯藏方面研究較少。試驗(yàn)選取在湖北省表現(xiàn)較好的8個桃品種或優(yōu)系，通過不同溫度的貯藏處理，然后測定花粉萌發(fā)率，對桃花粉的生活力、花粉貯藏的適宜條件及花粉的耐貯性進(jìn)行了比較，旨在為桃種質(zhì)資源的花粉保存和育種技術(shù)研發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

2012年春在湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹茶葉研究所桃資源圃采集24-30、33-20、47-17、99-5-5、99-8-56、YP36-3、極早518、紫金紅8個桃品種（系）的花粉，采集時間為桃花的大蕾期；將花苞采下后帶回實(shí)驗(yàn)室，手工剝落花粉粒，置于折疊好的紙盒內(nèi)低溫烘干。待花藥開裂散粉后收集裝入指形管中，用脫脂棉封口，分別置于室內(nèi)自然溫度（4月，20～25 ℃，硅膠干燥）、冷藏（4 ℃）及冷凍（-20 ℃）條件下干燥保存。每品種（系）花粉重復(fù)保存3份。定期測定花粉萌發(fā)率，室溫條件下分別在散粉當(dāng)日和貯藏10、20、30、40、80 d后測定；冷藏分別在貯藏20、30、40、80 d后測定；冷凍貯藏分別在貯藏40、80 d后測定。花粉生活力指花粉形成后隨時間進(jìn)程的萌發(fā)能力。

花粉萌發(fā)率的測定采用離體法[1]。培養(yǎng)基中添加10%蔗糖、2%瓊脂和0.1%硼酸，并加水定容，加熱充分溶解混勻，然后將配好的培養(yǎng)基添加到帶凹槽的載玻片上，待培養(yǎng)基冷凝后，用HB鉛筆上的橡皮將花粉均勻撒其上面，然后放入底部墊濕濾紙的培養(yǎng)皿中，于25 ℃條件下培養(yǎng)，4 h后用顯微鏡觀察花粉萌發(fā)情況。3次重復(fù)，每重復(fù)6個視野。應(yīng)用DPS統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理和方差分析，采用SAS 9.1.3軟件進(jìn)行鄧肯氏新復(fù)極差法（（Duncans multiple range test，DMRT）多重比較。endprint

2 結(jié)果與分析

2.1 不同桃品種（系）新鮮花粉萌發(fā)率的差異

散粉當(dāng)日和冷藏條件下測定的花粉萌發(fā)率情況見表1。由表1可以看出，多數(shù)桃品種（系）花粉的萌發(fā)率較高，以極早518品種的萌發(fā)率最高，為69.5%；而紫金紅的萌發(fā)率最低，僅為26.8%；參試品種（系）平均花粉萌發(fā)率為47.9%。分析結(jié)果表明，不同桃品種（系）之間花粉生活力存在極顯著的差異（P<0.01），說明花粉萌發(fā)率在很大程度上取決于品種（系）的遺傳特性。

2.2 不同貯藏條件對桃花粉生活力的影響

2.2.1 相同貯期不同貯藏條件下花粉生活力的比較 貯藏40 d后不同貯藏條件對桃花粉生活力的影響情況見圖1。由圖1可見，在貯期同為40 d時，常溫保存的花粉萌發(fā)率多數(shù)降到30%以下，尤其是33-20和47-17這2個品系更是降到了11.5%和6.5%，是8個參試品種（系）中最低的，并且全部8個參試品種（系）在常溫條件下保存的花粉其平均萌發(fā)率只有21.3%，是3種貯藏方式中花粉平均萌發(fā)率最低的；而冷藏保存的花粉萌發(fā)率下降較少，萌發(fā)率最高的為99-8-56，達(dá)55.6%，8個參試品種（系）的花粉平均萌發(fā)率為42.2%；至于凍藏保存的花粉萌發(fā)率下降則最少，萌發(fā)率最高的是99-8-56，達(dá)85.8%，8個參試品種（系）的花粉平均萌發(fā)率為61.7%，是3種貯藏方式中花粉平均萌發(fā)率最高的。經(jīng)多重比較得知，3種貯藏條件的花粉平均萌發(fā)率兩兩間存在極顯著的差異（P<0.01），即凍藏貯藏的花粉萌發(fā)率極顯著高于冷藏貯藏的花粉，冷藏貯藏的花粉萌發(fā)率又極顯著高于常溫貯藏的花粉。

2.2.2 冷藏和凍藏條件下花粉生活力的比較 分別將冷藏和凍藏40、80 d的花粉測定萌發(fā)率，結(jié)果見圖2。由圖2可見，貯藏40 d時，所有品種（系）在凍藏條件下的萌發(fā)率均高于冷藏條件的萌發(fā)率，并且除了24-30、33-20外，其他品種（系）的凍藏花粉萌發(fā)率與冷藏花粉萌發(fā)率之間均達(dá)到了極顯著差異（P<0.01）。隨著貯藏時間的延長，在貯藏80 d時，除了33-20外，其他品種（系）的凍藏花粉萌發(fā)率均明顯高于冷藏的，平均高出18.6%。總的趨勢是冷藏花粉的生活力下降程度明顯大于凍藏花粉，在80 d時，大部分品種（系）的萌發(fā)率是凍藏高于冷藏。

2.3 常溫條件貯藏后桃花粉生活力的變化

常溫貯藏條件下桃花粉生活力的測定情況見圖3。由圖3可以看出，在常溫條件下，8個品種（系）隨貯藏時間的不同花粉萌發(fā)率存在很大的差異，但總體趨勢是隨貯藏時間延長萌發(fā)率下降，不同品種（系）間下降的速度存在一定的差異。這個變化趨勢出現(xiàn)兩種情況，一種情況是采收當(dāng)天萌發(fā)率最高，隨后逐漸下降，主要是47-17和99-5-5這2個品系，其中47-17在貯藏10～20 d間下降幅度很大，由40%下降到20%以下，99-5-5在整個貯藏期內(nèi)萌發(fā)率則是緩慢下降，直到80 d時還保持一定的萌發(fā)率；另一種情況是采收當(dāng)天萌發(fā)率較高，但貯藏一段時間后萌發(fā)率有一定的上升，隨后逐漸降下來，24-30、33-20、紫金紅等6個品種（系）都是如此，這可能與采收當(dāng)日花器官未發(fā)育完全、而后進(jìn)行了二次發(fā)育有關(guān)。總的來說，經(jīng)過80 d的常溫貯藏，所有品種（系）的萌發(fā)率都降到了較低的水平，表明大多數(shù)品種的花粉在常溫干燥條件下貯藏時間較短，80 d后都降到了20%以下，尤其是47-17和紫金紅，更是降到了4.2%和7.6%。

2.4 冷藏條件貯藏后桃花粉生活力的變化

冷溫貯藏條件下桃花粉生活力的測定情況見圖4。由圖4可以看出，在冷藏條件下，桃花粉萌發(fā)率隨貯藏時間延長總體上呈下降趨勢，但下降速度比室溫貯藏要緩慢得多，花粉萌發(fā)率的變化趨勢也是出現(xiàn)兩種情況，一種情況是花粉生活力一直呈下降趨勢，如33-20、47-17、99-5-5、99-8-56等品系，并且下降趨勢都較為緩慢；另一種情況在冷藏的前一階段花粉生活力呈上升趨勢，到30 d左右時達(dá)到最高峰，隨后下降，如24-30、YP36-3、極早518、紫金紅等品種（系），其中，24-30的下降幅度最大，其他的下降趨勢都較為平緩。相比室溫貯藏，低溫冷藏條件下花粉生活力保持較好，貯藏80 d左右萌發(fā)率仍較高，大都保持在20%以上，有的甚至保持在40%以上，如99-8-56、YP36-3、極早518等。

2.5 凍藏條件貯藏后桃花粉生活力的變化

冷凍貯藏條件下桃花粉生活力的測定情況見圖5。由圖5可見，隨著凍藏時間的延長，除了33-20，其他桃品種（系）花粉的萌發(fā)率下降均極為緩慢。在貯藏80 d后，幾乎所有品種（系）都保持了高萌發(fā)率，除33-20、47-17未到30%外，其他的萌發(fā)率均達(dá)到了40%以上，其中99-8-56、YP36-3更是高達(dá)78.5%和72.9%。凍藏40 d后，所有桃品種（系）的平均萌發(fā)率高達(dá)61.7%；80 d后，平均萌發(fā)率也保持在52.7%。由此可見，不同桃品種（系）花粉的耐貯性不同，冷凍貯藏能較好的保持多數(shù)品種（系）的花粉生活力。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同桃品種（系）的花粉生活力不同，并且其耐貯藏能力也有差異，不同品種（系）間花粉生活力及耐貯性不同，這是由遺傳特性、遺傳基因基礎(chǔ)不同所決定的。這個結(jié)果與前人在其他植物上的研究結(jié)果是一致的[2，3]。

花粉生活力除受自身遺傳因素影響外，也受到外界環(huán)境條件的影響[4，5]。試驗(yàn)結(jié)果表明，同一桃品種（系）在不同貯藏條件下，花粉生活力的變化差異很大，多數(shù)品種在冷藏條件下生活力下降較慢，并以凍藏的花粉生活力下降最慢。綜合兩種低溫貯藏條件下花粉的萌發(fā)情況，則在凍藏條件下長期保存花粉更為有效。至于更低溫度條件如液氮（-196 ℃）貯藏對桃各品種花粉生活力的影響有待今后繼續(xù)研究。

參考文獻(xiàn)：

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