朱冬春，孫旭群

(1.安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，安徽合肥 230032;2.安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科，安徽合肥 230022)

鬼針草，又名婆婆針，為菊科一年生植物鬼針草(Bidens bipinnata L)的干燥全草。始載于唐代陳藏器《本草拾遺》并被列為上品，其性味苦，甘淡、微寒。具有解熱、止瀉、解毒和活血散瘀等功效。我國大部分地區(qū)均有分布。藥理研究發(fā)現(xiàn)其活性成分通過不同信號通路，在降壓、降血糖、抗氧化、抗腫瘤、抗炎等方面有較好的應(yīng)用價值［1-2］，近年發(fā)現(xiàn)對多種原因?qū)е碌母卫w維化、高脂血癥等具有良好的治療作用［3］。陳飛虎團隊［4］對其有效部位進行篩選，發(fā)現(xiàn)鬼針草總黃酮(total flavones of bidens bipinnata L，TFB)為其有效部位，并對鬼針草中黃酮類活性成分的提取、制劑等進行了系列研究，具有良好的臨床應(yīng)用前景。但TFB的體內(nèi)過程研究鮮有報道，筆者對TFB總體給藥以及其中各化學(xué)成分單獨給藥等條件下的藥動學(xué)資料進行整理，為TFB給藥的藥代動力學(xué)研究提供參考，有助于深入研究藥物作用，進一步明確活性成分的物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 鬼針草中黃酮類的化學(xué)成分

鬼針草活性成分的研究較早，主要集中于黃酮類物質(zhì)。由于中藥成分的復(fù)雜，提取分離以及檢測分析條件等因素的影響，對化學(xué)成分的研究結(jié)論不盡相同。胡偉等［5］以總黃酮含量不少于5.00 mg·g-1，金絲桃苷含量不少于 0.03 mg·g-1為指標，建立鬼針草藥材質(zhì)量標準，活性成分的結(jié)構(gòu)確證多通過高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用進行，而金絲桃苷、異槲皮苷等單體的研究可通過高效液相色譜法完成［6］，吳婷妮等［7］采用 HPCE 方法，從鬼針草的乙醇提取物中，同時測得槲皮素等10種酚類物質(zhì)，結(jié)合早期研究，多以槲皮素、金絲桃苷、異槲皮苷等成分為鬼針草總黃酮中的主要活性物質(zhì)。目前研究發(fā)現(xiàn)的總黃酮化學(xué)成分見表1。

表1 鬼針草中黃酮類的化學(xué)成分

2 藥代動力學(xué)研究

藥代動力學(xué)研究關(guān)注藥物的體內(nèi)過程，有利于更好的闡明藥物作用機制，形成全面的系統(tǒng)研究［8］。目前關(guān)于TFB整體給藥的藥動學(xué)研究資料缺乏，但其中的主要化學(xué)成分，如金絲桃苷、槲皮素、異槲皮苷、蘆丁等成分單體的藥動學(xué)研究，個別成分在其他制劑中的藥動學(xué)研究，以及化學(xué)成分之間相互作用的資料逐漸增多，對TFB的體內(nèi)過程研究有著參考價值。

2.1 藥物的吸收 受動物體內(nèi)胃腸道菌群的影響以及腸壁水解酶的作用，黃酮苷類容易水解生成對應(yīng)的苷元。苷和苷元在體內(nèi)的吸收存在很大的差異。在TFB整體給藥的吸收研究中，以金絲桃苷為主要成分，研究TFB在不同腸段、不同TFB濃度及加入P-gp抑制劑后的腸吸收情況，發(fā)現(xiàn)在大鼠各腸段均有吸收，為被動擴散;且不受P-gp抑制劑影響。

研究表明，大鼠灌胃給予槲皮素、異槲皮苷和蘆丁后，苷元槲皮素在胃腸道迅速吸收，而蘆丁和異槲皮苷在胃中沒有水解成苷元也沒有被吸收。TFB口服給藥后在小腸中主要是以苷元形式吸收，吸收入血后主要以槲皮素的糖苷結(jié)合物形式存在。Caco-2單層細胞模型研究槲皮素、槲皮苷的吸收情況，結(jié)果槲皮素能夠迅速由細胞單層膜的頂側(cè)轉(zhuǎn)運至基底側(cè)，以游離槲皮素和槲皮素葡萄糖醛酸的存在形式為主，且結(jié)合苷的濃度隨著時間的增長而增長。相比與槲皮素，糖苷均不易透過細胞單層膜。且黃酮苷的吸收和苷元所連接的糖基的水解特性相關(guān)。

鬼針草總黃酮中部分活性成分如金絲桃苷、槲皮素等，在其他植物的黃酮提取物給藥后體內(nèi)過程有見報道。如張穎等［9］在研究銀杏葉黃酮成分及藥代動力學(xué)特征時，發(fā)現(xiàn)包括槲皮素在內(nèi)的多種黃酮類成分有二次達峰現(xiàn)象，王大力等［10］研究在Beagle犬體內(nèi)銀杏黃酮的藥動學(xué)特點時同樣證實類似結(jié)論，給藥后發(fā)現(xiàn)槲皮素約2/3在灌流過程中吸收進入腸壁，但同時又有52%的以葡萄糖醛酸苷或硫酸苷結(jié)合物的形式，重新分泌入腸，從而出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象。

朱紅崗等［11］考察灌胃后大鼠體內(nèi)槲皮素的血藥濃度及藥代動力學(xué)特點，按AIC(Akaike’s Information Criterion)最小原則，結(jié)合相關(guān)指數(shù)等指標選擇房室模型，擬合的口服給藥藥時曲線符合一室模型。

艾國等［12］研究金絲桃苷單體藥動學(xué)特點時，在灌胃給藥和靜脈給藥后的藥物吸收分別符合一室模型和二室模型。

鬼針草中黃酮類各成分在吸收過程中的相互作用未見系統(tǒng)研究，但中藥有效成分組給藥時，成分間可能通過腸道CYP450酶、P-gp轉(zhuǎn)運體等機制，在吸收過程中產(chǎn)生相互作用［13］。

2.2 藥物的分布 艾國等［12］使用HPLC法考察大鼠金絲桃苷灌胃給藥后0.5、3、6 h時各組織臟器中金絲桃苷的濃度，發(fā)現(xiàn)臟器中藥物的含量依次是胃、腸、腎、肝、肌肉、肺、心、腦、子宮、脾、睪丸、脂肪。由于進入體內(nèi)的金絲桃苷絕大部分是以水解成苷元槲皮素的方式吸收，該研究采用β-葡萄糖苷酸酶酶解生物樣品，測定金絲桃苷苷元槲皮素的濃度，再換算成金絲桃苷濃度的研究方法，該結(jié)果揭示了槲皮素各種代謝產(chǎn)物，在臟器的分布情況，該結(jié)論對包括TFB在內(nèi)，含槲皮素及其苷類衍生物的黃酮類分布方式研究，均有較大參考價值。

2.3 藥物的代謝 黃酮類化合物主要在肝臟和消化道發(fā)生代謝。Ho等［8］研究證實大鼠灌胃后，黃酮苷多在胃腸道內(nèi)水解，進入體內(nèi)代謝為葡萄糖醛酸結(jié)合物，而槲皮素在體內(nèi)發(fā)生Ⅱ相代謝反應(yīng)形成槲皮素3-O葡萄糖苷;靜脈給藥主要在肝臟發(fā)生生物轉(zhuǎn)化。另有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠靜注金絲桃苷后，不同劑量下藥物的半衰期t1/2不盡相同，濃度—時間曲線下面積(AUC)與劑量呈非線性關(guān)系，其消除可呈現(xiàn)非線性動力學(xué)特征。邢萌萌等［14］利用UPLC/Q-TOF檢測槲皮素代謝產(chǎn)物在大鼠血漿及組織中分布，證實槲皮素在血液中主要以其葡萄糖醛酸、硫酸酯結(jié)合物的形式存在，約占全部代謝物的64.23%，另一部分約35.77%以脂肪酸結(jié)合物的形式存在。

對酶的誘導(dǎo)抑制研究中，考察對大鼠肝微粒體代謝的影響，發(fā)現(xiàn)槲皮素可抑制CYP2E1、CYP3A4活性，誘導(dǎo)CYP1A2的活性，但研究槲皮素與蘆丁對環(huán)孢素生物利用度影響時，槲皮素誘導(dǎo)了P-gp轉(zhuǎn)運體與CYP3A4的活性，可能由于槲皮素的葡萄糖醛酸、硫酸鹽等結(jié)合物的作用，提示總黃酮與肝藥酶的作用可能更為復(fù)雜［15］。另有文獻報道，槲皮素對肝藥酶的影響有限，常規(guī)劑量下在人類志愿者體內(nèi)并不影響其他藥物的代謝［16］。提示體內(nèi)過程與體外過程、動物試驗結(jié)果與人類試驗可能存在較大的差異。

2.4 藥物的排泄 研究發(fā)現(xiàn)大鼠金絲桃苷灌胃后，在尿、糞或膽汁72 h內(nèi)累計排泄的金絲桃苷原形或苷元總量，約占總給藥量的3%［12］，其中由尿排出量約占給藥劑量的 0.71%，糞排泄量占2.04%，給藥后24 h內(nèi)，膽汁累計排出量約占給藥劑量的1.56%。Xue等［17］研究發(fā)現(xiàn)靜注金絲桃苷后，大鼠尿液和膽汁中檢測出金絲桃苷的原型、槲皮素單葡萄糖醛酸結(jié)合物、金絲桃苷的硫酸化結(jié)合產(chǎn)物、金絲桃苷的甲基化葡萄糖醛酸代謝物、金絲桃苷的硫酸化葡萄糖醛酸結(jié)合產(chǎn)物、金絲桃苷的甲基化硫酸結(jié)合產(chǎn)物等。

在中藥藥動學(xué)研究中，近幾年發(fā)展起來的藥物PK-PD模型逐漸被接受，以藥代動力學(xué)研究為基礎(chǔ)，發(fā)展起來的評估藥物的體內(nèi)吸收代謝過程的模型。假想的效應(yīng)室并與血漿室(中央室)相聯(lián)系，并結(jié)合傳統(tǒng)的藥效學(xué)，組合出一種新的藥動學(xué)/藥效學(xué)結(jié)合模型，在中藥研究領(lǐng)域逐漸應(yīng)用。由于中藥成分復(fù)雜，目前鬼針草的藥動學(xué)研究仍局限于其中少數(shù)化學(xué)成分。相關(guān)研究許多方面仍存在較多困難，在檢測方法上需要進一步優(yōu)化檢測條件提高靈敏度，采用多方法、多指標的研究相結(jié)合，使結(jié)果更加準確;在活性成分代謝產(chǎn)物方面，代謝物的結(jié)構(gòu)、代謝途徑及藥理作用，亟待深入研究。目前鬼針草中化學(xué)成分的體內(nèi)過程研究，多停留在動物實驗水平，開展的高通量篩選或有助于加強中藥相互作用預(yù)測的研究，減少藥動學(xué)相互作用帶來的藥物不良反應(yīng)。中藥“多組分，多靶點”的特點，需要建立合適的PK-PD模型，形成全面的研究體系，對研究鬼針草活性成分的體內(nèi)過程，以及進一步開發(fā)新的藥物制劑有著重要的指導(dǎo)意義。

3 小結(jié)與展望

綜上所述，鬼針草中黃酮類成分的體內(nèi)過程研究仍處于探索階段，化學(xué)成分復(fù)雜，且不同提取方式所得研究結(jié)果間有差異。藥代動力學(xué)研究主要針對部分單體成分，且不同實驗對象、不同給藥途徑等均會影響活性成分在體內(nèi)的藥動學(xué)行為?；钚猿煞值捏w內(nèi)過程研究，是設(shè)計及優(yōu)化給藥方案、合理用藥的理論依據(jù)。值得注意的是，不同藥物之間發(fā)生的相互作用，可能會對藥代動力學(xué)過程產(chǎn)生影響，這已引起國內(nèi)外藥品管理部門的關(guān)注，2012年美國食品藥品管理局(FDA)和歐洲藥品管理局(EMA)先后更新了藥物相互作用研究指南，用以指導(dǎo)相關(guān)研究［18-19］;我國國家食品藥品監(jiān)督管理總局在2014年5月發(fā)布的《藥物非臨床藥代動力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中，也以較多篇幅對藥物相互作用研究進行引導(dǎo)和規(guī)范。由于中藥往往以多種成分同時給藥發(fā)揮作用，中藥的藥動學(xué)研究需要注意活性成分之間的藥物相互作用。

隨著中藥成分分析技術(shù)的發(fā)展，以及對種屬差異、藥物代謝酶、藥物代謝基因多態(tài)性等認識的不斷增加，為中藥藥物相互作用的研究提供了良好的契機［20］。中藥復(fù)雜組分的體內(nèi)過程研究，既是促進藥物的臨床合理應(yīng)用，也是促進中藥發(fā)展的現(xiàn)代化、國際化，研究任重道遠。

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