盧 軍，孫泉云，夏爐明，趙洪進(jìn)，王曲直，王根龍，劉佩紅

（1.上海市動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201103；2.上海市浦東新區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201103）

一起檢疫陽性奶牛結(jié)核病的緊急流行病學(xué)調(diào)查

盧 軍1，孫泉云1，夏爐明1，趙洪進(jìn)1，王曲直1，王根龍2，劉佩紅1

（1.上海市動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201103；2.上海市浦東新區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201103）

2014年12月，上海市某奶牛場部分奶牛結(jié)核病檢疫陽性。為查明疫病發(fā)生情況，評估病原傳入和傳出相關(guān)風(fēng)險，采用現(xiàn)場緊急流調(diào)的方式對該奶牛場進(jìn)行了奶牛結(jié)核病的暴發(fā)調(diào)查。結(jié)果共有2只奶牛符合本調(diào)查的牛結(jié)核陽性病例定義。本次暴發(fā)可能來源于奶牛場原有的漏檢動物，或近期引進(jìn)未經(jīng)檢疫的奶牛。定性風(fēng)險分析表明，該奶牛場通過易感動物和車輛器具傳入和傳出疫病的風(fēng)險高，通過糞污和本場動物間傳播的風(fēng)險高。

上海；奶牛；結(jié)核?。痪o急；調(diào)查；流行病學(xué)

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種人畜共患的慢性傳染病，我國將其列為二類動物疫病。本病可侵害多種動物，家畜中奶牛最易感染。結(jié)核分枝桿菌可通過空氣、飼料和飲水等經(jīng)呼吸道、消化道等途徑傳播。其臨床特征是病程緩慢、漸進(jìn)性消瘦、咳嗽、衰竭，剖檢病變可見多組織器官結(jié)核結(jié)節(jié)等。但目前在臨床中觀察到典型癥狀或病變的奶牛極少，多數(shù)陽性病例發(fā)現(xiàn)于奶牛的“結(jié)核病和布魯氏菌病”（以下簡稱兩?。z疫。多年來，上海市對轄區(qū)內(nèi)所有奶牛實(shí)施每年兩次全群“兩病”檢疫，對發(fā)現(xiàn)的陽性牛只采取堅(jiān)決撲殺的政策。2014年12月15日，上海市浦東新區(qū)動物疫控中心報(bào)告，該區(qū)某規(guī)模奶牛場部分奶牛結(jié)核病檢疫陽性，所有陽性和可疑牛只已隔離并復(fù)檢，于18日讀取復(fù)檢結(jié)果。為掌握疫情發(fā)生情況，評估相關(guān)暴露風(fēng)險因素，12月18日對該奶牛場進(jìn)行了緊急流行病學(xué)調(diào)查。

1 材料和方法

1.1 病例定義

1.1.1 牛結(jié)核可疑牛。2014年12月12日—18日，對該奶牛場所有牛只，參照國家標(biāo)準(zhǔn)《動物結(jié)核病診斷技術(shù)（GB/T18645-2002）》，采用單純皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（SICT）進(jìn)行檢疫，注射劑量為

2000國際單位（IU）牛型PPD，計(jì)算注射前和注射后72小時測量注射前后的皮厚差，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)判斷為結(jié)核陽性的牛只[1]。

1.1.2 牛結(jié)核陽性牛。2014年12月12日—18日，在該場第一次檢測結(jié)果為結(jié)核可疑的牛只中，參照國家標(biāo)準(zhǔn)《動物結(jié)核病診斷技術(shù)（GB/T18645-2002）》采用比較皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（SICCT）進(jìn)行檢疫，在牛只左側(cè)頸部注射為2000國際單位（IU）牛型PPD，右側(cè)頸部注射2500國際單位（IU）禽型PPD，72小時后比較注射前后的皮厚差，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)判斷為牛型結(jié)核陽性的牛只[1]。

1.2 現(xiàn)場調(diào)查

根據(jù)病例定義進(jìn)行病例搜索，通過問卷調(diào)查、現(xiàn)場勘查和資料檢索等方式，了解該場的飼養(yǎng)情況、發(fā)病頻數(shù)、疫情分布、流行病學(xué)史以及臨床癥狀等信息，描述疫病的分布及該場布局，分析疫病相關(guān)風(fēng)險。

1.3 檢方法和試劑

第一次檢測（SICT）：對1 800只奶牛全群進(jìn)行SICT試驗(yàn)，PPD試劑來自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，批號201008；第二次檢測（SICCT）：對第一次檢測發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核可疑牛只，采用國產(chǎn)牛型PPD試劑（同第一次檢疫）和禽型PPD試劑進(jìn)行SICCT試驗(yàn)，禽性PPD試劑購自荷蘭Prionics Lelystad BV，批號141678。

2 結(jié)果

2.1 大體情況

此奶牛場建場超過30年，2010年進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化改造，目前存欄奶牛1 800頭，其中成乳牛1 100頭。該場地理?xiàng)l件較為優(yōu)越，地理坐標(biāo)為N30°57′46.74″，E121°54′11.87″。周圍3 000 m范圍內(nèi)無其他養(yǎng)殖場，500 m范圍內(nèi)無居民，距離場北、場南主干道分別有350 m和650 m，距離場西的公路約60 m，場東為一條大河。場內(nèi)布局中，1#、3#、4#、5#、6#和7#棚養(yǎng)殖成乳牛，8#棚養(yǎng)殖斷奶牛，2#棚為產(chǎn)房，9～12#棚養(yǎng)殖后備牛。牛場地理分布和布局見圖1、圖2。

2.2 病例搜索

根據(jù)病例定義進(jìn)行病例搜索和追溯，本次暴發(fā)中，第一次檢測（SICT）中發(fā)現(xiàn)的牛結(jié)核可疑牛為26只；第二次檢測（SICCT）確認(rèn)的牛結(jié)核陽

性牛為2只。

圖1 奶牛場地理分布圖 圖2 內(nèi)部布局圖

表1 相關(guān)風(fēng)險因素分析

2.3 病例分布

2014年12月12日進(jìn)行了奶牛結(jié)核全群普檢。12月15日發(fā)現(xiàn)有26頭奶牛為牛型PPD陽性，除1頭成乳牛外，其余均為后備牛，養(yǎng)殖于9#、10#、11#和12#棚。當(dāng)日將所有陽性牛隔離到11#棚東側(cè)，用雨布將普檢陽性群與陰性群簡單隔離，再對這26頭奶牛進(jìn)行SICCT試驗(yàn)復(fù)檢，12月18日觀察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)來自12#棚的2頭奶牛為結(jié)核陽性。

2.3.1 空間分布。2只陽性牛均來自12#棚，是整場最接近生產(chǎn)區(qū)大門的棚舍；普檢結(jié)果中，所有可疑牛中除1只為成乳牛，其余均來自9～12#后備牛棚，這幾個棚的南邊和西邊均包圍著堆積肥區(qū)。生產(chǎn)區(qū)大門的消毒池寬度小于3 m，且平時未注入消毒液。

2.3.2 種間分布。陽性和可疑牛均為1～2歲的青年后備牛。

2.4 襲擊率

本次暴發(fā)的襲擊率為：2/1800×100%=0.1%。

3 可能風(fēng)險因素定性分析

根據(jù)調(diào)查資料和現(xiàn)場勘查結(jié)果，尋找奶牛結(jié)核相關(guān)風(fēng)險因素，進(jìn)行定性風(fēng)險評估。結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過本場動物和糞污在場內(nèi)傳播的風(fēng)險高，通過引入動物和車輛器具傳入本場的風(fēng)險高（風(fēng)險因素分析詳見表1）。

4 分析與結(jié)論

根據(jù)現(xiàn)場緊急流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，綜合判斷該場發(fā)生奶牛結(jié)核病疫情，共發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核陽性牛2只[1]。

4.1 該場結(jié)核疫情場內(nèi)傳播和流行的風(fēng)險高

布局方面，該場生產(chǎn)區(qū)內(nèi)堆積的糞污是該場奶牛結(jié)核持續(xù)存在的污染源[2]；管理方面，該場陽性牛隔離不完全，且清理陽性牛后，對同一欄位、同一欄舍乃至整場的消毒隔離措施不徹底不嚴(yán)格[3]；最重要的是本場在歷年的檢測中，數(shù)次檢測到結(jié)核陽性牛只，而結(jié)核桿菌可能在牛只和其他多種動物中長期存在。這些都是結(jié)核場內(nèi)持續(xù)傳播流行的高風(fēng)險因素[4]。

4.2 該場結(jié)核疫情傳入和傳出的風(fēng)險高

禁止從疫區(qū)或疫點(diǎn)引入風(fēng)險動物應(yīng)是一項(xiàng)基本原則，該場從結(jié)核陽性場引進(jìn)奶牛是疫病傳入的高風(fēng)險因素；該場大門處的消毒池僅長4米，運(yùn)輸飼料、糞污等車輛的車輪周長一般達(dá)到或超過4米，消毒池起不到應(yīng)有的效果，而進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)的大門消毒池長不過3米，且日常不注入消毒液，沒有發(fā)揮消毒滅原的作用。這些因素造成結(jié)核和其他疫病傳入、傳出本場的風(fēng)險高。

4.3 關(guān)于疫病的來源

鑒于本場連續(xù)6年在每年兩次的全群檢疫中發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核陽性牛只，而牛結(jié)核的潛伏期可高達(dá)數(shù)年，可認(rèn)為本場結(jié)核潛伏期牛只為本次暴發(fā)的來源，該場為牛結(jié)核的地方性流行場；2014年5月引進(jìn)的牛只也來自牛結(jié)核地方性流行場，雖然當(dāng)時未能檢疫到陽性，但也不能排除引進(jìn)牛當(dāng)時正處在牛結(jié)核潛伏期的可能[5]。

4.4 關(guān)于檢測方法

不同廠家的結(jié)核檢測試劑的敏感性和特異性存在較大差異。有文獻(xiàn)指出，SICT方法檢測牛結(jié)核的敏感性和特異性大約為70%，而采用SICCT后，篩除了禽型結(jié)核陽性牛只，牛型結(jié)核檢測特異性有所提升。本次暴發(fā)中，通過SICT檢測共發(fā)現(xiàn)26只奶牛符合牛結(jié)核可疑牛的病例定義；在進(jìn)行SICCT復(fù)核檢測，只發(fā)現(xiàn)2只牛只符合本調(diào)查的牛結(jié)核陽性牛的病例定義，同樣證明了這一點(diǎn)。但是，SICT和SICCT方法的低敏感性，不少假陰性病例得以漏檢，造成本場或本地區(qū)牛結(jié)核的持續(xù)低水平流行。在今后的結(jié)核防控過程中，可考慮多采用敏感性高的抗原特異性y-干擾素試驗(yàn)進(jìn)行篩查，再用SICCT方法復(fù)核提高檢測系統(tǒng)的特異性，達(dá)到減少漏檢假陰性病例的同時，又減少錯殺牛結(jié)核陰性牛，提高檢測系統(tǒng)效率的目的。

5 相關(guān)建議

根據(jù)現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查和風(fēng)險分析結(jié)果，對本次結(jié)核疫情暴發(fā)的建議如下：

5.1 立即撲殺陽性牛，移除同棚其他所有牛，對該棚舍進(jìn)行徹底消毒；設(shè)立獨(dú)立的、遠(yuǎn)離生產(chǎn)區(qū)的隔離區(qū)，將所有可疑牛轉(zhuǎn)入隔離牛舍進(jìn)行45天隔離檢疫[5]。

5.2 嚴(yán)格禁止從其他結(jié)核高風(fēng)險場引進(jìn)奶牛；對本場動物要限制流動；對近期出入本場的獸醫(yī)和其他人員進(jìn)行人員和衣物的消毒。降低病原傳播風(fēng)險，防止再次發(fā)生疫情。

5.3 將堆積肥區(qū)域設(shè)置在生產(chǎn)區(qū)外，并及時清理糞污，消滅這一傳染源；擴(kuò)大場區(qū)大門和生產(chǎn)區(qū)大門消毒池長度，每日更換消毒液，確保消毒質(zhì)量。降低因?yàn)椴季趾椭贫炔缓侠碓斐傻囊卟★L(fēng)險。

[1]農(nóng)業(yè)部. GB/T18645-2002 動物結(jié)核病診斷技術(shù)[S]. 北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2002-05-01.

[2]陳傅言. 獸醫(yī)傳染病學(xué) [M].5版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2013，141-145.

[3] Regulation No 652/2014 of European Commussion，Programmes for the eradication，control and monitoring of certain animal diseases and zoonoses[EB/OL]. （2013-07-09）[2014-06-21].http：//ec.europa.eu/dgs/health_food-safety/funding/cff/ animal_health/vet_progs_en.htm.

[4] USDA，Guidelines for Surveillance of Bovine Tuberculosis in Wildlife，[EB/OL].（2010-06-05）[2011-04-12].http：//www. aphis.usda.gov/animal_health/animal_diseases/tuberculosis/ downloads/wildlife_tb_surv_manual.pdf.

[5] Mosaad A A，Abdel-Hamed A S，F(xiàn)athalla S I，et al. Sensitive and Specifi c Diagnostic Assay for Detection of Tuberculosis in Cattle [J]. Global Veterinaria，2012，8（6）：555-564.

[6]新疆維吾爾自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. DB65/T 3296-2011牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范[S]. 北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2011-08-15.

（責(zé)任編輯：王偉濤）

An Emergent Epidemiological Investigation upon the Detection of Cow Tuberculosis Cases in Shanghai

Lu Jun1，Sun Quanyun1，Xia Luming1，Zhao Hongjin1，Wang Quzhi1，Wang Genlong2，Liu Peihong1
（1.Shanghai Animial Disease Control Center，Shanghai 201103；2.Pudong New Area Animal Disease Control Center，Shanghai 201200）

In December 2014，dairy cows were tested to be positive to tuberculosis in Pudong New Area in Shanghai. To fi nd out the source of the disease and assess risks associated with the disease introduction and spread，an emergent investigation was conducted. 2 cows were identified as bovine tuberculosis cases. The causes of the outbreak was probably the infected cows undetected in the farm or the recent introduction of un-quarantined cows. By qualitative risk assessment，the risk of the disease introduction and spread was high through susceptible animals and vehicles moving，the risk of the disease became an endemic occurrence was high through the waste and dairy cows in the fi eld.

Shanghai；dairy cow；tuberculosis；emergent；investigation；epidemiological

S852.23

B

1005-944X（2015）08-0004-04

劉佩紅