楊　芳

Influence of blood collection volume on results of coagulation four test

Yang Fang

(Erdos Central Hospital of the Inner Mongolia Autonomous Region,Inner Mongolia 017000 China)

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采血量多少對凝血四項測定結(jié)果的影響

楊芳

Influence of blood collection volume on results of coagulation four test

Yang Fang

(Erdos Central Hospital of the Inner Mongolia Autonomous Region,Inner Mongolia 017000 China)

摘要：[目的]探討不同采血量對凝血試驗結(jié)果的影響。[方法]選取健康成人120人，于清晨空腹采血，在真空定量采血管中分別收集1.7 mL、2.7 mL、3.7 mL全血，標(biāo)本3 mL血為標(biāo)準(zhǔn)采血量，檢測凝血酶原時間(PT)、部分凝血酶原時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)4項指標(biāo)，并對結(jié)果進(jìn)行對比分析。[結(jié)果]樣本血量不足(血量2 mL)與標(biāo)準(zhǔn)血量(血量3 mL)比較，4項指標(biāo)均偏高，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；樣本血量過多(血量4 mL)與標(biāo)準(zhǔn)血量比較，僅FIB差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。[結(jié)論]采血量不足對凝血四項指標(biāo)的測試結(jié)果有影響，采血量過多僅對FIB的測試結(jié)果有影響，采血量的多少影響凝血四項結(jié)果的準(zhǔn)確度。

關(guān)鍵詞：采血量；凝血四項；凝血酶原時間；部分凝血酶原時間；纖維蛋白原；凝血酶時間

隨著血栓與止血疾病的不斷上升，血栓與止血的檢驗技術(shù)也有新的發(fā)展，凝血四項的測定已成為臨床上常用的血栓與止血篩查指標(biāo)[1]，其對病人的術(shù)前準(zhǔn)備以及血栓性疾病和出血性疾病的初步診斷有重要的臨床意義，對于出血性疾病和血栓性疾病病人的用藥療效的評估與監(jiān)測有直接指導(dǎo)作用。研究表明，不同比例的抗凝劑導(dǎo)致的血量不同對凝血四項結(jié)果有一定的影響，當(dāng)抗凝劑比例大于標(biāo)準(zhǔn)抗凝比例即樣本血量不足時，對凝血四項的測定結(jié)果較標(biāo)準(zhǔn)組偏高；當(dāng)抗凝劑比例小于標(biāo)準(zhǔn)抗凝比例即樣本量過多時，只有凝血酶時間(TT)的測定較標(biāo)準(zhǔn)組偏低[2]。凝血試驗中對采血量的控制直接影響著結(jié)果的可靠性與準(zhǔn)確性[3]。因此，探討采血量的多少對凝血四項的影響具有非常重要的臨床意義。本實驗采集2014年1月—6月在鄂爾多斯市中心醫(yī)院體檢的健康成人標(biāo)本，相對于標(biāo)準(zhǔn)血量標(biāo)本，研究全血血量的變化對凝血四項結(jié)果的影響。

1材料與方法

1.1實驗對象收集2014年1月—6月在鄂爾多斯市中心醫(yī)院體檢的健康成人120人，男59人，女61人，平均年齡30歲，經(jīng)隨訪近期未使用藥物，無血栓或出血史，無肝腎功能疾病，血液常規(guī)結(jié)果無異常，并與體檢者協(xié)商配合此試驗。

1.2儀器及試劑全自動血凝儀及其配套試劑購自STAGO公司，離心機(jī)Allegra X-12購自美國Beckman公司，質(zhì)控品購自伯樂公司，枸櫞酸鈉抗凝管購自美國BD公司。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集體檢者需進(jìn)行空腹采血，選用真空枸櫞酸鈉抗凝管(藍(lán)色凝血四項專用管)。采血時止血帶不宜扎太緊，束臂時間不應(yīng)超過1 min，勿讓體檢者反復(fù)做攥拳運動，禁止用力拍打穿刺部位，回血后應(yīng)立即松開止血帶，采血結(jié)束后立即顛倒混勻5次~10次，不可用力猛搖。

1.3.2采血量采用真空枸櫞酸鈉抗凝管[4](最大標(biāo)刻度為4 mL)，內(nèi)有抗凝劑0.3 mL，59人抽取靜脈血2.7 mL，總量3 mL的樣本定義為標(biāo)準(zhǔn)血量標(biāo)本；61人同時抽取靜脈血1.7 mL和3.7 mL，總量為2 mL和4 mL的樣本為血量不足和血量過量標(biāo)本，室溫離心1 200 r/min，離心20 min分離出乏血小板血漿[5，6]，2 h內(nèi)完成測試。

1.3.3檢測方法采用磁珠凝固法[7]。在被測血漿黏度不斷增加的基礎(chǔ)上進(jìn)行，在檢測杯兩側(cè)設(shè)有線圈，檢測杯中放入血漿和磁珠，檢測杯下方有一感應(yīng)線圈，當(dāng)磁珠運動時，感應(yīng)線圈切割磁力線產(chǎn)生感應(yīng)電流，并且感應(yīng)電流的強(qiáng)度和磁珠的運動速度呈正相關(guān)，儀器通電后產(chǎn)生磁場，磁珠在磁場力驅(qū)動下沿檢測杯底部彎曲的軌道作諧振運動，隨著血漿黏度增加，磁珠的運動阻力增大，運動速度減慢，并且振幅減小。因此感應(yīng)線圈切割磁力線的速度也減小，導(dǎo)致感應(yīng)電流也相應(yīng)減弱，所以，通過測定感應(yīng)電流可以間接地反映血液凝固情況。檢測電路檢測出磁珠從開始運動的振幅到振幅減弱到一半時所用的時間，即為血漿凝固時間。檢測凝血酶原時間(PT)、部分凝血酶原時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)4項指標(biāo)。

1.3.4統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗，計量資料組間比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1樣本血量不足對檢測結(jié)果的影響將血量為2 mL樣本(樣本血量不足標(biāo)本)與標(biāo)準(zhǔn)血量3 mL(標(biāo)準(zhǔn)血量標(biāo)本)進(jìn)行比較，樣本血量不足會導(dǎo)致凝血四項試驗結(jié)果偏高，詳見表1。

表1　樣本血量不足與標(biāo)準(zhǔn)血量標(biāo)本檢測結(jié)果比較±s)

2.2樣本血量過多對檢驗結(jié)果的影響將血量為4 mL樣本(過量血量標(biāo)本)與標(biāo)準(zhǔn)血量3 mL樣本進(jìn)行比較，樣本血量過多時僅對FIB的檢測有影響，使FIB的檢測結(jié)果偏高，詳見表2。

表2　樣本血量過量對檢測結(jié)果的影響±s)

3討論

凝血功能主要用于判斷病人有無出血或血栓形成傾向，是手術(shù)前、口服抗凝劑監(jiān)測、血栓診斷中經(jīng)常使用而且非常實用的一項指標(biāo)[8，9]。實驗室檢查的準(zhǔn)確性和可靠性直接影響臨床診斷和疾病治療，而采血量的多少對凝血檢測結(jié)果尤為重要[10]。本研究通過磁珠凝固法研究采血量多少對凝血四項檢測結(jié)果的影響。發(fā)現(xiàn)樣本血量不足與標(biāo)準(zhǔn)血量相比，凝血四項結(jié)果差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而且較標(biāo)準(zhǔn)血量測試結(jié)果偏高。大量文獻(xiàn)報道，1∶4，1∶5，1∶6抗凝比例與標(biāo)準(zhǔn)抗凝比例(1∶9)檢測結(jié)果相比，凝血四項結(jié)果差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)[11]，說明樣本血量不足對PT、APTT、FIB、TT的檢測均有影響，較合格樣本偏高。因此，標(biāo)本注入血不足、抗凝劑相對過多將引起凝血四項結(jié)果偏高，血標(biāo)本采集的準(zhǔn)確度是保證檢測結(jié)果質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。同時發(fā)現(xiàn)，樣本血量過量與標(biāo)準(zhǔn)血量相比，PT、APPT、TT差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，僅FIB結(jié)果差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而且較標(biāo)準(zhǔn)血量結(jié)果偏高。這與先期報道的PT、APTT、TT隨著抗凝比例從(1∶8)~(1∶4)逐漸增加與標(biāo)準(zhǔn)組(1∶9)比較檢測結(jié)果逐漸偏高，而當(dāng)抗凝比例從(1∶14)~(1∶10)逐漸降低時除FIB外，PT、APTT、TT檢測結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)組(1∶9)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義相一致。因此，標(biāo)本注入血量過多、抗凝劑相對過少，纖維蛋白原含量偏高。所以，抗凝劑的使用標(biāo)準(zhǔn)即采血量的準(zhǔn)確度對測定凝血四項的結(jié)果具有重要的臨床意義[12]。

綜上所述，血液標(biāo)本的采集準(zhǔn)確與否對凝血試驗測定具有一定的影響，提高采血量的準(zhǔn)確度對檢測結(jié)果非常重要，對于疾病的診斷和治療具有重要的臨床意義。

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(本文編輯李亞琴)

收稿日期：(2014-11-22；修回日期：2015-08-18)

作者簡介楊芳，主管護(hù)師，本科，單位：017000，內(nèi)蒙古自治區(qū)鄂爾多斯市中心醫(yī)院。

中圖分類號：R472

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Bdoi:10.3969/j.issn.1009-6493.2015.25.045

文章編號：1009-6493(2015)09A-3191-02