■楊秀娟 顧嬌嬌 鄧 斌 甘文斌 張 曦，2 鄧君明 陶琳麗，2

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650201；3.云南省農(nóng)村科技服務(wù)中心，云南昆明 650021；4.云南省獸藥飼料檢測(cè)所，云南昆明 650201）

武定雞是云南優(yōu)良的地方品種家禽，它體型矮 小，近似船型，且主要分布在云南省的武定、祿勸縣境內(nèi)高寒和氣候冷涼的山區(qū)。武定雞具有肉嫩脂豐、皮脆骨酥、味鮮質(zhì)優(yōu)、營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)[1]。日糧蛋氨酸作為家禽的第一限制性氨基酸，其含量的多少會(huì)影響飼糧中其他氨基酸的利用和需要量。目前在蛋雞和肉雞上進(jìn)行的氨基酸需要量研究較多。如NRC（1994）標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于未成熟萊航褐殼蛋雞7～12周齡蛋氨酸需要量為0.23%、萊航白殼蛋雞為0.25%。我國(guó)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（2004）中，黃羽肉種雞7～12周齡蛋氨酸的需要量為0.29%。石天虹等（2005）通過(guò)對(duì)泰和絲毛烏雞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)7～12周齡泰和絲毛烏雞蛋氨酸需要量為0.28%～0.29%[2]。李強(qiáng)（2004）對(duì)固始雞進(jìn)行研究得出7～12周齡固始雞蛋氨酸需要量為0.33%～0.37%[3]。然而目前關(guān)于7～12周齡武定雞蛋氨酸需要量的系統(tǒng)研究未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)，測(cè)定不同蛋氨酸水平對(duì)武定雞生長(zhǎng)性能的影響，以確定7～12周齡武定雞蛋氨酸需要量，為武定雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的制訂和科學(xué)配制武定雞日糧提供參考依據(jù)，同時(shí)也有利于云南優(yōu)質(zhì)地方雞種——武定雞的保種、生產(chǎn)與推廣。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)養(yǎng)雞場(chǎng)進(jìn)行，采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇健康、出殼體重均勻的43日齡武定雞60只，隨機(jī)分為5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只雞，混養(yǎng)。蛋氨酸梯度為0.1%，即蛋氨酸水平分別為0.25%、0.35%、0.45%、0.55%、0.65%。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)（%）

1.2 試驗(yàn)日糧

參考我國(guó)雞的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（ZBB43005—86）中肉用仔雞、美國(guó)NRC肉用雞、地方黃羽肉雞種雞以及肉用種雞的營(yíng)養(yǎng)需要[4-5]，以及前期對(duì)武定雞營(yíng)養(yǎng)需要量的研究為基礎(chǔ)，配制基礎(chǔ)日糧[6-7]，日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)雞場(chǎng)進(jìn)行，預(yù)飼7 d，每4只雞一籠飼養(yǎng)，試驗(yàn)雞在43日齡時(shí)進(jìn)入正式試驗(yàn)，雞只自由采食及飲水，并按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫，做好疾病防控。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)

飼養(yǎng)期間以籠為單位，記錄每天喂料量和剩料量、每周末空腹稱體重，用于計(jì)算日增重、日采食量、料重比、氮攝入量。

日增重[g/（只·d）]=（末期體重-前期體重）/日齡；

日采食量[g/（只·d）]=42 d采食量之和/（42 d×重復(fù)數(shù)）；料重比=日采食量[g/（只·d）]/日增重[g/（只·d）]；氮攝入量（g）=采食量×日糧粗蛋白質(zhì)含量×6.25。

1.4.2 血液生化指標(biāo)

在飼養(yǎng)試驗(yàn)開始時(shí)，挑選健康43日齡武定雞2只屠宰，作為零對(duì)照。在第12周齡末，每個(gè)處理選取3只雞，用負(fù)壓管翅下靜脈采3 ml血液（不加抗凝）于4℃保存后，進(jìn)行屠宰，屠宰采用窒息法，死后立即冷凍，以免體液流失。

血液生化指標(biāo)：血清樣本用于測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血清尿素氮、血清尿酸。

1.4.3 營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)

在飼養(yǎng)試驗(yàn)開始時(shí)，挑選健康43日齡武定雞2只屠宰，作為零對(duì)照。在第12周齡末，每個(gè)處理選取3只雞，進(jìn)行屠宰（采用窒息法），死后立即冷凍，以免體液流失。取冷凍后的試驗(yàn)雞，除去其消化道內(nèi)容物后稱重。將全雞用鋼刀切碎，再用絞肉機(jī)充分搗碎均勻。樣本在60～70℃烘箱中烘至恒重，粉碎制成風(fēng)干分析樣品。

全雞樣本用于測(cè)定水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪。

1.4.4 氮平衡試驗(yàn)和能量平衡試驗(yàn)

在第75日齡時(shí)早上8點(diǎn)開始連續(xù)記錄3 d的采食量（第78日齡早上8點(diǎn)結(jié)束），第76日齡早上8點(diǎn)開始連續(xù)收集3 d排泄物（第79日齡早上8點(diǎn)結(jié)束）。

以組為單位進(jìn)行排泄物的收集和處理，在每次收集排泄物時(shí)，先清理掉排泄物上的雞毛、皮屑和飼料（用鑷子和吹耳球吹）。對(duì)清理掉的飼料進(jìn)行計(jì)量，從每日喂料量中扣除，而后用刮刀無(wú)損地將全部排泄物刮入樣品袋，稱重并記錄，然后用噴壺噴灑10%的鹽酸溶液于排泄物，以固定排泄物中的氨。

測(cè)定飼料樣本和排泄物樣本的干物質(zhì)、水分以及粗蛋白質(zhì)；

沉積氮[g/（只·d）]=攝入氮[g/（只·d）]-排泄氮[g/（只·d）];氮沉積率（%）=（攝入氮-排泄氮）/攝入氮×100。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS13.0進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著再進(jìn)行Duncan's法多重比較，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示[8]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蛋氨酸水平對(duì)7～12周齡武定雞生長(zhǎng)性能的影響（見表3）

表3 不同蛋氨酸水平對(duì)武定雞生長(zhǎng)性能的影響

從表3中看出，各處理組間前期體重差異不顯著（P＞0.05），各處理組間末期體重、全期增重、日增重、日采食量及料重比存在差異，末期體重：1、5組與2、3組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；全期增重：1組、4組、5組與2、3組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；日增重：2、3組與1、4、5組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；日采食量：1組與4、5組差異顯著（P＜0.05），4組與5組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；料重比：1組與2、3、4、5組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；且隨著蛋氨酸水平的提高，末期體重、全期增重、日增重呈先上升后下降的趨勢(shì)，日采食量、料重比呈下降上升又下降趨勢(shì)，蛋氨酸水平為0.45%時(shí)，獲得最大日增重、末期體重和最佳料重比。

為了進(jìn)一步研究蛋氨酸添加水平與不同生產(chǎn)性能指標(biāo)間的關(guān)系，試驗(yàn)以蛋氨酸添加水平為橫坐標(biāo)，全期增重為縱坐標(biāo)，研究二者之間的回歸關(guān)系。通過(guò)回歸分析發(fā)現(xiàn)，全期增重與蛋氨酸添加水平間存在著極顯著的回歸關(guān)系（見圖1）。

由圖1得出，增重與蛋氨酸水平呈二次曲線關(guān)系，擬合方程為：y=-1 082.05x2+943.18x+434.99（R2=0.53，P=0.011），當(dāng)x（日糧中蛋氨酸水平）為0.44%時(shí)，武定雞在7～12周齡獲得最大y值（增重）為640.53 g。

圖1 不同蛋氨酸水平與增重?cái)M合曲線

2.2 不同蛋氨酸水平對(duì)7～12周齡武定雞體成分的影響（見表4）

從表4中可以看出：不同蛋氨酸水平對(duì)武定雞12周齡末體成分中的水分含量、粗蛋白質(zhì)含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）；與其他蛋氨酸水平相比，4組的蛋氨酸水平顯著降低了粗脂肪的含量（P＜0.05）；對(duì)體成分中的氨基酸含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

2.3 不同蛋氨酸添加水平對(duì)血液生化指標(biāo)的影響（見表5）

從表5中看出，各處理組間，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、血清尿酸及血清尿素氮含量無(wú)顯著影響（P＞0.05），這說(shuō)明了試驗(yàn)雞日糧中蛋氨酸設(shè)定濃度梯度還在雞只能自動(dòng)調(diào)節(jié)的范圍。

表4 不同蛋氨酸水平對(duì)雞體成分的影響（以鮮樣為基礎(chǔ)%）

表5 不同蛋氨酸水平對(duì)雞血液生化指標(biāo)的影響

2.4 不同蛋氨酸水平對(duì)7～12周齡武定雞沉積氮的影響（見表6）

從表6中看出，不同蛋氨酸水平對(duì)沉積氮和氮沉積率均無(wú)顯著差異（P＞0.05），對(duì)攝入氮有顯著差異（P＜0.05），1組與2組、4組、5組差異顯著（P＜0.05），5組與2組、4組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）。

表6 蛋氨酸水平對(duì)雞氮沉積及氮沉積率的影響

2.5 不同蛋氨酸水平對(duì)7～12周齡武定雞氨基酸利用率的影響（見表7）

從表7中看出，蛋氨酸水平不同，17種氨基酸的利用率各不相同?？傮w來(lái)看，在不同蛋氨酸水平下，蘇氨酸和胱氨酸利用率最低，為66%～74%之間，而谷氨酸和甘氨酸利用率最高，達(dá)到95%左右，不同蛋氨酸水平對(duì)蛋氨酸利用率有顯著影響，1組與2、3、4、5組有顯著差異（P＜0.05），且隨著蛋氨酸水平提高，蛋氨酸利用率呈上升趨勢(shì)。

3 討論

蛋氨酸是禽類第一限制性氨基酸，在家禽生長(zhǎng)中發(fā)揮著重要作用?，F(xiàn)已有大量研究證明，當(dāng)飼糧中蛋氨酸缺乏時(shí)，會(huì)明顯抑制肉雞生長(zhǎng)，降低飼料利用率；而適當(dāng)?shù)奶砑拥鞍彼釀t可改善肉雞的生長(zhǎng)性能；若在飼料中添加超過(guò)適宜水平的蛋氨酸時(shí)，對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能無(wú)影響，但是可能會(huì)產(chǎn)生毒害作用[9-13]。也有一些研究結(jié)果表明，在家禽的某一特定生長(zhǎng)時(shí)期，飼糧蛋氨酸水平在一定范圍內(nèi)變化不會(huì)對(duì)家禽的生長(zhǎng)產(chǎn)生顯著的影響[14-17]。

表7 不同蛋氨酸水平對(duì)雞氨基酸表觀利用率的影響（%）

瞿明仁等（2004）研究發(fā)現(xiàn)，泰和烏雞0～4周齡日糧中蛋氨酸需要量公、母雞均為0.44%；5～8周齡日糧中蛋氨酸需要量為公雞0.35%、母雞0.31%；9～12周齡日糧中蛋氨酸需要量為公雞0.26%、母雞0.24%[18]。石天虹等（2005）研究了蛋氨酸對(duì)0～12周齡泰和烏雞生產(chǎn)性能的影響，以烏雞生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益為判斷指標(biāo)，建議烏雞蛋氨酸的需要量為：0～4周齡蛋氨酸0.32%、5～8周齡蛋氨酸 0.29%、9～12周齡蛋氨酸0.28%[2]。李強(qiáng)（2004）對(duì)固始雞氨基酸需要量進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，各時(shí)期固始雞蛋氨酸需要量分別為：0～4周齡0.39%、5～8周齡0.37%、9～12周齡蛋氨酸0.33%[3]。姚元枝（2003）對(duì)雪峰烏骨雞蛋氨酸需要量進(jìn)行研究，以累積生長(zhǎng)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，根據(jù)二次曲線模型，得出5～8周齡雪峰烏骨雞蛋氨酸需要量為0.429%[19]。謝明等（2006）研究了蛋氨酸對(duì)3～6周齡雄性北京鴨生產(chǎn)性能的影響，結(jié)果表明：蛋氨酸對(duì)3～6周齡雄性北京鴨平均日增重和采食量均產(chǎn)生了顯著影響，但對(duì)料重比無(wú)顯著影響。以平均日增重為評(píng)價(jià)指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，3～6周齡雄性北京鴨的蛋氨酸需要量為0.365%[9]。張靜等（2014）對(duì)略陽(yáng)烏雞7～12周齡可消化蛋氨酸需要量進(jìn)行研究，結(jié)果表明：不同蛋氨酸水平對(duì)略陽(yáng)烏雞平均日增重和采食量差異顯著，對(duì)料重比差異不顯著，以平均日增重為評(píng)價(jià)指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，7～12周齡略陽(yáng)烏雞的表觀可消化蛋氨酸需要量為0.326%，真可消化蛋氨酸需要量為0.336%[20]。

本試驗(yàn)通過(guò)武定雞全期增重與飼糧蛋氨酸水平之間的二次曲線模型估算出，7～12周齡武定雞蛋氨酸需要量為0.44%，試驗(yàn)結(jié)果略高于以上學(xué)者的研究，這說(shuō)明不同品種的雞對(duì)蛋氨酸的需要量各不相同，只有提供最適宜水平的蛋氨酸，才能獲得最佳的生長(zhǎng)性能。同時(shí)，由于試驗(yàn)用的武定雞是未經(jīng)過(guò)選育的品種，個(gè)體差異較大導(dǎo)致二次曲線擬合的R2略低。

由于組成蛋白質(zhì)的各種氨基酸在機(jī)體代謝過(guò)程中，具有協(xié)同、轉(zhuǎn)化、替代和拮抗等關(guān)系。所以，飼糧中不同的氨基酸水平對(duì)自身或其它氨基酸的利用率會(huì)產(chǎn)生一定的影響。氨基酸間的拮抗作用發(fā)生在結(jié)構(gòu)相似的氨基酸間，因?yàn)樗鼈冊(cè)谖者^(guò)程中共用同一轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，存在相互競(jìng)爭(zhēng)。姚軍虎等（2000）研究表明，待測(cè)飼料或飼糧中蛋白質(zhì)、氨基酸含量顯著影響其表觀代謝率，日糧蛋白質(zhì)、氨基酸含量過(guò)高或過(guò)低，均會(huì)降低蛋白質(zhì)、氨基酸的表觀代謝率，造成氮素浪費(fèi)[21]。同理，蛋氨酸是家禽日糧中第一限制性氨基酸，添加適當(dāng)?shù)鞍彼峥梢源龠M(jìn)其他氨基酸的平衡，使氨基酸利用率提高。不同蛋氨酸水平對(duì)蛋氨酸表觀利用率有顯著影響（P＜0.05），對(duì)其他氨基酸表觀利用率無(wú)顯著影響（P＞0.05），隨著蛋氨酸水平提高，蛋氨酸利用率總體呈上升趨勢(shì)，與周彥文（2008）[22]研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，不同蛋氨酸水平對(duì)12周齡末武定雞生長(zhǎng)性能指標(biāo)影響存在差異；對(duì)體成分分析中水分含量、粗蛋白質(zhì)含量和氨基酸含量無(wú)顯著影響（P＞0.05），與其他蛋氨酸水平相比，4組的蛋氨酸水平顯著降低了體成分中粗脂肪的含量（P＜0.05）；對(duì)血液生化指標(biāo)無(wú)顯著影響（P＞0.05），對(duì)食入氮有不同影響，對(duì)沉積氮、沉積率和各種氨基酸利用率無(wú)顯著影響（P＞0.05）。以全期增重為評(píng)價(jià)指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，7～12周齡武定雞的最適蛋氨酸水平為0.44%。