招湛靜，徐威力，姚雪淦

(深圳市大鵬新區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518120)

小細(xì)胞低色素性貧血是由于紅細(xì)胞中血紅蛋白(hemoglobin，Hb)合成障礙所致Hb、紅細(xì)胞平均體積(mean corpuscular volume，MCV)和紅細(xì)胞平均血紅蛋白(mean corpuscular hemoglobin，MCV)3個(gè)紅細(xì)胞指標(biāo)降低的一類貧血，主要多見于缺鐵乏癥(iron deficiency，ID)和珠蛋白生成障礙性貧血[1]。缺鐵性貧血是由于鐵缺乏導(dǎo)致Hb合成減少，我國7歲以下兒童缺鐵性貧血的患病率為7.85%，其中嬰幼兒為20.5%，高發(fā)人群為6～24月的嬰幼兒和青春期兒童，因此缺鐵性貧血是我國重點(diǎn)防治的常見病之一[2]。珠蛋白生成障礙性貧血是一組單基因遺傳性血液病，是由于珠蛋白基因的缺陷使得珠蛋白肽鏈中的一種或幾種合成減少或不能合成，導(dǎo)致血紅蛋白的組成成分改變，我國長江以南各省區(qū)是珠蛋白生成障礙性貧血高發(fā)地區(qū)，同時(shí)在珠蛋白生成障礙性貧血高發(fā)區(qū)還發(fā)現(xiàn)了單純性小細(xì)胞低色素癥病例。因此，為了了解深圳大鵬和龍華新區(qū)兒童發(fā)生小細(xì)胞低色素性貧血的現(xiàn)狀及原因，我們對本地區(qū)2 256兒童進(jìn)行了相關(guān)調(diào)查，現(xiàn)將報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 隨機(jī)收集2014年9月～2016年1月來院體檢兒童2 256例，年齡3個(gè)月～13歲，平均年齡5±7.8歲，其中男性963例，女性1 293例。所有研究對象除部分有貧血表現(xiàn)外均無其它疾病，并告知參與者并簽定同意書；珠蛋白生成障礙性貧血和鐵缺乏癥診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)文獻(xiàn)[3]。

1.2 儀器與試劑 Sysmex XN-9000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品均由Sysmex公司提供；Backman DXI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀、試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品均由美國貝克曼公司提供；珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測分析儀及試劑盒均由亞能生物技術(shù)(深圳)有限公司提供。

1.3 標(biāo)本采集 所有研究對象均于清晨空腹用無菌真空采血管采集外周靜脈血2～3 ml于EDTA-K2抗凝管內(nèi)，各2份，充分混勻；再抽2～3 ml于無抗凝干燥管內(nèi)，及時(shí)送檢。

1.4 方法

1.4.1 血液學(xué)指標(biāo)測定：用Sysmex XN-9000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測紅細(xì)胞(RBC)，Hb，MCV及MCH等參數(shù)。診斷標(biāo)準(zhǔn)：MCV<80 fl，MCH<28 pg，MCHC<32%；Hb<30 g/L：極重度貧血，Hb 30～60 g/L：重度貧血，Hb 60～90 g/L：中度貧血，Hb>90 g/L：輕度貧血。

1.4.2 鐵代謝指標(biāo)檢測：采用美國Backman DXI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀檢測血清鐵和鐵蛋白含量水平。診斷標(biāo)準(zhǔn)：血清鐵<8.95 μmol/L，血清鐵蛋白<14 μg/L。

1.4.3 珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測：α-珠蛋白生成障礙性貧血分析采用單管多重gap-PCR技術(shù)檢測3種常見的基因缺失型(--SEA，-α4.2，-α3.7)，采用反向點(diǎn)雜交(reverse dot blot，RDB)法檢測3種常見的突變型α-珠蛋白生成障礙性貧血基因(QSM，CSM和WSM)；β-基因變異用反向點(diǎn)雜交法檢測17種常見突變位點(diǎn)(β0包括Int，CD41/42，CD31，CD14/15，CD17，CD71/72，IVS-I-l，CD43，CD27/28；β+包括IVS-II-654，-28，-29，-30，-32，CAP，IVS-I-5，βE)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SSPS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用百分率(%)，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小細(xì)胞低色素性貧血患病率 2 256例深圳大鵬新區(qū)體檢兒童共檢出小細(xì)胞低色素性貧血患兒239例，占10.6%(239/2 256)，其中<3歲兒童2.26%(51/2 256)，4～7歲兒童4.43%(100/2 256)和8～13歲兒童為3.90%(88/2 256)，4歲以上兒童小細(xì)胞低色素性貧血患病率明顯高于3歲以下的兒童，兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.292～4.025，P<0.05)，而4歲以上兒童各年齡段之間小細(xì)胞低色素性貧血患病率之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.107，P>0.05)。

2.2 不同年齡段兒童貧血程度 239例小細(xì)胞低色素性貧血患兒發(fā)生輕度貧血者177例，占74.06%；中度貧血者60例，占25.10%；重度貧血者2例，占0.84%；未見極重度貧血患兒，其中2例重度貧血都分布在4歲以上兒童。

2.3 珠蛋白生成障礙性貧血、ID檢出率及珠蛋白生成障礙性貧血并發(fā)ID發(fā)生率 見表1。239例小細(xì)胞低色素性貧血患兒中檢出珠蛋白生成障礙性貧血、ID及珠蛋白生成障礙性貧血并發(fā)ID患兒分別為155，139及54例，檢出率分別為64.9%(155/239)，58.2%(139/239)及34.8%(54/155)。

表1 239例小細(xì)胞低色素性貧血中珠蛋白生成障礙性貧血、ID及珠蛋白生成障礙性貧血并發(fā)ID檢出率[%(n)]

注：#為4～13歲與<3歲組兒童比較；*為4～7歲與8～13歲組兒童比較。

2.4 單純性小細(xì)胞低色素癥的珠蛋白生成障礙性貧血發(fā)生率 239例小細(xì)胞低色素性貧血患兒中檢出32例單純性小細(xì)胞低色素癥患兒，占13.4%(32/239)。從這些病例中檢出α-珠蛋白生成障礙性貧血13例(10例雜合子和3例雙重雜合子)、β-珠蛋白生成障礙性貧血 5例均為雜合子及αβ-復(fù)合型珠蛋白生成障礙性貧血病例3例。單純性小細(xì)胞低色素癥珠蛋白生成障礙性貧血基因總檢出率和攜帶率分別為65.6%(21/32)和75.0%(24/32)，α-珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢出率和攜帶率分別為50.0%(16/32)和59.38%(19/32)，β-珠蛋白生成障礙性貧血的檢出率和攜帶率則均為25.0%(8/32)。

2.5 α-和β-珠蛋白生成障礙性貧血基因型突變率 239例患兒中共檢出6種不同的α-珠蛋白生成障礙性貧血突變，包括3種缺失型(--SEA，-α4.2，-α3.7) 和3種非缺失型(QSM，CSM和WSM)，共13種基因型總計(jì)113例，α-珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢出率為47.28%(113/239)；檢出9種不同的β-珠蛋白生成障礙性貧血突變共12種基因型總計(jì)70例，β-珠蛋白生成障礙性貧血的基因檢出率為29.3%(70/239)，結(jié)果見表2，3。

表2 113例α-珠蛋白生成障礙性貧血患兒檢出常見基因型及基因突變頻率(%)

表3 70例β-珠蛋白生成障礙性貧血患兒檢出常見基因型及基因突變頻率(%)

3 討論

小細(xì)胞低色素性貧血是一大類貧血的總稱，主要見于珠蛋白生成障礙性貧血和缺鐵性貧血(iron deficiency anemia，IDA)。珠蛋白生成障礙性貧血多數(shù)患者存在體內(nèi)鐵負(fù)荷過重，是世界上最為常見的遺傳性溶血性疾病，重型珠蛋白生成障礙性貧血，目前尚無有效的根治措施，常需終生定期輸血和規(guī)范的去鐵治療；鐵缺乏嚴(yán)重危害兒童身體健康，對人體內(nèi)多個(gè)系統(tǒng)功能產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響，對嬰兒認(rèn)知功能和行為發(fā)育有較長期且不可逆的損害，可延續(xù)影響到兒童期，且鐵劑治療也不能完全恢復(fù)損害的認(rèn)知行為，長時(shí)間或嚴(yán)重的貧血可對兒童腦發(fā)育產(chǎn)生不可逆的損害[4，5]，對患兒和家屬均有極大的負(fù)擔(dān)，影響生活質(zhì)量。因此，加強(qiáng)各地兒童小細(xì)胞低色素性貧血現(xiàn)狀調(diào)查，并闡明小細(xì)胞低色素性貧血發(fā)生的原因則是一項(xiàng)十分有意義的基礎(chǔ)工作，對優(yōu)生優(yōu)育有重要意義。

兒童小細(xì)胞低色素性貧血發(fā)病率與不同地區(qū)地質(zhì)環(huán)境、人員結(jié)構(gòu)及生活習(xí)慣等因素有著密切關(guān)系，深圳大鵬新區(qū)是一個(gè)多移民區(qū)，外來人員占本地人口90%以上，人員結(jié)構(gòu)復(fù)雜。本文研究結(jié)果顯示，本區(qū)兒童小細(xì)胞低色素性貧血發(fā)病率高達(dá)10.6%，說明了該區(qū)兒童小細(xì)胞低色素性貧血發(fā)病率有較高的水平，應(yīng)引起當(dāng)?shù)卣托l(wèi)生行政部門注意和重視，其中以4～7歲兒童最為明顯(4.43%)，這可能與這個(gè)年齡段的兒童在飲食方面比較偏食有關(guān)。

小細(xì)胞低色素性貧血會導(dǎo)致患兒不同程度貧血，從而影響兒童生長發(fā)育。本研究結(jié)果顯示，大鵬新區(qū)小細(xì)胞低色素性貧血患兒以輕度貧血為主，占74.06%，重度貧血均見于4歲以上兒童，未見極重度貧血患兒，這可能與小細(xì)胞低色素性貧血的發(fā)生和逐步進(jìn)展過程有關(guān)。因此，要加強(qiáng)早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)和及時(shí)治療，阻止病情的進(jìn)一步發(fā)展。

IDA是小兒的常見病，也是小細(xì)胞低色素性貧血最常見的病因[5]，而本研究結(jié)果顯示，深圳大鵬新區(qū)小細(xì)胞低色素性貧血患兒中珠蛋白生成障礙性貧血基因總檢出率達(dá)64.9%，雖低于有關(guān)文獻(xiàn)[6，7]報(bào)道海南地區(qū)的73.4%和76.75%，而小細(xì)胞低色素性貧血患兒中ID檢出率為58.2%(139/239)，略高于夏威夷等[2]報(bào)道的54.21%，明顯高于文獻(xiàn)[8～9]報(bào)道的31.7%～43.66%，并且本研究中檢出α-復(fù)合β-珠蛋白生成障礙性貧血28例，檢出率為11.7%，遠(yuǎn)高于國內(nèi)其他省份，另外單純性小細(xì)胞低色素癥患兒中珠蛋白生成障礙性貧血基因總檢出率為65.6%和總攜帶率為75.0%。由此可見，珠蛋白生成障礙性貧血是引起該區(qū)兒童小細(xì)胞低色素性貧血最主要的原因。

珠蛋白生成障礙性貧血患兒體內(nèi)鐵負(fù)荷情況會嚴(yán)重影響其生存質(zhì)量，鐵負(fù)荷過重會導(dǎo)致肺含鐵血黃素沉著癥、血色病及心功能異常，而鐵不足又會加重IDA的癥狀。若將珠蛋白生成障礙性貧血誤診為IDA，一方面降低了珠蛋白生成障礙性貧血的檢出率，另一方面，若補(bǔ)充鐵劑，還會加重鐵對機(jī)體的損害，同時(shí)也帶來不必要的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。若將IDA誤診為珠蛋白生成障礙性貧血，無相應(yīng)的鐵補(bǔ)充，長期的鐵缺乏會對患者的認(rèn)知行為和行為發(fā)育造成不可逆的損害。本研究結(jié)果顯示，本區(qū)珠蛋白生成障礙性貧血并發(fā)ID患兒有較高的發(fā)病率，占34.8%(54/155)，略低于夏威夷等[2]報(bào)道的37.61%，但明顯高于李哲等[9]報(bào)導(dǎo)的24.53%。因此，對于確診珠蛋白生成障礙性貧血患兒，應(yīng)該進(jìn)一步檢查鐵代謝指標(biāo)，必要時(shí)做骨髓鐵染色以排除IDA，而在珠蛋白生成障礙性貧血高發(fā)區(qū)，對診斷為IDA的患兒，要進(jìn)一步檢查珠蛋白生成障礙性貧血，以確定是否并發(fā)珠蛋白生成障礙性貧血。

通過分析深圳大鵬新區(qū)兒童小細(xì)胞低色素性貧血基因突變類型與頻率發(fā)現(xiàn)，α-珠蛋白生成障礙性貧血基因缺陷類型主要為--SEA/αα，-α3.7/αα及-α4.2/αα，占93.8%；β-珠蛋白生成障礙性貧血基因缺陷類型主要為CD41/42，CD17，IVS-II-654及-28，占84.2%，與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[10～12]相一致，但基因缺陷率及常見類型與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道均不一致，這可能與不同地區(qū)和民族的珠蛋白生成障礙性貧血基因遺傳背景有關(guān)。因此，建議不同地區(qū)要對兒童小細(xì)胞低色素性貧血人群進(jìn)行貧血基因普查，了解當(dāng)?shù)氐幕蛉毕萋始邦愋?，對預(yù)防和干預(yù)性治療提供依據(jù)。

綜以上述，深圳大鵬新區(qū)兒童小細(xì)胞低色素性貧血有較高的發(fā)病率，珠蛋白生成障礙性貧血是引起該區(qū)兒童小細(xì)胞低色素性貧血最主要的原因，其次為ID。由于珠蛋白生成障礙性貧血和ID的病因、治療和愈后以及遺傳與否完全不同，因此，我們所得出的研究結(jié)論對于臨床優(yōu)生優(yōu)育工作和指導(dǎo)臨床用藥等均具有重要的優(yōu)生學(xué)意義和臨床實(shí)用價(jià)值。

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