基金項(xiàng)目:福建省自然基金項(xiàng)目(2011D012;2015J01561)。

?

廈門某三級(jí)綜合醫(yī)院近3年血培養(yǎng)病原菌構(gòu)成及耐藥性分析*

*基金項(xiàng)目:福建省自然基金項(xiàng)目(2011D012;2015J01561)。

王濤1，馬曉波1，李珣1，房麗麗1，鄭港森1，黃輝萍2，洪國(guó)粦1△

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.感染管理部，福建廈門 361003)

摘要:目的了解廈門某院近3年血培養(yǎng)主要分離菌分布及耐藥情況，為臨床準(zhǔn)確使用抗菌藥物,防控醫(yī)院獲得性血流感染提供科學(xué)依據(jù)。方法采用美國(guó)Bactek FK全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀進(jìn)行培養(yǎng)，VITEK 2 Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)對(duì)血培養(yǎng)分離菌株進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)，藥敏結(jié)果采用美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2011標(biāo)準(zhǔn)判斷。結(jié)果近3年內(nèi)血培養(yǎng)主要分離菌為大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌及凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)等。醫(yī)院獲得性血流感染所占比率2012~2014年分別為42.2%、46.9%、54.1%。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率為18.8%，多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌(MDRAB)檢出率為42.9%，大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢出率分別為71.8%和69.8%。結(jié)論該院血流感染病原體以腸桿菌科細(xì)菌為主，醫(yī)院獲得性血流感染比重逐年上升；MRSA、多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌檢出率較高，臨床應(yīng)重視血培養(yǎng)病原體的變化及其耐藥趨勢(shì)，同時(shí)需防控醫(yī)源性血流感染。

關(guān)鍵詞:血培養(yǎng)；耐藥性醫(yī)院獲得性血流感染

血培養(yǎng)是臨床診斷血流感染的重要檢查項(xiàng)目。血流感染是臨床常見的重癥感染之一，其病死率高達(dá)27%~40%[1-2]。血流感染病原菌的菌群分布和耐藥性監(jiān)測(cè)，對(duì)于掌握病原菌耐藥變遷，指導(dǎo)臨床合理用藥，有效控制血流感染具有積極意義[3]。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源共收集2012年1月至2014年12月三級(jí)綜合醫(yī)院住院患者送檢血培養(yǎng)陽性標(biāo)本1 943份，其中2012年585份，2013年607份，2014年751份。

1.2儀器與試劑美國(guó)Bactek FK自動(dòng)血液培養(yǎng)儀(美國(guó)BD公司)及配套血培養(yǎng)瓶，VITEK 2 Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)及其配套的細(xì)菌鑒定/藥敏板(法國(guó)梅里埃生物有限公司)。哥倫比亞血瓊脂平板、麥康凱平板、巧克力平板、水解酪蛋白(MH)瓊脂平板、念珠菌顯色平板(上?？片敿挝⑸锕?。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853，均購(gòu)自衛(wèi)生與計(jì)劃生育委員會(huì)臨檢中心。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集采集新生兒、兒童血液2~5 mL快速注入兒童瓶，采集成人血液5~10 mL快速注入成人的需氧瓶和厭氧瓶，混勻后立即送檢。

1.3.2細(xì)菌培養(yǎng)及分離將血液培養(yǎng)瓶放入Bactek FK全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀培養(yǎng)，儀器報(bào)警提示培養(yǎng)陽性，及時(shí)接種哥倫比亞血瓊脂平板和巧克力平板，必要時(shí)接種麥康凱和念珠菌顯色平板，放置在35 ℃、5%CO2環(huán)境培養(yǎng)18~24 h，并同時(shí)進(jìn)行革蘭染色涂片。對(duì)于培養(yǎng)5 d報(bào)陰性的培養(yǎng)瓶，報(bào)告無菌生長(zhǎng)。

1.3.3細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)從經(jīng)過夜純培養(yǎng)的新鮮平板上挑取菌落，在ID肉湯中制成標(biāo)準(zhǔn)濁度(0.5~0.6麥?zhǔn)蠁挝?的菌懸液，放入梅里埃VITEK 2Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)，結(jié)果判讀按照2011年美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)制定的標(biāo)準(zhǔn)[4]，以敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)報(bào)告結(jié)果。所有操作嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第3版)》進(jìn)行。

1.3.4診斷標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)院獲得性血流感染診斷按照原衛(wèi)生部頒發(fā)的醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。入院48 h以后血培養(yǎng)分離出病原微生物，并伴有下列癥狀或體征中的一項(xiàng)：(1)體溫大于38 ℃或體溫小于36 ℃,可伴有寒戰(zhàn)；(2)有入侵門戶或遷徙病灶；(3)有全身感染中毒癥狀而無明確感染灶；(4)收縮壓小于90 mm Hg或較原收縮壓下降小于40 mm Hg。常見皮膚定植菌需要至少2次血培養(yǎng)陽性證實(shí)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1血培養(yǎng)分離病原菌分布情況2012年1月至2014年12月，全院送檢的1 943份血培養(yǎng)陽性標(biāo)本，其中2012、2013、2014年分別為585、607、751份。近3年合計(jì)檢出最多的病原菌為大腸埃希菌，構(gòu)成比為26.1%，其次是肺炎克雷伯菌(10.6%)、表皮葡萄球菌(8.4%)。主要分離病原菌及構(gòu)成比見表1。

表1　　各年度主要分離病原菌及構(gòu)成比

2.2各年度血培養(yǎng)病原菌感染類型分布2012~2014年醫(yī)院獲得性血流感染所占比重分別為42.2%、46.9%、54.1%，呈逐年上升趨勢(shì)，見表2。

2.3各年度血培養(yǎng)主要病原菌耐藥株檢出情況2012至2014年耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率分別為44.0%、12.2%、10.9%，呈逐年下降趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.49，P=0.001)；鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥株檢出率分別為16.7%、54.5%、69.2%，呈逐年上升趨勢(shì)(χ2=10.04，P=0.007)；大腸埃希菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的陽性檢出率分別為51.1%、84.9%、74.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=42.64，P=0.000)；肺炎克雷伯菌ESBLs陽性檢出率分別為29.5%、85.1%、88.3%，呈逐年上升趨勢(shì)(χ2=66.86，P=0.000)。見表3。

表2　　各年度血培養(yǎng)病原菌感染類型分布

表3　　各年度血培養(yǎng)主要病原菌耐藥株檢出情況

3討論

血流感染屬嚴(yán)重感染性疾病，為患者死亡的主要原因之一，而由多重耐藥菌所致的醫(yī)院獲得性敗血癥病死率更高。因此，早期有效的治療顯得非常重要，而細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)是指導(dǎo)臨床合理用藥的重要依據(jù)[6-7]。

本研究結(jié)果顯示，近3年內(nèi)醫(yī)院獲得性血流感染比率逐年上升，2012年為42.2%，2013年為46.9%，2014年為54.1%?？赡芘c臨床大量應(yīng)用廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑及器官移植、侵襲性治療等因素密切相關(guān)[8]。近3年血培養(yǎng)陽性分離率最高的是大腸埃希菌(26.1%)，其次為肺炎克雷伯菌(10.6%)，這與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道一致[9]。表皮葡萄球菌分離率為8.4%，較金黃色葡萄球菌分離率5.8%為高。近年來，凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)在血流感染中分離率越來越高[10-11]，顯然一些條件致病菌已成為血流感染的主要病原菌。因此必須加強(qiáng)對(duì)各種器械、導(dǎo)管等的消毒和管理，同時(shí)加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員手的消毒和清潔，以減少醫(yī)院感染的機(jī)會(huì)。

連續(xù)三年的血培養(yǎng)結(jié)果顯示，MRSA檢出率呈下降趨勢(shì)，合計(jì)檢出率為18.8%。由于MRSA的不均一耐藥性，給其檢測(cè)帶來了一定的困難[12]。本研究中是否由于新的變異株不斷出現(xiàn)，使得檢出率下降有待進(jìn)一步研究探討。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌(MDRAB)檢出率合計(jì)為42.9%，呈上升趨勢(shì)，與近年文獻(xiàn)報(bào)道一致[13]。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)臨床常用抗菌藥物的耐藥性較嚴(yán)重，這可能與其復(fù)雜的耐藥機(jī)制有關(guān)[14]，對(duì)于鮑曼不動(dòng)桿菌引起的血流感染應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果謹(jǐn)慎選用抗菌藥物。產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌3年內(nèi)明顯升高，由于產(chǎn)酶菌株的出現(xiàn)將增加臨床治療中的困難，因此，在臨床治療中，臨床醫(yī)生應(yīng)對(duì)細(xì)菌耐藥性引起高度重視，且必須根據(jù)藥敏結(jié)果合理、有效地選用抗菌藥物[15]。

耐藥菌株出現(xiàn)和傳播，使臨床治療面臨極大挑戰(zhàn)。臨床醫(yī)生應(yīng)嚴(yán)格掌握抗菌藥物用藥指征，規(guī)范診療操作，以預(yù)防和控制血流感染感染。

參考文獻(xiàn)

[1]Bourneton O,Mutel T,Heranney D,et al.Incidence of hospital-acquired and community-acquired bloodstream infections in the university of Strasbourg Hospital,France,between 2005 and 2007[J].Pathol Biol(Paris),2010,58(1):29-34．

[2]Dellinger RP,Levy MM,Carlet JM,et al.Surviving sepsis campaign:international guidelines for management of severe sepsis and septic shock:2008[J].Intensive Care Med,2008,34(1):17-60.

[3]鄭姬,張曉兵,董彥芳,等.2006-2008年血培養(yǎng)主要病原菌的分布與耐藥性變遷[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2009,19(14):1868-1871．

[4]Clinical and Laboratory Standards Institute.M100-S21 Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].Wayne,PA,USA:CLIS,2011.

[5]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)(試行)[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2001,81(5):314-320.

[6]陳瀟,徐修禮,樊新,等.10941份血培養(yǎng)標(biāo)本中病原菌群分布及耐藥性分析[J].中國(guó)感染控制雜志,2010,9(4):264-266．

[7]孔繁林,儲(chǔ)從家,管新龍,等.28292份臨床血液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果[J].中國(guó)感染控制志,2011,10(3):209-213.

[8]褚云卓,年華,鄧宇欣,等.血培養(yǎng)的菌譜調(diào)查及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2007,17(4):472-474．

[9]王佩芳,凌春華,陳延斌,等.大腸埃希菌及肺炎克雷伯桿菌血流感染分布及藥敏分析[J].江蘇醫(yī)藥,2012,38(4):436-437．

[10]張鳳華,王大利．血培養(yǎng)陽性標(biāo)本病原菌分布及耐藥性分析[J].中國(guó)感染控制雜志,2008,7(6):412-415．

[11]魏澤慶,沈萍,陳云波,等．Mohnarin2011年度報(bào)告：血流感染細(xì)菌構(gòu)成及耐藥性[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(24):5497-5502.

[12]吳紹蓮,胡辛蘭,池春燕.血培養(yǎng)常見病原菌的變遷和耐藥性分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(2):138-140.

[13]焦江琴,李捷,陳雙雙.395株鮑曼不動(dòng)桿菌在臨床分布及藥敏分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(3):284-285.

[14]De Francesco MA,Ravizzola G,Peroni L,et al.Prevalence of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa in an Italian hospital[J].J Infect Public Health,2013,6(3):179-185.

[15]黨好,張任飛,潘淑,等.2012年肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥性分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(3):248-250.

·論著·

Analysis on composition of blood culture pathogenic bacteria and drug resistance

in a tertiary general hospital of Xiamen during recent three years

WangTao1,MaXiaobo1,LiXun1,FangLili1,ZhengGangsen1,HuangHuiping2,HongGuolin1△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory;2.DepartmentofInfectionManagement,FirstAffiliated

Hospital,XiamenUniversity,Xiamen,Fujian361003,China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the distribution and antimicrobial resistance situation of pathogens isolated from blood culture to provide the scientific basis for the accuratel use of antibacterial drugs and preventing and controlling nosocomial acquired bloodstream infection.MethodsThe US BACTEK -FK automatic blood culture instrument and the French VITEK 2 COMPACT automatic bacteria identification/susceptibility system were used to conduct the culture,identification of blood culture isolated bacterial strains and drug susceptibility test.The results of drug susceptibility test were judged by adopting the 2011 criteria of the Clinical Laboratory and Standards Institute(CLSI).ResultsThe main isolated bacteria from blood culture for the recent three years were E coli,staphylococcus aureus and klebsiella pneumonia bacteria,coagulase negative staphylococcus(CNS),etc.The proportions of hospital-acquired bloodstream infections during these period were 42.2%,46.9%and 54.1% respectively.The detection rate of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) was 18.8%,which of multiple drug resistant acinetobacter baumannii (MDRAB) was 42.9%,which of producing extended spectrum beta lactamase (ESBLs) in E.coli and klebsiella pneumoniae were 71.8% and 69.8% respectively.ConclusionThe bloodstream infections pathogens in this hospital are mainly Enterobacteriaceae bacteria,the proportion of hospital-acquired bloodstream infections increases year by year;the detection rate of multi-drug resistant Acinetobacter baumanni (MDRAB) is higher,clinic should pay more attention to the change of blood culture pathogens and their drug resistance trend,meanwhile nosocomial bloodstream infection should be prevented and controlled.

Key words:blood culture;drug resistance;hospital-acquired bloodstream infections

收稿日期：(2015-08-11)

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.008A

文章編號(hào)：1673-4130(2015)24-3527-03

通訊作者△，E-mail：18860089899@139.com。

作者簡(jiǎn)介：王濤，女，副主任檢驗(yàn)技師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作。