王銳，李陳雪，胡月，郭玉巖，李永吉

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040

超高效液相色譜法測定青藤散中青藤堿含量

王銳，李陳雪，胡月，郭玉巖，李永吉

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040

目的 建立超高效液相色譜法（UPLC）測定青藤散中青藤堿含量的方法。方法 采用UPLC，色譜柱為ACQUITY UPLC HSS C18（2.1 mm×50 mm，1.8 μm），流動相為乙腈-水-乙二胺（50∶50∶0.25），流速為0.2 mL/min，進樣量為2 μL，于檢測波長283 nm處對青藤堿進行含量測定。結(jié)果 出峰時間在1 min左右，青藤堿在34.2～2188.0 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。結(jié)論 本研究所建立的方法簡便快速、穩(wěn)定可靠，可用于青藤散中青藤堿的含量測定。

青藤散；青藤堿；超高效液相色譜法；含量測定

青藤散是以青風(fēng)藤提取物青藤堿（sinomenine）為原料，以糊精等為輔料制備的治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的外用經(jīng)皮給藥制劑。青藤堿是青風(fēng)藤抗炎、鎮(zhèn)痛、抗風(fēng)濕作用的主要有效成分[1]。目前，青藤堿的含量測定大多采用高效液相色譜法（HPLC），流動相主要為甲醇-水，出峰時間在10 min左右，這就使進樣周期延長，有可能出現(xiàn)樣品穩(wěn)定性存在差異等問題[2]。超高效液相色譜法（UPLC）的速度、靈敏度、分離度分別是HPLC的9、3、1.7倍，縮短了分析時間，同時減少了溶劑用量，降低了分析成本[3]。本試驗采用UPLC建立青藤散的質(zhì)量控制方法，為青藤堿相關(guān)的制劑研發(fā)、質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

ACQUITY UPLC H-Class超高液相系統(tǒng)，（上海）Waters 公司，包括四元泵、TUV可變波長紫外檢測器、Empower色譜工作站；AB265-S型分析天平，瑞士梅特勒，拓赫機電科技（上海）有限公司。

青藤散，課題組自制，批號20140310、20140311、20140312；青藤堿對照品，中國食品藥品檢定研究院，批號110774-200206；青藤堿原料藥（純度≥98％），成都曼斯特生物科技有限公司，批號12101704；乙腈（色譜純），賽默飛世爾科技（中國）有限公司；乙二胺，天津市啟邦化工產(chǎn)品銷售有限公司；水為屈臣氏蒸餾水；甲醇，西隴化工股份有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品溶液的制備

取青藤堿對照品約34.20 mg，精密稱定，加甲醇溶解，并定容至25 mL容量瓶中，作為對照品溶液，質(zhì)量濃度為1.368 mg/mL。

2.2 色譜條件

色譜柱：ACQUITY UPLC HSS C18（2.1 mm× 50 mm，1.8 μm）；流動相：乙腈-水-乙二胺（50∶50∶0.25）；流速：0.2 mL/min；檢測波長：283 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：2 μL。理論板數(shù)按青藤堿計算應(yīng)不（50∶50）為流動相時，保留時間適宜。今后也可根據(jù)試驗的不同要求調(diào)節(jié)流動相比例，以改變保留時間。

本試驗對自制青藤散中的青藤堿進行了含量測定，所采用的方法快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好，對青藤堿其他劑型制劑（微乳、脂質(zhì)體等）的質(zhì)量控制也具有指導(dǎo)意義。

[1]劉強,周莉玲,李銳,等.青藤堿的研究概況[J].中草藥,1997,28(4)：247.

[2]郭玉巖,李敏,史磊,等.HPLC法測定鹽酸青藤外敷散中鹽酸青藤堿含量[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2009,16(11)：42.

[3]傅曉燕,黃巧玲.HPLC與UPLC法對比測定兩種川芎藥材中阿魏酸的含量[J].中藥材,2011,34(7)：1070.

[4]沙振方,孫文基.青風(fēng)藤中青藤堿HPLC法測定[J].中藥材,1989, 12(10)：34.

[5]潘細(xì)貴,羅順德,張先洲,等.高效液相色譜法測定青藤堿片中青藤堿的含量[J].時珍國醫(yī)國藥,2001,12(7)：593.

Content Determination of Sinomenine in Sinomenine External Applied Powder by UPLC

WANG Rui, LI Chen-xue, HU Yue, GUO Yu-yan, LI Yong-ji (Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China)

Objective To establish an UPLC method for the determination of sinomenine in Sinomenine External Applied Powder. Methods The UPLC method was carried out on a C18column by using acetonitrile-water-ethylene diamine (50:50:0.25) as mobile phase. The flow rate was 0.2 mL/min; the sample quantity was 2 μL; the detection wavelength was 283 nm. Results The peak time was within 1 min or so. The calibration curve of sinomenine was in the linear range of 34.2–2188.0 ng. Conclusion The method is simple, rapid, stable and reliable, which can be used for the determination of sinomenine in Sinomenine External Applied Powder.

Sinomenine External Applied Powder; sinomenine; UPLC; content determination

10.3969/j.issn.1005-5304.2016.03.024

R284.1

A

1005-5304(2016)03-0089-03

國家自然科學(xué)基金（81473359）；黑龍江省自然科學(xué)基金（H201472）

李永吉，Tel：0451-87266893

（2015-04-27；編輯：陳靜）