李樹(shù)敏，陳曉梅，莫殿軍，趙曉薇

(內(nèi)蒙古自治區(qū)赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 024005)

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·臨床研究·

赤峰地區(qū)女性例人乳頭瘤病毒感染特征分析

李樹(shù)敏，陳曉梅，莫殿軍，趙曉薇△

(內(nèi)蒙古自治區(qū)赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 024005)

目的 探討分析赤峰地區(qū)女性人乳頭瘤病毒(HPV)感染情況，調(diào)查人乳頭瘤病毒基因分型以及年齡分布，為臨床治療及預(yù)防提供理論依據(jù)。方法 收集2015年在赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院婦科就診的1 357例宮頸分泌物標(biāo)本并進(jìn)行HPV基因型分析，采用反向膜斑點(diǎn)雜交技術(shù)，對(duì)分型結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 赤峰地區(qū)HPV感染陽(yáng)性率為23.21%(315/1 357)。高危型HPV感染陽(yáng)性率以HPV 16、18、31、33、52型感染為主，赤峰地區(qū)女性感染HPV年齡段間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以20～30歲為主并呈年輕化。結(jié)論 赤峰地區(qū)HPV感染率較高，多重感染陽(yáng)性率較高。應(yīng)對(duì)女性患者進(jìn)行HPV知識(shí)普及、女性衛(wèi)生知識(shí)宣傳并應(yīng)注意加強(qiáng)疫苗注射，降低病變的可能。

人乳頭瘤??； 基因分型； 感染

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種寄生在人類(lèi)表皮、黏膜和鱗狀上皮的感染病毒。形態(tài)為圓形DNA病毒。經(jīng)鑒定，HPV已有100余種亞型，容易引起人身體機(jī)黏膜和鱗狀上皮增生[1]。根據(jù)HPV特點(diǎn)將HPV分為高危型和低危型，高危型與女性宮頸癌變化有著密切關(guān)系，低危型與生殖器疣及尋常疣有關(guān)。我國(guó)宮頸癌發(fā)病率每年呈上升趨勢(shì)，HPV高危型是引起宮頸癌變的主要原因。發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)研制出HPV疫苗用于預(yù)防宮頸癌。本文將通過(guò)分析赤峰地區(qū)1 357例HPV檢測(cè)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)本地區(qū)HPV感染型別、年齡情況，為本地區(qū)提供HPV感染試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年來(lái)本院就診的患者共計(jì)1 357例，同一患者復(fù)檢剔除，年齡段為19～67歲，中位年齡為34.8歲。

1.2 儀器與試劑 采用ABI7500實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)儀器，采用艾康生物生產(chǎn)的HPV試劑盒，HPV基因分型能檢測(cè)25種型別，采用PCR-反向點(diǎn)雜交技術(shù)。25種HPV基因型，包括14種高危型：HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73型；3種疑似高危HPV 26、53、66型；8種低危型：HPV 6、11、40、42、43、44、81、83型。主要步驟：(1)混勻標(biāo)本后吸取標(biāo)本1 mL放置在1.5 mL離心管中，12 000 r/min離心5 min，棄去上清取沉淀加50 L核酸提取液、混勻，干浴10 min后，12 000 r/min離心10 min，取上層清液備用。HPV質(zhì)控品陰性、陽(yáng)性同標(biāo)本一同提取。(2)配置試劑。根據(jù)患者不同人數(shù)配置不同的試劑。(3)上樣。根據(jù)說(shuō)明書(shū)建立好擴(kuò)增條件。(4)雜交。配置好雜交液取膜條加50 LPCR產(chǎn)物后，放置雜交儀中42 ℃雜交1 h后、洗膜、顯色。

1.3 方法

1.3.1 采集標(biāo)本 由臨床醫(yī)師持?jǐn)U陰器擴(kuò)陰，用棉拭子將宮頸口過(guò)多分泌物擦去，再換取專(zhuān)用HPV采集拭子深入宮頸，通過(guò)上皮交界處旋轉(zhuǎn)10～20 s，取出拭子后放置在專(zhuān)用細(xì)胞保存液中密封送檢，一周內(nèi)檢測(cè)完成。

1.3.2 觀察結(jié)果 參照試劑盒說(shuō)明書(shū)判讀結(jié)果，膜條由CC點(diǎn)和IC點(diǎn)兩部分組成，CC點(diǎn)提示雜交過(guò)程正常，IC點(diǎn)提示顯示抽取人全基因組DNA成功。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析所得數(shù)據(jù)，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 赤峰地區(qū)女性HPV感染分析 送檢1 357例HPV標(biāo)本中，檢測(cè)出315例陽(yáng)性標(biāo)本，占所有標(biāo)本的23.21%。單一感染標(biāo)本117例，占陽(yáng)性標(biāo)本的37.14%(117/315)。混合型感染標(biāo)本198例，占陽(yáng)性標(biāo)本的62.86%(198/315)。HPV各種型別感染分別為HPV 83型占0.02%、HPV 81型占0.13%、HPV 44型占0.04%、HPV 43型占0.10%、HPV 42型占0.18%、HPV 40型占0.21%、HPV 11型占0.25%、HPV 6型占0.11%、HPV 8型占0.13%、HPV 66型占2.46%、HPV 53型占1.35%、HPV 26型占1.18%、HPV 73型占0.10%、HPV 68型占0.37%、HPV 59型占0.62%、HPV 58型占0.87%、HPV 56型占1.28%、HPV 52型占17.59%、HPV 51型占8.91%、HPV 45型占1.46%、HPV 39型占2.81%、HPV 35型占7.23%、HPV 33型占11.24%、HPV 31型占10.26%、HPV 18型占12.47%、HPV 16型占18.63%。

2.2 赤峰地區(qū)感染HPV女性年齡分布 本研究發(fā)現(xiàn)，赤峰地區(qū)女性感染HPV的年齡段間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HPV感染構(gòu)成比最高的年齡段為20～30歲，占31.68%。其余年齡段分別為：小于或等于19歲占7.64%，31～40歲占21.12%，41～50歲占24.27%，大于或等于51歲占15.29%。

3 討 論

HPV的感染與宮頸癌有密切關(guān)聯(lián)，宮頸癌在婦科發(fā)病率位居第2位。女性感染HPV的概率為70%～80%，其中約有1/3的患者會(huì)發(fā)生宮頸肉瘤樣改變，增加宮頸癌的發(fā)病率。HPV的感染可誘發(fā)其他腫瘤發(fā)生(如乳腺癌、子宮頸癌、結(jié)膜鱗狀細(xì)胞癌、陰莖癌、前列腺癌)[2]。在我國(guó)，宮頸癌每年發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，是嚴(yán)重威脅女性健康的主要疾病之一，有報(bào)道稱(chēng)HPV的感染存在地區(qū)、年齡差異[3]，不同年齡患者感染HPV的風(fēng)險(xiǎn)不同。本試驗(yàn)中1 357例標(biāo)本中陽(yáng)性標(biāo)本占23.21%，檢出率較高型別為HPV 16、18、31、33、52型；其中主要感染年齡段為20～30歲，呈年輕化。赤峰地區(qū)單一感染標(biāo)本117例，占陽(yáng)性標(biāo)本的37.14%(117/315)；混合型感染標(biāo)本198例，占陽(yáng)性標(biāo)本的62.86%(198/315)。提示赤峰地區(qū)HPV感染以多重感染為主。此外，有文獻(xiàn)報(bào)道陜西省西安市HPV總感染率為33%，較常見(jiàn)感染型別為HPV 6、16、18、52、58型[4]；浙江省HPV感染率為13%，以HPV 16、52、58、68、81為主要流行亞型[5]。 文獻(xiàn)報(bào)道內(nèi)蒙古西部HPV感染的主要年齡段為30～40歲[6]；北京地區(qū)HPV感染的主要年齡段為20～30歲和50歲以上。本研究中，赤峰地區(qū)HPV感染主要年齡段為20～30歲。上述文獻(xiàn)表明，HPV高危亞型分別為HPV 16、52、58型，而感染較集中年齡段為20～30歲，HPV感染率、主要流行亞型在各地區(qū)間仍存在差異。HPV感染與多種因素有關(guān)，性行為為傳播途徑之一。患者同時(shí)存在多個(gè)性伴侶，感染概率可能進(jìn)一步提高[7]。單一型HPV感染后會(huì)自行恢復(fù)，但是HPV型別不同，其恢復(fù)程度也不相同，此與個(gè)人體質(zhì)和免疫功能有關(guān)。多重感染HPV患者癌變可能性會(huì)加大，HPV型別決定宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅲ級(jí)病變的風(fēng)險(xiǎn)。目前，西方國(guó)家已有HPV疫苗誕生，主要為HPV 16、18型別，仍不能完全預(yù)防其他型別[8]。

針對(duì)本地區(qū)HPV感染情況，選擇適合本地區(qū)的預(yù)防措施和有效治療方法，才能有效降低宮頸癌的發(fā)病率。上述文獻(xiàn)報(bào)道表明，早發(fā)現(xiàn)、早治療是預(yù)防HPV感染的有效措施[9]，需要定期對(duì)高危人群進(jìn)行及時(shí)隨訪，建立健康檔案，對(duì)患者定期舉辦有關(guān)HPV健康講座以及生活指導(dǎo)，給予患者講解主動(dòng)篩查HPV的意義[10]。我國(guó)多地由于公共衛(wèi)生知識(shí)不夠和性教育的缺失，導(dǎo)致許多患者覺(jué)察患病時(shí)已到晚期，錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)期。因此，應(yīng)加強(qiáng)普通人群的HPV宣傳和性行為教育，以降低HPV感染。此外，HPV感染要結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)，更好地進(jìn)行癌變區(qū)分[11]?？傊皶r(shí)了解本地區(qū)和其他地區(qū)的HPV感染型別，對(duì)日后工作能提供很較幫助；患者要做到早發(fā)現(xiàn)、早治療，才能有效降低降低癌變的可能性。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.038

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1673-4130(2016)21-3048-02

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