趙　森　姜　黎　鄒　明

（大連大學附屬中山醫(yī)院配夜中心，大連　116001）

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正交試驗法優(yōu)選兩面針緩釋片制備工藝

趙森姜黎鄒明*

（大連大學附屬中山醫(yī)院配夜中心，大連116001）

摘要：目的確定兩面針緩釋片的制備工藝。方法采用正交實驗法，以HPMC用量、乳糖用量、HPMC目數(shù)為優(yōu)選因素，以2、6、12 h三個時間點的釋放度的綜合評分為指標，確定合理的兩面針緩釋片制備工藝。結果最佳制備工藝為即兩面針提取物13.2 g，HPMCK4M4 g，目數(shù)為180目以上，乳糖0.5 g，90％乙醇液適量，1％硬脂酸鎂做潤滑劑。工藝重現(xiàn)性好。

關鍵詞：兩面針緩釋片；正交試驗；紫外分光光度法

兩面針藥味辛、苦、微溫，小毒，具有祛風通絡、勝濕止痛、消腫解毒等作用[1]。主要成分為生物堿，兩面針緩釋片主要用止痛[2]，制成緩釋制劑后，提高中藥的利用率。此類片劑口服后遇消化液發(fā)生水化作用生成凝膠，通過凝膠的屏障作用來控制藥物的釋放速度[3-9]。與其他的緩釋劑型相比，緩釋片具有生產(chǎn)工藝簡單，調(diào)節(jié)方法多樣，安全性高等顯著特點。

1儀器與試藥

DF-2壓片機（深圳制藥裝備有限公司）；MJ-22型數(shù)顯電熱恒溫干燥箱（廣州科學儀器公司）；ZRS-4智能溶出試驗儀(天津大學無線電廠)；羥丙基甲基纖維素(HPMCK4M、HPMCK15M、HPMCK100M) (營口奧達公司)；兩面針提取物(自制總堿含量：39.0％；批號：080601)；可溶性淀粉（上海試劑廠）；乳糖（日本旭化株式會社）；硬酯酸鎂(沈陽試劑廠)；兩面針藥材購自安徽亳州藥材公司，經(jīng)康廷國教授鑒定為蕓香科花椒屬植物兩面針的干燥根，為正品，符合藥典規(guī)定；氯化兩面針堿對照品（99.8％）購自中國藥品生物制品檢定所提供(批號：848-9901)；實驗試劑均為色譜純。

2實驗方法

2.1方法學考察

2.1.1對照品溶液制備取氯化兩面針堿對照品12.24 mg，精密稱定，置50 ml容量瓶中，加甲醇適量使溶解，放冷，用甲醇稀釋至刻度，即得。

2.1.2供試品溶液的制備取兩面針提取物0.05 g，精密稱定，定容至100 ml容量瓶中，用微孔濾膜(0.45 μm)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.1.3空白溶液的制備取鹽酸9 ml加入1000 ml水中，搖勻，即得。

2.1.4標準曲線精密吸取對照品溶液，0.5 ml、0.8 ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml，置10 ml容量瓶內(nèi)，以人工胃液稀釋至刻度，328 nm測定吸收度，得回歸方程A= 0.1901C+0.0098 r=0.9999，結果表明兩面針堿在1.224 μg～4.896 μg范圍內(nèi)線性關系符合規(guī)定。

2.1.5精密度試驗精密稱取兩面針提取物適量，測定其吸收值結果RSD=0.33％，精密度良好。

2.1.6穩(wěn)定性試驗制備濃度為20 μg/ml的兩面針的供試品，溶液液。分別在0、2、4、6、8、10 h測定其吸收值，結果RSD=0.38％，符合規(guī)定。

2.1.7重復性試驗精密稱取兩面針提取物5份，按照供試品溶液制備方法，制備成濃度為20 μg/ml的供試品溶液，分別測定其吸收值，結果RSD=0.64％，結果符合規(guī)定。

2.1.8加樣回收率試驗取供試品6份，精密稱定，分別置100 ml容量瓶中，加入濃度為24.48 μg/ml的對照品溶液50 ml，溶解，稀釋至刻度，搖勻。測定吸光度，代入回歸方程，以測得量對加入量計算回收率，結果見表1。

表1　回收率試驗結果

結果表明，回收率符合規(guī)定。

2.2體外釋放度測定方法的建立精密稱取兩面針堿含量為42.8％的提取物13.2 g，其他輔料以等量遞增法混勻，以90％乙醇為潤濕劑制顆粒，過篩，壓片，片重為0.5 g。按照《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄XD，采用轉籃法，轉速100 r/min。溫度（37± 0.5）℃，以人工胃液即鹽酸溶液（9→1000 ml）為釋放介質(zhì)，模擬人體環(huán)境，在0、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h分別取樣5 ml，濾過，取續(xù)濾液，測定兩面針緩釋片的體外釋放度，以人工胃液為空白在328 nm測定吸收值。代入標準曲線，分別計算累積釋藥量。

2.3正交試驗設計通過預實驗，選擇HPMC用量、乳糖用量、HPMC目數(shù)，三個因素。每個因素設3個水平進行正交試驗，因素水平見表2。

表2　因素水平表

以2 h、6 h、12 h的吸光度代入回歸方程后計算累積釋放度，a.藥物2h的累積釋放度F2，以0.20為標準；b.藥物6 h的累積釋放度F6，以0.70為標準；c.兩面針總生物堿12 h的累積釋放度Fl2，以0.90為標準，將各指標的權重系數(shù)定為1，結果進行加權相加后得出總分，公式為：

L= {F2—0.20×1×100+F6—0.70×1×100+F12—0.90} ×1×100，L值越小，因素的水平數(shù)越佳。采用正交設計助手Ⅱ軟件進行數(shù)據(jù)處理。

表3　正交試驗安排及結果

續(xù)表3　正交試驗安排及結果

表4　方差分析表

各因素對藥物釋放影響的大小次序為：A>C>B。其中A有顯著性影響，最佳方案為：A2B1C3。即HPMCK4M4g，目數(shù)為180目以上，乳糖0.5 g。

3工藝重現(xiàn)性考察

取兩面針提取物13.2 g，HPMCK4M4g，目數(shù)為180目以上，乳糖0.5 g，90％乙醇液適量，1％硬脂酸鎂做潤滑劑，制備3批，按2.2項下測定。

表5　工藝重現(xiàn)性考察結果

圖1工藝重現(xiàn)性考察

結果表明，兩面針緩釋片具有良好的重現(xiàn)性。

4討論與結論

首先我們隊骨架材料進行了篩選，黏度依次增加的三種骨架材料分別為HPMCK4M、HPMCK15M、HPMCK100M，對兩面針緩釋片的釋放度有顯著性影響，黏度增加，釋放藥物較緩，為保證2，、6、12小時的藥物釋放量，我們選擇了黏度最小的HPMC，即HPMCK4M。其用量對兩面針堿的釋放影響較大，用量增加凝膠增厚，藥物擴散緩慢，當HPMCK4M用量占片重的20％時，釋放曲線較好。所有我們將HPMCK4M占片重的比重設置三水平，進一步優(yōu)化HPMCK4M用量。

通過預實驗，提取物中兩面針堿含量對緩釋釋藥行為影響不大。對填充輔料進行了篩選，各輔料對釋藥速率影響為淀粉>乳糖，淀粉遇水膨脹使骨架斷裂，不宜作為HPMC填充輔料，而乳糖為水溶性輔料，溶解后產(chǎn)生擴散孔道及孔隙，對藥物釋放度影響顯著，通過預實驗后，最終優(yōu)化乳糖用量，潤滑劑硬脂酸鎂用量在0.1％～1.0％的范圍內(nèi)對藥物的釋放無影響，用量為1％時，顆粒流動性好，便于壓片，外觀美觀。

采用L9（34）正交試驗設計，以綜合評分法為評價標準，各因素對藥物釋放影響的大小次序為：HPMCK4M用量> HPMC目數(shù)>乳糖用量，確定了最佳處方兩面針提取物330g，HPMCK4M100g，目數(shù)為180目以上，乳糖12.5 g，90％乙醇液適量，1％硬脂酸鎂做潤滑劑。

為兩面針體外釋放提供可靠依據(jù)，確定了兩面針緩釋片的體外釋放度測定方法且工藝重現(xiàn)性好。將兩面針緩釋片體外釋放度在2 h、6 h、12 h的釋放度分別確定為20％～30％、50％～70％、90％以上。釋放度良好，釋藥基本完全。

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Optimization of Preparation Technology of Zanthoxylumnitidum Sustained Release Tablets by Orthogonal Test

ZHAO Sen, JIANG Li, ZOU Ming

(Compounding Center, The Affiliated Zhongshan Hospital of Dalian University, Liaoning Province, Dalian 116001, China)

Abstract:Objective To determine the preparation technology of Zanthoxylumnitidum sustained release tablets.Methods Using the orthogonal experiment method, taking the amount of HPMC and lactose, HPMC mesh for the optimization factors, considering the comprehensive score of 2, 6, 12 hours of release as index, reasonable Zanthoxylumnitidum sustained-release tablet preparation process was determined.Results The best preparation for the Zanthoxylumnitidum extract was 13.2g, 4g HPMCK4M, more than 180 mesh, 0.5 g lactose, 90％ ethanol liquid and 1％ magnesium stearate as lubricant.The process has good reproducibility.

Keywords:Zanthoxylumnitidum sustained release tablets; orthogonal test; ultraviolet spectrophotometric method

收稿日期：（本文編輯：楊杰本文校對：韓瑩旻2016-01-22）

*通訊作者：zsyyyjk@sina.com

doi:10.3969/j.issn.1672-2779.2016.07.067

文章編號：1672-2779（2016）-07-0140-03