陳寧，曹鳳宏，陳晨，李治國(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院，河北唐山063000；華北理工大學(xué))

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GNAI2在前列腺癌組織中的表達(dá)及意義

陳寧1，曹鳳宏1，陳晨1，李治國2(1華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院，河北唐山063000；2華北理工大學(xué))

摘要：目的探討G蛋白α抑制劑2(GNAI2)在前列腺癌組織中的表達(dá)及其在前列腺癌發(fā)病中的意義。方法選擇前列腺癌及良性前列腺增生病理切片各30例，收集前列腺癌患者年齡、血清前列腺特異性抗原(PSA)水平、前列腺體積、Gleason總分、Gleason主要分級、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等資料。采用免疫組化染色法檢測兩種組織中GNAI2蛋白的表達(dá)，分析GNAI2蛋白與前列腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果前列腺癌、良性前列腺增生組織中GNAI2陽性表達(dá)率分別為60.0%(18/30)、6.7%(2/30)，前列腺癌組織中GNAI2陽性表達(dá)率高于良性前列腺增生組織(P<0.05)。前列腺癌患者臨床分期為T1+T2者GNAI2蛋白陽性表達(dá)率低于T3+T4者(P<0.05)。結(jié)論前列腺癌組織中GNAI2表達(dá)增高，可能對前列腺癌的發(fā)生發(fā)展起促進(jìn)作用。

關(guān)鍵詞：GNAI2；前列腺癌；前列腺增生

前列腺癌是嚴(yán)重威脅中老年男性生命的惡性腫瘤[1]。隨著我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展及醫(yī)療水平的提高，每年檢出的前列腺癌患者數(shù)量也在逐漸升高。但確診前列腺癌時患者大多已處于晚期，此時行前列腺癌根治性手術(shù)治療的療效并不理想。因此尋找有助于前列腺癌早期診斷且可作為治療靶點的分子標(biāo)志物，對于前列腺癌的診斷及治療具有重要意義。G蛋白α抑制劑2(GNAI2)是抑制型G蛋白，能夠?qū)ο佘账岘h(huán)化酶產(chǎn)生抑制性作用，使細(xì)胞內(nèi)第二信使(cAMP)含量降低，從而產(chǎn)生相應(yīng)的生物學(xué)反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，GNAI2蛋白在前列腺癌和良性前列腺增生組織中的表達(dá)存在差異[2,3]。我們對2007～2014年60例前列腺癌和良性前列腺增生組織中GNAI2蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測，分析GNAI2蛋白與前列腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系，探討GNAI2在前列腺癌發(fā)病中的意義。現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2007～2014年華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院病理科收集的前列腺癌及良性前列腺增生病理切片各30例，均為手術(shù)切除獲取并經(jīng)術(shù)后病理檢查確診。前列腺癌患者術(shù)前均未經(jīng)抗雄激素及放療處理。排除合并其他惡性腫瘤疾病、既往有前列腺手術(shù)史及合并其他嚴(yán)重內(nèi)科疾病者。收集前列腺癌患者年齡、血清前列腺特異性抗原(PSA)水平、前列腺體積、Gleason總分、Gleason主要分級、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床資料。

1.2GNAI2蛋白表達(dá)檢測采用免疫組化染色法。切片脫蠟、脫水，高壓修復(fù)抗原后，滴加一抗GNAI2(1∶500)4 ℃過夜。第2天PBS沖洗后，滴加二抗，37 ℃恒溫箱中孵育25 min，PBS沖洗，顯微鏡下DAB顯色，蘇木素復(fù)染。用PBS代替一抗作為陰性對照。GNAI2蛋白主要定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。評分方法：按染色強(qiáng)度，無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。再將陽性細(xì)胞所占的百分比計分，陽性細(xì)胞≤10%為1分，>10%～50%為2分，>50%～75%為3分，>75%為4分。以染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分比的乘積>3為陽性。由兩位病理科醫(yī)生在雙盲條件下完成。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。率的比較采用χ2檢驗Fisher確切概率法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1前列腺癌與良性前列腺增生組織中GNAI2蛋白表達(dá)比較前列腺癌、良性前列腺增生組織中GNAI2陽性表達(dá)率分別為60.0%(18/30)、6.7%(2/30)，前列腺癌組織中GNAI2陽性表達(dá)率高于良性前列腺增生組織(P<0.05)。

2.2前列腺癌患者GNAI2蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系臨床分期T1+T2者GNAI2蛋白陽性表達(dá)率低于T3+T4者(P<0.05)。見表1。

表1　　　　前列腺癌患者GNAI2蛋白表達(dá)與臨床病理

3討論

前列腺癌是泌尿外科常見的惡性腫瘤疾病，是導(dǎo)致老年男性發(fā)生各種嚴(yán)重并發(fā)癥甚至死亡的重要原因。目前對于前列腺癌的診斷主要依靠PSA檢測、泌尿系彩超、前列腺核磁共振、下腹部+盆腔CT、全身骨顯像等檢查方法，但最終確診需要行前列腺穿刺活檢術(shù)進(jìn)行病理學(xué)檢查[4]。目前對于前列腺癌診斷最常用的是PSA檢測，但PSA水平容易受各種疾病及因素的影響，增加了診斷前列腺癌的難度[5]。以上方法均存在很多不足，對于前列腺癌臨床癥狀不明顯的早期患者往往難以確診。因此，尋找有助于前列腺癌早期診斷的生物分子靶點具有重要意義。

目前蛋白組學(xué)與基因組學(xué)成為生命科學(xué)研究的重點與熱點，其對于尋找惡性腫瘤的生物標(biāo)志物具有重要意義[6,7]。G蛋白又稱為鳥苷酸結(jié)合蛋白，由α、β及γ亞基組成，具有GTP酶活性，是生物信息傳遞過程中關(guān)鍵的中介體，活性狀態(tài)的G蛋白會激活腺苷酸環(huán)化酶系統(tǒng)(AC系統(tǒng))，產(chǎn)生第二信使，進(jìn)而產(chǎn)生一系列生物學(xué)效應(yīng)[8]。根據(jù)G蛋白α亞基在信號通路中產(chǎn)生的生物學(xué)作用，可以將G蛋白分為激活型G蛋白和抑制型G蛋白兩種類型，GNAI2基因?qū)儆谝种菩虶蛋白的一個亞型。研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌與前列腺增生之間存在著大量差異蛋白[9]。在對GNAI2蛋白與惡性腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)，GNAI2表達(dá)增高對舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的遷移和侵襲起促進(jìn)作用[10]。在肝癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移過程中，GNAI2的表達(dá)水平與肝癌的侵襲和轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)[11]。研究發(fā)現(xiàn)，催產(chǎn)素對前列腺癌細(xì)胞的遷移起促進(jìn)作用，并通過抑制型G蛋白信號通路發(fā)生作用，而GNAI2靶向小干擾RNA可抑制催產(chǎn)素對前列腺癌細(xì)胞遷移促進(jìn)作用，表明在前列腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移過程中，GNAI2發(fā)揮著重要作用[12]。目前對于GNAI2蛋白在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中作用的研究較少。本研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌組織中GNAI2陽性表達(dá)率高于良性前列腺增生組織，前列腺癌患者臨床分期為T1+T2者GNAI2蛋白陽性表達(dá)率低于T3+T4者，提示GNAI2蛋白在前列腺癌中表達(dá)量較高， GNAI2蛋白含量與前列腺癌患者的惡性程度有關(guān)，表明GNAI2蛋白在前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。

綜上所述，前列腺癌組織中GNAI2陽性表達(dá)率高于良性前列腺增生組織，前列腺癌患者臨床分期為T1+T2者GNAI2蛋白陽性表達(dá)率低于T3+T4者，GNAI2可能對前列腺癌的發(fā)生發(fā)展起促進(jìn)作用，可以作為前列腺癌診斷及治療的有效靶點。

參考文獻(xiàn)：

[1] Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics, 2015[J]. Cancer J Clin, 2015,65(1):5-29.

[2] Sandvig K, Llorente A. Proteomic analysis of microvesicles released by the human prostate cancer cell line PC-3[J]. Mole Cell Proteomics, 2012,11(7): 12914.

[3] Ummanni R, Junker H, Zimmermann U, et al. Prohibitin identified by proteomic analysis of prostate biopsies distinguishes hyperplasia and cancer[J]. Cancer Lett, 2008,266(2):171-185.

[4] 王躍,周文生. 前列腺癌診斷方法及研究進(jìn)展[J]. 中華全科醫(yī)學(xué), 2010,8(3):366-367.

[5] Castle PE. PSA testing for prostate cancer screening[J]. Lancet Oncol, 2015,16(1):2-3.

[6] Wu JY, Cheng CC, Wang JY, et al. Discovery of tumor markers for gastric cancer by proteomics[J]. PLoS One, 2014,9(1): 84158.

[7] 鄭美華,陳小軍,陳巧芬. 癌癥生物標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J]. 腫瘤防治研究,2010,37(6): 729-731.

[8] 李曉輝. G蛋白亞單位基因家族等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子研究進(jìn)展[J]. 解放軍藥學(xué)學(xué)報, 2004,20(3):205-208.

[9] 陳晨,曹笑歌,張立國,等.基于文獻(xiàn)挖掘的前列腺癌蛋白組學(xué)與基因組學(xué)差異基因的生物信息學(xué)分析[J].中國全科醫(yī)學(xué), 2015,18(32):4011-4016.

[10] Jiang L, Dai Y, Liu X, et al. Identification and experimental validation of G protein alpha inhibiting activity polypeptide 2 (GNAI2) as a microRNA-138 target in tongue squamous cell carcinoma[J]. Human Genetics, 2010,129(2): 189-197.

[11] Yao J, Liang L, Huang S, et al. MicroRNA-30d promotes tumor invasion and metastasis by targeting Galphai2 in hepatocellular carcinoma[J]. Hepatology, 2010,51(3):846-856.

[12] Zhong M, Clarke S, Vo B, et al. The essential role of Gi 2 in prostate cancer cell migration[J]. Molec Can Res, 2012,10(10):1380-1388.

(收稿日期：2015-09-27)

中圖分類號：R737.25

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)14-0091-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.14.035