閔莉靜 鄭衛(wèi)紅 趙明星 葛海霞
摘 要 提出了酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖工藝,并優(yōu)化提取條件,最終獲得到最佳提取工藝條件為,纖維素酶、果膠酶之比(V∶m)為1∶2、超聲溫度80 ℃、超聲時(shí)間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%、超聲功率300 W、超聲次數(shù)3次。
關(guān)鍵詞 中華蘆薈多糖;酶;超聲;提取工藝
中圖分類號(hào):TQ461 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B 文章編號(hào):1673-890X(2016)01--02
中華蘆薈又稱斑紋蘆薈,是庫拉索蘆薈的變種,屬于可食蘆薈。具有一定的藥用價(jià)值。蘆薈多糖能扶正祛邪,增強(qiáng)免疫,美容護(hù)膚,抗腫瘤,降血脂、血糖,有助于肝炎、腎炎、紅斑狼瘡等病的治療,有利于老年人的保健[1]。
本文在參考傳統(tǒng)提取方法的基礎(chǔ)上,創(chuàng)新性地提出酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖,并通過單因素和正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取條件。
1 材料與方法
1.1 材料
無水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、苯酚、濃硫酸、果膠酶、纖維素酶、中藥粉碎機(jī)、超聲清洗儀、烘箱、電子天平和紫外分光光度計(jì)。
1.2 方法
1.2.1 酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖
新鮮、肥厚的中華蘆薈若干,清洗,小心去皮,取肉質(zhì)部分,攪碎,加水浸泡過夜,加果膠酶/纖維素酶作用2 h,超聲恒溫水浴加熱,4層紗布過濾得濾液,濃縮,攪拌,滴加入乙醇溶液中,5 000 r/min離心5 min,取上清,用丙酮、無水乙醇、乙酸乙酯洗滌離心得沉淀,烘干。
稱取樣品若干溶于水,移入2 mL比色管中,加入1.0 mL 6%苯酚溶液及5.0 mL濃硫酸,靜置20 min,搖勻,40 ℃放置15 min。以空白組作試劑空白,于490 nm處測(cè)吸光度值。
1.2.2 工藝優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
酶種類:果膠酶/纖維素(mL∶g)為0∶0、0 ∶0.1、0.1∶0、0.2∶0.1、0.1∶0.2、0.2∶0.2、0.2∶0.3。料液比為1∶5、1∶10、1∶20。超聲時(shí)間:20、30、40、50、60 min。超聲溫度為40、50、60、70、80 ℃。超聲功率為40、60、80、100 W。超聲次數(shù)響:1、2、3、4、5次。乙醇濃度:滴加入1、2、2.5、3、3.5倍體積95%乙醇沉淀。
在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)見表1。
2 結(jié)果與分析
優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,酶的加入有利于多糖的提取,綜合考慮成本及效率,確定纖維素酶:果膠酶(v∶m)比例為1∶2;溶劑的增加對(duì)產(chǎn)率為負(fù)增長(zhǎng),說明溶劑的量不是提取的關(guān)鍵,確定料液比1∶5;乙醇濃度為80%時(shí),蘆薈多糖提取產(chǎn)率最高。
超聲時(shí)間對(duì)多糖產(chǎn)率的幫助呈現(xiàn)先增后趨于穩(wěn)定,確定超聲時(shí)間應(yīng)為50 min;超聲時(shí)間對(duì)多糖產(chǎn)率的幫助呈現(xiàn)先增后減,確定超聲溫度為70 ℃。超聲功率和超聲次數(shù)對(duì)蘆薈多糖的提取產(chǎn)率影響均不是很大,考慮能耗和效率,最終超聲功率為60 W、超聲次數(shù)為3次;
正交試驗(yàn)結(jié)果表明,在4種因素的作用下,對(duì)中華蘆薈多糖產(chǎn)率影響的排序?yàn)槌暅囟?超聲時(shí)間>料液比>乙醇濃度,最終確定最佳提取條件為A3C3B3D2,即超聲溫度80 ℃、超聲時(shí)間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%。
3 結(jié)論與討論
本試驗(yàn)優(yōu)化了由酶-超聲聯(lián)用雙輔助提取中華蘆薈多糖的提取工藝,最佳提取工藝條件為,纖維素酶:果膠酶(v∶m)為1∶2、超聲溫度80 ℃、超聲時(shí)間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%、超聲功率300 W、超聲次數(shù)3次。
參考文獻(xiàn)
[1]陳闖,邵淑麗,李懷永,等.蘆薈多糖藥理作用及提取工藝研究[J].高師理科學(xué)刊,2014(4):55-57
(責(zé)任編輯:趙中正)