陳　強，王　瑞

(1.信陽市動物疫病預防控制中心，河南 信陽 464000；2.信陽農林學院 牧醫(yī)工程學院，河南 信陽 464000)

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豫南地區(qū)豬場豬高熱病的調查分析與防控

陳強1，王瑞2

(1.信陽市動物疫病預防控制中心，河南 信陽 464000；2.信陽農林學院 牧醫(yī)工程學院，河南 信陽 464000)

摘要：調查了豫南地區(qū)數(shù)家豬場豬高熱病的發(fā)生原因,對送檢病例進行了分子生物學和細菌學實驗室檢測。結果表明,該地區(qū)豬場原發(fā)性疾病為多病原混合感染所致。

關鍵詞：豬場；豬高熱?。徽{查分析；防控措施

豬高熱病又稱豬無名高熱綜合癥，是指以豬體溫升高、皮膚發(fā)紅和呼吸急促等臨床癥狀為主要特征的豬病。從2006年5月在安徽、江西、浙江、湖南、湖北、江蘇等省部分地區(qū)發(fā)生并命名為豬高熱病[1]。2015年10月下旬以來，在河南省南部地區(qū)數(shù)家豬場發(fā)生疑似豬高熱病現(xiàn)象，病程持續(xù)，病死率高，對豬場造成了較大的經(jīng)濟損失，現(xiàn)以接診的三家不同規(guī)?；i場為例，淺談對此類疾病診治的認識。

1發(fā)病經(jīng)過

病例一 河南省信陽市潢川縣某母豬存欄100頭豬場，于2015年12月10日先從體重30斤左右仔豬開始發(fā)病，表現(xiàn)為發(fā)燒、喘氣、采食下降，伴有跛行。同時產(chǎn)房仔豬有腹瀉現(xiàn)象。育肥豬群出現(xiàn)喘氣、臥地不起、一般發(fā)病3～5天后即可死亡，發(fā)病率在50%，死亡率在20%。

病例二 河南省駐馬店市遂平縣某存欄母豬200頭豬場，于2015年12月17日出現(xiàn)體重在160～200斤豬只發(fā)燒、耳部和后驅發(fā)紫，呼吸困難，發(fā)病率在30%，死亡率在40%。

病例三 河南省南陽市唐河縣某存欄母豬600頭豬場，于2015年12月18日先從體重在100斤左右豬只發(fā)病，表現(xiàn)為高熱不退，采食量下降50%，大群擠壓在一起，個別皮膚發(fā)紅、零星有流鼻涕。半個月內波及到3棟，前后損失有110頭。

2免疫程序及治療經(jīng)過

發(fā)病場一 飼料添加替米考星和氟苯尼考。病豬單獨使用氟苯尼考注射液。該場母豬豬瘟和偽狂犬及豬藍耳病疫苗每年普免3次，商品豬豬瘟疫苗在21天和55～60天免疫，偽狂犬只在斷奶時免疫1次。

發(fā)病場二 病豬注射頭孢類藥物及氟苯尼考。該場母豬免疫豬瘟、偽狂犬、藍耳病疫苗，豬瘟跟胎免疫，其余按季度普免。商品豬豬瘟疫苗在21天和55～60天免疫，偽狂犬疫苗3天內滴鼻，豬瘟二免后間隔一周加強免疫一次。商品豬藍耳疫苗在14日齡時免疫。

發(fā)病場三 大群使用清瘟敗毒散、荊防敗毒散、氟苯尼考。病豬使用清開靈注射液、頭孢噻呋，該場母豬豬瘟、偽狂犬、豬藍耳病疫苗每年普免3次。商品豬豬瘟疫苗在21天和55～60天免疫，偽狂犬在1日齡和35日齡免疫。商品豬圓環(huán)與藍耳疫苗在14日齡同時免疫。

3病理剖檢

發(fā)病場一：病死肥豬肺臟淤血，肺葉部分區(qū)域有紫紅色實變區(qū)，氣管內充斥粘液。

發(fā)病場二：肺尖葉、心葉、膈葉肉變。肺間質增寬、出血，脾臟卷曲，淋巴黃疸。

發(fā)病場三：肺臟大葉性肺炎，脾臟敗血，淋巴結出血。

4病原體檢測

4.1RT-PCR檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬瘟病毒

4.1.1引物的設計根據(jù)GenBank已發(fā)表的序列,應用PrimerPremier5. 0軟件設計豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬瘟病毒引物。上游引物: 5’-CCTGCACCGCGTAGAACTG-3’,下游引物: 5’-GCGAAACGCCTGGTAAGC-3’。引物擴增特異性目的片段，出現(xiàn)540bp大小條帶判斷為 PRRSV經(jīng)典株陽性，出現(xiàn)450bp大小帶判斷為PRRSV缺失株陽性。上游引物5’-CTCCCTGGGTGGTCTAAG-3’,下游引物: 5’-GGTTCCTCCACTCCCATTG-3’。出現(xiàn)290bp大小條帶判斷為 CSFV陽性。引物由上海生工公司合成。

4.1.2RNA的提取根據(jù)動物總RNA快速提取試劑盒(Trizol-離心株型)說明書操作。試劑購自上海捷瑞生物工程有限公司[2]。

4.1.3反轉錄程序RNA模板4μL，5*反轉錄緩沖液4μL，dNTP mix 2μL，反轉錄引物(CSFV-A和PRRSV-A混合物，均為10μM)2μL，反轉錄酶1μL，RNA酶抑制劑1μL。42℃ 45min。65℃ 5min，4℃ 10min?；蚪MRNA反轉錄試劑盒購自Thermo公司[2]。

4.1.4RT-PCR擴增體系2ⅹ MasterMix 12.5μL，PRRSV與CSFV上游和下游引物各0.5μL, DNA模板3μL, 無菌雙蒸水7.5μL。95℃預變性5min，然后95℃變性30s，53℃ 退火30s，72℃延伸30s，35個循環(huán)后，72℃延伸10 min。2ⅹPower PCR MasterMix 購自北京百泰克生物技術公司[2]。

4.2PCR檢測豬偽狂犬病毒

4.2.1引物的設計根據(jù)GenBank已發(fā)表的序列,應用PrimerPremier5. 0軟件設計豬偽狂犬病毒引物。引物序列為：上游引物: 5’-ATGGGCATCGGCGACTACCT-3’；下游引物: 5’- GCGAGAAGAGCTGCGAGTGGA-3’。引物擴增特異性目的片段，出現(xiàn)270bp大小條帶判斷為 PRV陽性。引物由上海生工生物工程技術服務有限公司合成[2]。

4.2.2DNA的提取按偽狂犬病病毒DNA提取和純化試劑盒說明書進行病料組織中DNA提取及純化。試劑購自上海捷瑞生物工程有限公司。

4.2.3PCR擴增體系2ⅹMasterMix 12.5μL , PRV上游和下游引物各2μL, DNA模板8.5μL。95℃預變性5min，然后95℃變性30s，63℃退火30s，72℃延伸30s，35個循環(huán)，72℃延伸10 min。反應結束后產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，在凝膠成像系統(tǒng)上觀察是否有目的條帶出現(xiàn)。DNA Marker購自寶生物工程(大連)有限公司[2]。

4.3細菌培養(yǎng)方法

培養(yǎng)時先將病變組織接種于固體培養(yǎng)基上，做分離培養(yǎng)。再進一步對所得單個菌落進行形態(tài)、生化及血清學反應鑒定。一般細菌在有氧條件下，37℃中放18～24h生長。厭氧菌則在無氧環(huán)境中放2～3d后生長。

4.4弓形體檢測的方法

采集病豬脾臟,直接涂片姬姆薩染色后鏡檢。弓形蟲速殖子呈新月形，一端較尖而另一端鈍園，胞漿藍色，中央有一紫紅色的核。

4.5附紅細胞體的檢測

豬耳靜脈采血，滴加到載玻片上，加等量生理鹽水混勻，蓋上蓋玻片，放在600 倍顯微鏡下觀察，可見形狀呈球形或顆粒狀的附紅細胞體。

5實驗結果與分析

實驗結果見表1、表2及圖1、圖2、圖3。

從圖1可見發(fā)病場一有偽狂犬感染，圖2和圖3可見發(fā)病場二有藍耳病、偽狂犬病混合感染，發(fā)病場三有藍耳偽狂犬感染。從表1豬場病原檢測結果可知：發(fā)病場一存在巴氏桿菌和胸膜肺炎放線桿菌混合感染情況，發(fā)病場二存在藍耳病、偽狂犬病和巴氏桿菌混合感染情況，發(fā)病場三有藍耳病、偽狂犬病、鏈球菌和巴氏桿菌混合感染情況。從表2可見，發(fā)病場一、二、三所分離出的細菌分別對卡那霉素、磺胺嘧啶、阿莫西林敏感，而對新生霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素不敏感。

病毒與細菌的混合感染是該地區(qū)豬場發(fā)生高熱病的主要原因。比較近三年該地區(qū)豬場秋冬季發(fā)病史，2015年秋冬季豬場在育肥豬和母豬的生產(chǎn)上不穩(wěn)定性比較突出。主要有四個方面的誘發(fā)因素：第一，從2015年10月份開始，豫南地區(qū)連續(xù)四個月無有效降雨和降雪，氣候持續(xù)干燥，有利于病原微生物在豬場內外環(huán)境中持續(xù)存在；第二，發(fā)病率高的地區(qū)養(yǎng)殖密度較大，豬場間距不符合傳染病控制要求，豬場規(guī)模參差不齊，尤其是2015年下半年，由于行情下跌，很多養(yǎng)殖場抱希望于春節(jié)前行情走高，肥豬的壓欄率高，由于經(jīng)營成本壓力大，一些豬場在疫苗和飼料的使用上出現(xiàn)更迭，給豬群后期的抗病能力帶來負面影響；第三，部分規(guī)?；i場因病因不明，出現(xiàn)盲目用藥，配伍不合理，加大劑量，飼養(yǎng)管理差等不當措施，從而造成死亡率高而損失慘重的現(xiàn)象；第四，自2013年起豫南地區(qū)豬場偽狂犬病原及偽狂犬野毒抗體檢出率呈上升趨勢，許多過去偽狂犬陰性場也出現(xiàn)反彈。偽狂犬感染壓力的上升，可能造成豬場其他疫病疫苗防控失敗，加之偽狂犬病毒感染特點，也會加劇豬群呼吸道癥狀的復雜化。

表1　豬場病原檢測結果

表2　細菌藥敏結果

6防控對策

6.1保持日常管理工作的常態(tài)化

疫病的發(fā)生是各種發(fā)病誘因積累的結果，日常管理工作的漏洞，必然會加劇疫病發(fā)生的風險。行情波動是商品經(jīng)濟的必然規(guī)律，無論是疫苗還是飼料品質均是豬群健康的基石。而豬場管理水平的好壞則體現(xiàn)在日常管理制度的落實與延續(xù)上。

6.2加強實驗室檢測工作

實驗室準確的檢測結果對于明確疫病的性質，提出方向性的防治措施，具有十分重要的作用。上述三家豬場均是在前期藥物使用無效的情況下，才進行實驗室診斷，而結果顯示均為病毒與細菌的混合感染，那么，之前抗生素的使用效果必然大打折扣，而且延誤疾病治療時機。建議豬場首先在疫苗免疫后1個月內分階段采集適度比例的血液，通過實驗室檢測各項疫苗抗體水平，評估豬群健康程度。豬群出現(xiàn)發(fā)病動物時，應及時到各級實驗室確診，而不能簡單依靠經(jīng)驗來處理，否則有可能誤診。

6.3重視防治細節(jié)

6.3.1用藥原則豬場發(fā)生疾病后，不要盲目用藥，要結合畜禽疾病檢測單位，及時檢測發(fā)病病原，進行藥物敏感度實驗，具有針對性的按療程合理用藥進行治療，會收到良好的效果。同時選擇大型知名獸藥廠家產(chǎn)品，嚴格掌握劑量，適量給藥。避免使用來路模糊不清的藥品，造成治療效果差進而影響判斷的錯誤。

6.3.2給藥途徑商品豬在群體發(fā)病前，早期是個別豬只發(fā)病，此時可采取飼料加藥等群體性飼喂保健防治，這個思路是正確的，但操作要適當。個別豬場在飼料加入了中成藥，甚至直接加入大劑量退燒性西藥，讓大部分健康豬也隨之降溫的做法不妥。因為臨床上發(fā)病豬采食量減退，再加上劑量過大或部分藥品適口性不好，在飼料中大劑量用藥是起不到很好的治療作用的。如果發(fā)病豬群采食量下降70%以下，建議飲水加藥，把藥物加入水中會起到較好的治療效果。

當豬只發(fā)生發(fā)熱性疾病時，肌注是最有效的治療方案。但要注意控制劑量。在實際生產(chǎn)中，往往在病豬反復發(fā)燒時，反復超劑量用藥，甚至一日能肌注多種成份的藥物。特別是含有退燒成份或鹽酸氯丙嗪制劑的藥物，極易導致病豬藥物中毒死亡。此外還要注意防控病豬頸部壞死。商品豬自出生到體重40kg時，是采取疫苗防疫和保健措施的頻繁期，由于操作人員習慣動作，只在豬只一側防疫或保健，造成局部壞死或化膿，致使接種疫苗沒有完全被吸收，豬只抗體沒有提高，極易發(fā)生疾病，治療時藥物吸收也差。因此在編寫免疫程序和保健方案時，就要注明左右兩側交替注射的部位，減少局部壞死機率。在豬病前期治療時盡量避免使用濃度較高或不易吸收的藥物。豬群大批發(fā)燒時，肌注治療也只是起到退燒和消炎的作用，群體性肌注治療不僅勞動量大，造成豬群應激也大。所以提倡抗菌素和退燒制劑通過飲水給藥。

6.3.3正確消毒當附近豬場或本場豬群發(fā)生混合感染發(fā)熱性疾病時，大部分豬場會采取加強消毒的措施。但是一部分豬場采取一日一消毒，同時直接對準熟睡的豬群進行噴霧消毒。這種做法在寒冷的冬天，極易加重豬群的病情。平時消毒宜間隔5～10d一次，發(fā)病期間根據(jù)情況1～2d消毒一次，但不要對準豬體直接噴霧消毒，而是對準圈舍屋頂呈45度角度進行消毒，并且速度一定要快，避免造成地面潮濕，引起氣溫急劇下降和濕度過大，特別是保育舍更需注意。

參考文獻：

[1]徐輝，李曉成，陳偉杰，等．“豬高熱病”的流行病學調查與主要病因分析[J]．中國動物檢疫，2007，24( 6) : 19-21．

[2]劉濤，王瑞，曲哲會，等.新生仔豬豬圓環(huán)病毒與葡萄球菌混合感染的實驗室診斷[J]．畜牧與獸醫(yī)，2016(3)：164-165.

(編輯：嚴佩峰)

收稿日期：2016-03-10

作者簡介：陳強(1979—)，男，河南信陽人，助理獸醫(yī)師，研究方向：養(yǎng)殖場疫病防控.

中圖分類號：S858.28

文獻標識碼：A

文章編號：2095-8978(2016)03-0110-04

Diagnosis and Analysis to Swine High Fever Disease in Southern Regions of Henan Province

CHEN Qiang1，WANG Rui2

(1.Animal Disease Prevention and Control Center of Xinyang,Xinyang 464000,China；2. College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Xinyang Agriculture and Forestry University,Xinyang 464000,China)

Abstract：To investigate the cause of the swine high fever disease in farms of southern Henan, and take molecular biology and microbiology laboratory monitoring on the incidence of farm sampling. The results showed that the primary disease exists mixed infection pathogens.

Keywords：farms; swine high fever ; investigation and analysis; prevention and control measures