景小金，田海蓉，曾秀玲，李濤，劉霞，張霞，王慧，李照偉，熊力

(貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550008)

2013—2015年貴州省市、縣兩級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核結(jié)果分析

景小金，田海蓉*，曾秀玲，李濤，劉霞，張霞，王慧，李照偉，熊力

(貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550008)

對(duì)2013—2015年由貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織實(shí)施市、縣兩級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核工作結(jié)果進(jìn)行分析，參加比對(duì)考核的市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室9個(gè)，占全省市級(jí)實(shí)驗(yàn)室的100%(9/9)，參加比對(duì)考核的縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室60個(gè)，占全省縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的68.2%(60/88)，全省比對(duì)考核的實(shí)驗(yàn)室占市縣實(shí)驗(yàn)室總數(shù)的71.1%(69/97)。比對(duì)考核實(shí)驗(yàn)涉及ELISA、布病虎紅平板凝集試驗(yàn)、RT－PCR和H5亞型－HI 4個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，均是當(dāng)前動(dòng)物疫病診斷與監(jiān)測(cè)的重要檢測(cè)方法，3年中ELISA、布病虎紅平板凝集試驗(yàn)、RT－PCR、H5亞型－HI的正確率分別是92.8%、86.7%、84%、80.5%。表明本省市級(jí)實(shí)驗(yàn)室基本掌握了血清學(xué)和病原學(xué)檢測(cè)，縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室也基本掌握了血清學(xué)檢測(cè)，但與全國(guó)省級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)平均水平比較還有一定差距，需加強(qiáng)專項(xiàng)技能培訓(xùn)與學(xué)習(xí)。

貴州省;市、縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室;檢測(cè)能力;比對(duì)考核

獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室是指隸屬于各級(jí)獸醫(yī)主管部門(mén)，并承擔(dān)動(dòng)物疫病診斷、監(jiān)測(cè)和檢測(cè)等任務(wù)的國(guó)家級(jí)區(qū)域獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室、省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室、地(市)級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室和縣(市)級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。貴州省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室主要是指省、市、縣三級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。為了評(píng)估和提高各實(shí)驗(yàn)室管理水平和檢測(cè)能力，2010年起至今，農(nóng)業(yè)部組織開(kāi)展全國(guó)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核工作，我省以實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核為契機(jī)，連年組織開(kāi)展了市、縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核，了解和掌握全省市、縣兩級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力和水平，深入分析查找不足，進(jìn)一步完善實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系，完善實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)長(zhǎng)效機(jī)制，對(duì)于提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理水平和檢測(cè)能力起到積極的推動(dòng)作用，達(dá)到了預(yù)期效果。2013—2015年，全省組織開(kāi)展獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核市級(jí)實(shí)驗(yàn)室9個(gè)、縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室60個(gè)。檢測(cè)比對(duì)實(shí)驗(yàn)主要是根據(jù)監(jiān)測(cè)任務(wù)需要的檢測(cè)方法為主，主要有CSF－ELISA、H5亞型－HI、PRV－gE－ELISA、FMDV－3ABC－ELISA、布病虎紅平板凝集試驗(yàn)、HP－RRSV RT－PCR、H5－AIV熒光RT－PCR 7項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 比對(duì)試驗(yàn)名稱、所用試劑廠家、檢測(cè)依據(jù)為了避免試劑盒的差異，制備盲樣所用試劑盒和考核下發(fā)的試劑盒的廠家、型號(hào)、批號(hào)均相同。見(jiàn)表1。

1.2 比對(duì)樣品制備每年檢測(cè)4個(gè)項(xiàng)目，市、縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室各完成3個(gè)項(xiàng)目。每個(gè)比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置5個(gè)檢測(cè)盲樣，其中3個(gè)陽(yáng)性，2個(gè)陰性，每管的分裝量是單次試驗(yàn)的4倍量。定性試驗(yàn)處理到3個(gè)陽(yáng)性狀態(tài):強(qiáng)陽(yáng)、中陽(yáng)、弱陽(yáng)。盲樣均從試劑廠家直接購(gòu)買(mǎi)標(biāo)準(zhǔn)陰性和陽(yáng)性樣品，陽(yáng)性樣品做適量梯度稀釋后分裝，陰性樣品直接分裝。各盲樣間數(shù)量與顏色眼觀無(wú)差異，統(tǒng)一編號(hào)，分包，制樣完畢。盲樣密閉低溫保存，及時(shí)分發(fā)到各靶實(shí)驗(yàn)室。

2 結(jié)果

2.1 參加比對(duì)實(shí)驗(yàn)室情況

2.1.1 市級(jí)實(shí)驗(yàn)室:3年中參加比對(duì)考核市級(jí)實(shí)驗(yàn)室9個(gè)，實(shí)現(xiàn)全省市級(jí)實(shí)驗(yàn)室全覆蓋。

2.1.2 縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室:3年中參加比對(duì)考核縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室共有60個(gè)，占全省縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室的68%(60/88)。

2.2 2013—2015年參加比對(duì)的市、縣實(shí)驗(yàn)室正確率比較2013—2015年，參加比對(duì)的縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室正確率分別是76.2%、61.5%、75.6%;參加比對(duì)的市級(jí)實(shí)驗(yàn)室正確率分別是67%、78%、78%，市級(jí)實(shí)驗(yàn)室的正確率略高于縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室。見(jiàn)表2。

表2 2013—2015年參加比對(duì)的市、縣實(shí)驗(yàn)室正確率比較

2.3 不 同類型實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較ELISA是目前血清學(xué)試驗(yàn)最常用的檢測(cè)方法，也是市、縣兩級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室做得最多的實(shí)驗(yàn)，故正確率最高，為92.80%;RTPCR、布病虎紅平板凝集試驗(yàn)正確率均小于90%，有待提高檢測(cè)能力與水平;H5亞型－HI是定量試驗(yàn)，影響結(jié)果因素較多，結(jié)果判定主觀性較強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)員較難掌握，正確率最小，僅為80.5%。見(jiàn)圖1。

圖1 2013—2015年比對(duì)考核4種檢測(cè)項(xiàng)目正確率比較

2.4 全省9個(gè)地區(qū)比對(duì)考核實(shí)驗(yàn)室在ELISA、H5亞型－HI和RT－PCR 3個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目上比較從ELISA來(lái)比較，黔南州、安順和銅仁的正確率為100%，正確率最低的是畢節(jié)，僅有81%，其次是黔東南，正確率是89.3%。從H5亞型－HI比較，銅仁的正確率為100%，黔南州和安順正確率大于90%，畢節(jié)的正確率在83.3%，其它5個(gè)地區(qū)的正確率均低于80%。從RT－PCR比較，黔南、安順、畢節(jié)、貴陽(yáng)、黔西南和六盤(pán)水的正確率均為100%，6個(gè)地級(jí)實(shí)驗(yàn)室具備了RTPCR的檢測(cè)水平，完全有能力開(kāi)展相關(guān)核酸檢測(cè)工作;黔東南的正確率為67%，銅仁的正確率為33%，3個(gè)比對(duì)考核失誤了2次;遵義3年比對(duì)考核，因儀器原因，只有2015年參加了RT－PCR，結(jié)果錯(cuò)誤，因此正確率為0。從布病虎紅平板檢測(cè)比較，黔南、安順、貴陽(yáng)、黔西南、六盤(pán)水和遵義地區(qū)的正確率均為100%，畢節(jié)和銅仁的正確率為66.7%，黔東南的正確率最低，只有50%。從4個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目綜合成績(jī)來(lái)看，黔南和安順整體檢測(cè)水平較高。見(jiàn)表3。

表3 2013—2015年貴州省9個(gè)地區(qū)實(shí)驗(yàn)室4個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目正確率比較%

表12013 —2015年檢測(cè)項(xiàng)目、試劑生產(chǎn)廠家、檢測(cè)依據(jù)

3 討論

3.1 高致病性禽流感、口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病均是國(guó)家重大動(dòng)物疫病，也是國(guó)家實(shí)行強(qiáng)制動(dòng)物免疫的病種。血清學(xué)檢驗(yàn)是檢測(cè)動(dòng)物免疫抗體水平、檢驗(yàn)免疫效果和評(píng)價(jià)疫苗的有效方法，當(dāng)前最常用的是ELISA、HI和平板凝集試驗(yàn)。病原學(xué)檢測(cè)是診斷動(dòng)物疫病，找出病原的重要手段，RT－PCR是國(guó)標(biāo)規(guī)定的診斷方法，其敏感性和特異性高，用時(shí)少，是病原學(xué)檢測(cè)的首選。

3.2 2013—2015年3年中共涉及ELISA、H5亞型－HI、RT－PCR、平板凝集4類實(shí)驗(yàn)方法，與2013—2014年農(nóng)業(yè)部組織的全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果比較:本省地、縣實(shí)驗(yàn)室ELISA、H5亞型－HI、RT－PCR實(shí)驗(yàn)室正確率分別為92.8%、80.5%和84%，全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果中ELISA、H5亞型－HI、RT－PCR實(shí)驗(yàn)室正確率分別為100%(32/32)、94%(30/32)和98%(123/126)［1，2］，3項(xiàng)結(jié)果明顯高于貴州省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室正確率，說(shuō)明貴州省市、縣實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)水平還有待提高。

3.3 2013—2015年3年中縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果比較:3個(gè)項(xiàng)目比對(duì)全部正確的市級(jí)實(shí)驗(yàn)室百分率分別為67%、78%、78%，總體正確率略高于縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室，縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室正確率分別為76.2%、61.5%、75.6%。

3.4 ELISA和H5亞型－HI是3年均考核的項(xiàng)目，ELISA檢測(cè)項(xiàng)目的正確率是92.8%，是檢測(cè)項(xiàng)目中正確率最高的;其次是布病虎紅平板凝集試驗(yàn)正確率86.7%，RT－PCR正確率84%，H5亞型－HI正確率80.5%。從本組數(shù)據(jù)來(lái)看，市級(jí)實(shí)驗(yàn)室的RT－PCR的檢測(cè)綜合水平不是很理想，需加強(qiáng)核酸檢測(cè)技術(shù)的培訓(xùn)。H5亞型－HI是一個(gè)定量的試驗(yàn)，主觀與客觀影響結(jié)果因素多，在全省范圍內(nèi)盡量統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)操作用品與實(shí)驗(yàn)條件，有助于提高結(jié)果統(tǒng)一性。布病虎紅平板凝集試驗(yàn)是2014年本省首次考核項(xiàng)目，正確率為86.7%，略低于2013年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)中省級(jí)實(shí)驗(yàn)室正確率87%［1］。隨著近年來(lái)布病疫情呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，布病虎紅平板凝集試驗(yàn)是目前檢測(cè)布病快速有效的方法，對(duì)于基層實(shí)驗(yàn)室很適用，建議進(jìn)一步加強(qiáng)推廣使用。

3.5 從2013—2015年貴州省9個(gè)地區(qū)實(shí)驗(yàn)室4個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目正確率比較結(jié)果來(lái)看，畢節(jié)和黔東南地區(qū)實(shí)驗(yàn)室要加強(qiáng)ELISA的檢測(cè)能力;貴陽(yáng)、黔西南、六盤(pán)水、畢節(jié)、黔東南和遵義6個(gè)地區(qū)實(shí)驗(yàn)室要加強(qiáng)H5亞型－HI的檢測(cè)能力;銅仁、黔東面和遵義地區(qū)實(shí)驗(yàn)室要加強(qiáng)RT－PCR的檢測(cè)能力;畢節(jié)、銅仁和黔東南地區(qū)實(shí)驗(yàn)室要加強(qiáng)布病虎紅平板試驗(yàn)的檢測(cè)能力。

3.6 通過(guò)以上對(duì)貴州省3年來(lái)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核工作的綜合分析，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核工作很有必要性，達(dá)到了預(yù)期目標(biāo)，整體推動(dòng)了全省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的開(kāi)展和能力提高。各實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)處理，有的放矢地完善實(shí)驗(yàn)室管理，取長(zhǎng)補(bǔ)短，不斷進(jìn)步。特別是某些經(jīng)濟(jì)較落后、地理位置較偏遠(yuǎn)的少部分縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室，從考核前不重視實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，沒(méi)有固定實(shí)驗(yàn)人員狀況，通過(guò)考核，加強(qiáng)了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)，并配備實(shí)驗(yàn)室專業(yè)人員。同時(shí)，開(kāi)展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，是評(píng)價(jià)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法［3］。盡管當(dāng)前貴州省市、縣兩級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力與省級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平還有一定差距，省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心要多開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)專項(xiàng)技能培訓(xùn)，繼續(xù)開(kāi)展全省各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)考核工作，使全省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室成為動(dòng)物疫病預(yù)防控制工作戰(zhàn)線上過(guò)硬的檢測(cè)隊(duì)伍。

［1］劉偉，張劭俁，董昕欣，等.2013年全國(guó)省級(jí)醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2013，49(10):91－94.

［2］董昕欣，劉偉，邴國(guó)霞，等.2014年全國(guó)省級(jí)醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2014，50(10):101－103.

［3］王文，張繼紅，蘭玲，等.2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)試驗(yàn)的探討與建議［J］.中國(guó)動(dòng)物檢疫，2011，28(9):19－21.

S851.34

B

1007－1474(2016)05－0030－03

2016－07－12

景小金(1981—)，男，獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病防控工作。

*通訊作者