田海蓉，吳宗萬，任乾明，楊小碎，楊前兵

(1.貴州省動物疫病預防控制中心，貴州貴陽550008;2.貴州省印江縣紫薇鎮(zhèn)畜牧站，貴州印江555207;3.貴州省印江縣動物疫病預防控制中心，貴州印江555200)

印江縣白山羊布氏桿菌病和弓形蟲病血清學調查與分析

田海蓉1，吳宗萬2，任乾明2，楊小碎3，楊前兵3

(1.貴州省動物疫病預防控制中心，貴州貴陽550008;2.貴州省印江縣紫薇鎮(zhèn)畜牧站，貴州印江555207;3.貴州省印江縣動物疫病預防控制中心，貴州印江555200)

布氏桿菌病是由布魯氏菌引起的人畜共患病，我國將其列為的二類動物疫病，傳染源主要為染疫的羊、牛、豬等動物［1］，對人威脅很大。弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起，包括人在內的350多種脊椎動物易感的寄生蟲?。?］。弓形蟲是專性細胞內寄生原蟲，寄生宿主范圍大，人、畜、禽和多種野生動物均具有感染性，呈世界性分布，在家畜中對豬和羊的危害最大［3］。羊布氏桿菌病和羊弓形蟲病，均會引起山羊繁殖障礙，不僅阻礙山羊養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展，且嚴重危害人的健康。2015年8月以來，印江縣某羊場地方白山羊陸續(xù)出現繁殖障礙癥狀，母羊表現不明原因流產、產死胎，有的不孕、屢配不上。調查所知該羊群均未接種過布氏桿菌病和弓形蟲病疫苗，結合臨床癥狀，疑似布氏桿菌病和弓形蟲病。2016年4月，采用虎紅平板凝集試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗對126只羊血樣進行布氏桿菌抗體和弓形蟲抗體檢測。結果126份山羊血清樣品布氏桿菌抗體和弓形蟲抗體全部為陰性，表明本次山羊出現的繁殖障礙癥狀不是布氏桿菌病和弓形蟲病，而是其它原因造成的。現將檢測情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與處理對羊場存欄的126只山羊進行全群采樣，其中種公羊22只，母羊30只，懷孕羊48只，未成年羊26只。用真空采集管采羊血，4℃靜置2 h后，管身1/2以下用37℃溫水水浴0.5 h，有清亮血清析出，用吸頭吸出血清裝在1.5 mL離心管中，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要試劑與儀器(1)布氏桿菌病虎紅平板凝集抗原和陽性血清，購于青島易邦生物工程有限公司(生產批號:20150915);動物弓形蟲IgG抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，購于珠海經濟特區(qū)海泰生物制藥有限公司(生產批號:2016010)。(2)eppendorf單道移液器和8道移液器、TECAN酶標儀。

1.3 檢測方法與結果判定

1.3.1 山羊布氏桿菌抗體檢測用布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗;山羊弓形蟲抗體用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測。嚴格按照試劑盒說明書要求進行操作。

1.3.2 嚴格按照試劑盒說明書要求判定結果。結果判定中只有在標準血清陰性對照和陽性對照成立的條件下，才能對待檢血清進行判定，否則實驗不成立，結果不可靠。

2 結果

檢測的126份羊血清的布氏桿菌抗體和弓形蟲抗體全部為陰性。見表1。

表1 羊血清的布氏桿菌抗體和弓形蟲抗體檢測結果

3 討論

3.1 山羊出現繁殖障礙癥狀有多種原因，主要分為物理性、化學性和疾病性3個類型。物理性繁殖障礙主要指機械損傷性或者營養(yǎng)不良造成的流產、早產、產弱羔等;化學性繁殖障礙主要指因某些毒素或藥物刺激造成畸形胎、死胎、流產等;疾病性繁殖障礙主要有布氏桿菌病、弓形蟲病、毛滴蟲病、子宮內膜炎等疾病造成。近年來布氏桿菌病和弓形蟲病造成的繁殖障礙疾病較多。毛坤明［4］報道福清山羊弓形蟲病抗體平均陽性率20.5%。黔南州［5］弓形蟲病感染率最高的縣為54.17%，感染率最低的縣(市)為1.67%，采集的2 840份山羊血清樣品中，平均感染率為20.88%。隨著我國養(yǎng)羊規(guī)?；倪M程加速，導致羊在全國范圍內頻繁流動，布魯氏菌病疫情影響區(qū)域呈擴散趨勢，防控形勢嚴峻［6］。胡鵬飛［7］報道貴州盤縣檢測外地購入羊血清1 968份，布魯氏菌抗體陽性數123份，陽性率6.25%。這主要是近年來盤縣從省外引進大量羊，養(yǎng)殖場(戶)防控意識淡薄，未經檢疫就盲目引進，羊群引入后未向當地動物防疫監(jiān)督機構報告檢疫，沒有進行隔離觀察，從而將病原帶入。

3.2 通過本次檢測，排除了山羊布氏桿菌病和弓形蟲病。目前，印江縣是布氏桿菌病無疫區(qū)，山羊出現繁殖障礙癥狀而開展本試驗是非常有必要的。對于此次羊發(fā)生繁殖障礙癥狀是什么原因造成，還需要繼續(xù)跟蹤調查研究。建議業(yè)務部門不僅要把好引種關，把疫病堵在門外，同時要定期做好布氏桿菌病流行病學調查工作。養(yǎng)殖戶加強懷孕母羊的飼養(yǎng)管理，給予優(yōu)質飼料與飼草，禁喂發(fā)霉變質、有毒飼料。對于早產的死胎、胎盤等污染物要進行無害化處理，消毒污染場所。

［1］黃繼冶，曾作財，黃海水，等.羊布氏桿菌病流行病學調查與監(jiān)測［J］.江西畜牧獸醫(yī)雜志，2015(6):40.

［2］DubeyJP，BeattieC P.ToxoplasmosisofAnimalsandMan［M］.US:CRC Press，1988.

［3］張宏偉.動物疫病:第1版［M］.北京:中國農業(yè)出版社，2001:307.

［4］毛坤明，林曾歡，林秀敏，等.福清山羊衣原體病、弓形蟲病和布魯氏菌病血清學調查［J］.福建畜牧獸醫(yī)，2013，35(5):21－22.

［5］董保豫，錢德興，黎桂云，等.黔南州山羊弓形蟲病血清學調查［J］.中國獸醫(yī)雜志，2014，50(9):33－34.

［6］衛(wèi)生部，農業(yè)部.關于進一步加強布魯氏菌病防治工作的通知［衛(wèi)辦疾控發(fā)(2012)54號文］.2012.

［7］胡鵬飛，蔣澤菊，瞿正文，等.盤縣羊布氏桿菌病血清學調查及防控措施［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2016，40(2):27－28.

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