施正祥　張來萍　劉春艷　何松彬　唐維國溫州醫(yī)科大學(xué)附屬舟山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，浙江舟山　316000

血清胱抑素C對體檢人群頸動脈粥樣硬化形成的影響

施正祥張來萍劉春艷何松彬▲唐維國
溫州醫(yī)科大學(xué)附屬舟山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，浙江舟山316000

目的探討體檢人群血清胱抑素C（Cys C）水平對頸動脈粥樣硬化形成的影響作用。 方法應(yīng)用彩色多普勒超聲檢測技術(shù)，對體檢人員進(jìn)行雙側(cè)頸動脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）測定，根據(jù)有無頸動脈粥樣硬化將體檢者分為頸動脈粥樣硬化組和正常對照組，每組各134例。再將頸動脈粥樣硬化組根據(jù)有無斑塊分為斑塊組和無斑塊組。采用乳膠顆粒增強(qiáng)免疫比濁法（PETIA）檢測血清胱抑素C水平及相關(guān)生化指標(biāo)，進(jìn)行組間比較，分析血清胱抑素C對頸動脈粥樣硬化形成的影響作用。結(jié)果①頸動脈粥樣硬化組血清胱抑素C、膽固醇、低密度脂蛋白、三酰甘油水平均明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。②頸動脈斑塊組血清胱抑素C、膽固醇、低密度脂蛋白水平均高于無斑塊組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。③等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)：血清胱抑素C水平與頸動脈粥樣硬化內(nèi)膜厚度呈顯著相關(guān)（P＜0.01）。④多因素Logistic回歸分析示高水平血清胱抑素C、年齡是頸動脈粥樣硬化斑塊形成的危險因素。結(jié)論體檢人群血清胱抑素C水平與頸動脈粥樣硬化形成密切相關(guān)，是頸動脈粥樣硬化斑塊形成的重要危險因素。

血清胱抑素C；頸動脈粥樣硬化；體檢人群；頸動脈內(nèi)膜中層厚度

［Abstract］Objective To explore the significance of serum cystatin C（Cys C）levels on carotid atherosclerosis formation in physical examination people.M ethods The technology of color doppler ultrasonography was applied as a physical examinationmeasurement to calculate the bilateral carotid intima-media thickness（IMT）of physical examination people. Carotid atherosclerosis was found in 134 samples.These samples were further divided into two groups according to whether they had atherosclerotic plaque formation.People without carotid atherosclerosiswere considered as the normal control.The level of serum cystatin C and its related biochemical indicators were detected by latex enhanced turbidimetric immunoassay.Statistical analysis was used to investigate the influence of serum cystatin Con carotid artery atherosclerosis formation.Results①The levels of serum Cys C，total cholesterol（TC），low density lipoprotein（LDL）and triglyceride（TG）in the group with thickened carotid intima-media or atherosclerotic plaque were significantly higher than those groupswithout it（P＜0.05）.②The levels of serum Cys C，TC and LDLwere significantly higher in plaque group than the group without plaque（P＜0.05）.③The analysis of spearman rank correlation demonstrated that therewas a significant correlation between the level of Cys C and carotid atherosclerosis intima-media thickness（P＜0.01）.④High Cys C level and age were shown as independent risk factors in the formation of carotid atherosclerotic plaque on Logistic regression analysis.Conclusion Serum cystatin C level is closely related to carotid atherosclerosis in the physical examination people，and it is also a critical risk factor in the formation of carotid atherosclerosis.

［Key words］Serum cystatin C；Carotid atherosclerosis；Physical examination people；Carotid intima-media thickness

研究證實(shí)，動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制與多種組織蛋白酶的過度表達(dá)和相應(yīng)抑制劑的表達(dá)下降相關(guān)［1］。血清胱氨酸蛋白酶抑制劑C（血清胱抑素C，Cys C）是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，通過參與炎癥、細(xì)胞外基質(zhì)重建等過程而與動脈硬化的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［2］，其水平高低與動脈硬化密切相關(guān)［3］。但目前國內(nèi)有關(guān)健康體檢人群的血清胱抑素C與頸動脈硬化相關(guān)性研究報道較少。本文通過分析我院門診體檢的健康人群的頸動脈狀態(tài)、血清胱抑素C及血生化指標(biāo)，旨在探討其與頸動脈粥樣硬化及斑塊形成的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

隨機(jī)選取2013年8月～2015年5月在我院門診體檢的人群，應(yīng)用彩色多普勒超聲檢測技術(shù)測定雙側(cè)頸動脈內(nèi)膜中層厚度（intima-media thickness，IMT），發(fā)現(xiàn)頸動脈硬化者134例。其中男77例，女57例，年齡38～89歲，平均（65.3±8.9）歲。分組及納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）根據(jù)頸動脈彩色多普勒超聲檢查結(jié)果，將體檢者分為頸動脈粥樣硬化組及頸動脈IMT正常對照組。其中頸動脈粥樣硬化組按頸動脈內(nèi)膜中層厚度及形態(tài)再分成兩組：①頸動脈粥樣硬化無斑塊形成64例（無斑塊組）：1.0 mm≤IMT＜1.5 mm；②頸動脈粥樣硬化有斑塊形成70例（斑塊組）：動脈壁的內(nèi)-中膜不連續(xù)性增厚及不均勻性、IMT≥1.5mm，且局部隆起，向管腔內(nèi)突起。（2）另選取同期在我院體檢的正常對照組134例（對照組）：頸動脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）＜1.0mm。對照組與頸動脈粥樣硬化組一般臨床資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2排除標(biāo)準(zhǔn)

具有以下任何一種疾病或相關(guān)病史的患者均予以排除：①肝腎功能不全、腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、明顯感染患者；②有痛風(fēng)病史，近期服用過B族維生素、雌激素、葉酸治療，2周內(nèi)有手術(shù)外傷史患者。

1.3頸動脈彩超檢測

儀器：使用Philips iU22超聲診斷儀，探頭頻率7.5～10.0 MHz。方法：檢查時患者采用仰臥位，薄枕墊頸部，頭后仰同時略偏向一側(cè)以便頸部暴露。超聲從頸根部向上探查至頸總動脈近心端，然后將探頭向頭側(cè)移動沿其血管走行方向，越過頸動脈分叉處，探測頸內(nèi)及頸外動脈，盡量探測到頸部最高位置之后，轉(zhuǎn)動90°探頭，順血管走行顯示橫切面，分別測量各血管壁內(nèi)-中膜，觀察厚度、管壁有無不均勻性及不連續(xù)性增厚，管腔有無局部隆起，向管腔內(nèi)突起，并做記錄。頸動脈增厚或斑塊形成的診斷標(biāo)準(zhǔn)按照美國超聲心動圖協(xié)會2008年頒布的頸動脈內(nèi)中膜增厚及斑塊形成的診斷指南［4］：頸動脈內(nèi)膜中層厚度＜1.0 mm為正常，≥1.0mm為增厚，局限性內(nèi)膜中層厚度≥1.5mm為斑塊形成。IMT增厚和（或）粥樣斑塊診斷為頸動脈粥樣硬化。

1.4血清生化檢測

入選對象于清晨取空腹肘靜脈血4 mL。采用乳膠顆粒增強(qiáng)免疫比濁法（PETIA）檢測血清胱抑素C水平，同時測定空腹血糖（FBG）、三酰甘油（TG）、膽固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Cr）等，檢測儀器為應(yīng)用日立7600全自動生化分析儀。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS18.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以（±s）表示，行正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；兩個變量之間的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析；對單因素分析有統(tǒng)計學(xué)差異的因素進(jìn)一步采用多元Logistic回歸分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1頸動脈粥樣硬化組與正常對照組的血清胱抑素C及其他各項(xiàng)生化指標(biāo)比較

頸動脈粥樣硬化組患者FBG、HDL、BUN、Cr與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而血清胱抑素C、TC、LDL、TG與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2頸動脈粥樣硬化斑塊組和無斑塊組患者的一般情況比較

兩組性別、吸煙史、飲酒史、糖尿病、高血壓病、冠心病及心房顫動患病率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；斑塊組年齡較無斑塊組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

2.3頸動脈粥樣硬化斑塊組與無斑塊組患者血清胱抑素C及相關(guān)生化指標(biāo)比較

兩組患者FBG、TG、HDL、BUN、Cr比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而兩組血清胱抑素C、TC、LDL比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表1　頸動脈粥樣硬化組與正常對照組血清Cys C及其他各項(xiàng)生化指標(biāo)比較（±s）

表1　頸動脈粥樣硬化組與正常對照組血清Cys C及其他各項(xiàng)生化指標(biāo)比較（±s）

組別　n　Cys C （mg/L）FBG （mmol/L）TG （mmol/L）HDL （mmol/L）LDL （mmol/L）BUN （mmol/L）Cr （μmol/L）TC （mmol/L）正常對照組頸動脈粥樣硬化組t值P值134 134 0.85±0.23 1.55±0.31 3.312 0.009 4.37±0.53 4.89±0.91 0.675 0.712 2.25±0.73 2.97±0.76 3.152 0.031 1.45±0.37 1.73±0.52 0.351 0.813 1.83±0.45 3.25±0.67 3.384 0.037 5.01±0.72 5.83±1.08 0.159 0.276 69.00±23.00 79.00±26.00 0.273 0.355 5.45±0.23 6.37±0.81 1.682 0.017

表2　頸動脈粥樣硬化斑塊組和無斑抉組一般情況比較

表3　頸動脈粥樣硬化斑塊組與無斑抉組血清胱抑素C及相關(guān)生化指標(biāo)比較（±s）

表3　頸動脈粥樣硬化斑塊組與無斑抉組血清胱抑素C及相關(guān)生化指標(biāo)比較（±s）

?

2.4頸動脈粥樣硬化內(nèi)膜厚度與血清胱抑素C的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)頸動脈粥樣硬化內(nèi)膜厚度與血清胱抑素C水平呈顯著正相關(guān)（P＜0.01）。

2.5頸動脈粥樣硬化斑塊形成的危險因素的多因素Logistic回歸分析

以頸動脈斑塊（無=0，有=1）為因變量，選取差異有統(tǒng)計學(xué)意義的危險因素作為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析顯示：Cys C（OR=2.42，95%CI 1.06～5.48，P=0.031）、年齡（OR=1.02，95%CI 1.06～1.02，P= 0.016）、三酰甘油（OR=1.02，95%CI 1.63～2.01，P= 0.056）、低密度脂蛋白（OR=1.32，95%CI 1.71～3.06，P= 0.061），其中，Cys C及年齡均與頸動脈粥樣硬化斑塊形成有關(guān)（P＜0.05），提示血清胱抑素C水平、年齡是頸動脈粥樣硬化的獨(dú)立危險因素。

3　討論

血清胱抑素C是一種低分子蛋白質(zhì)，為一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，通過調(diào)節(jié)半胱氨酸蛋白酶活性來維持細(xì)胞外基質(zhì)降解與產(chǎn)生的動態(tài)平衡，同時對中性粒細(xì)胞的活動，包括遷移、吞噬性和趨化性產(chǎn)生影響，參與并調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)的過程。在非生理狀態(tài)下，血清胱抑素C被大量釋放，并能調(diào)節(jié)壞死和（或）炎癥細(xì)胞釋放出來的組織蛋白酶的部分活性作用［5］。

近年文獻(xiàn)［6-9］報道血清胱抑素C參與了動脈粥樣硬化的病理生理過程，可以預(yù)測冠狀動脈疾病的發(fā)生［10］，且與腦血管疾病密切相關(guān)［11-13］。血清胱抑素C是腦梗死的一個獨(dú)立危險因素，其中大動脈粥樣硬化型腦梗死與血清胱抑素C水平升高密切相關(guān)［14］。但高水平血清胱抑素C作為冠心病及腦梗死的危險因素，其作用機(jī)制尚不清楚［14］。研究認(rèn)為可能與以下三個方面相關(guān)：①血清胱抑素C被認(rèn)為是反映早期腎損害的內(nèi)源性標(biāo)志物［15］，它從腎小球?yàn)V過，在近端小管代謝，與血清肌酐相比，能夠更好地反映腎臟功能。腎功能不全是卒中的高危因素［16，17］，常伴隨著全身微小炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激過程，這些進(jìn)一步加速了動脈粥樣硬化進(jìn)程。②血清胱抑素C是一個重要的內(nèi)源性組織蛋白酶抑制劑。人體內(nèi)組織蛋白酶過度表達(dá)及抑制劑水平低下可能是動脈粥樣硬化發(fā)病的主要機(jī)制［5，18］。Taglier N等［2］研究提示胱抑素C缺失、蛋白水解酶及其抑制劑在血管壁的失衡，可能造成動脈硬化的發(fā)生而發(fā)病，胱抑素C是血管事件的一個強(qiáng)有力的獨(dú)立預(yù)測因子。此外，還有研究者認(rèn)為腦梗死患者腦脊液中的胱抑素C透過損害的血腦屏障進(jìn)入血液，導(dǎo)致血清胱抑素C含量明顯升高［19］。

本研究主要探討了體檢人群血清胱抑素C水平與頸動脈粥樣硬化和動脈硬化斑塊形成的相關(guān)性，結(jié)果顯示頸動脈粥樣硬化無斑塊組及斑塊組血清胱抑素C水平顯著高于對照組，頸動脈粥樣硬化斑塊組血清胱抑素C水平顯著高于頸動脈粥樣硬化無斑塊組。因此，說明血清胱抑素C在頸動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展以及繼發(fā)腦血管病變過程中可能起著重要作用，其機(jī)制可能是在頸動脈粥樣硬化患者中，炎癥反應(yīng)與血清胱抑素C的表達(dá)失衡有關(guān)［1，20］，最終導(dǎo)致頸動脈粥樣硬化發(fā)生與發(fā)展。Bengsson等［21］的動物研究顯示胱抑素C參與了動脈粥樣硬化的形成，因其發(fā)現(xiàn)胱抑素C可以干涉動脈粥樣硬化斑塊的消退及其穩(wěn)定性的改變。但人體內(nèi)血清胱抑素C濃度水平是否與動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)展、消退及穩(wěn)定性相關(guān)，尚未定論。本研究通過Pearson相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)頸動脈粥樣硬化內(nèi)膜厚度與血清胱抑素C水平呈顯著正相關(guān)。

此外，本研究結(jié)果還顯示有斑塊組和無斑塊組患者在性別、吸煙、飲酒、既往有無高血壓病、糖尿病、冠心病、心房顫動以及空腹血糖、三酰甘油、尿素氮、肌酐水平等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而年齡、胱抑素C、膽固醇、低密度脂蛋白比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；進(jìn)一步對頸動脈粥樣硬化斑塊形成相關(guān)危險因素的Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，除年齡外，血清胱抑素C參與頸動脈粥樣硬化斑塊的形成，是一個獨(dú)立危險因素。

綜上所述，本研究提示在體檢人群中血清胱抑素C水平升高是頸動脈粥樣硬化及斑塊形成的獨(dú)立高危因素，血清胱抑素C在動脈硬化的早期診斷及防治方面的臨床意義值得進(jìn)一步研究。

［1］Krychtiuk KA，Kastl SP，Speidl WS，et al.Inflammation and coagulation in atherosclerosis［J］.Hamostaseologie，2013，33（4）：269-282.

［2］Taglier N，Koenig W，Kaski JC.Cystain C and cardiovascular risk［J］.Ann Bio Clin（Paris），2010，68（5）：517-529.

［3］王先俠，程訓(xùn)民，葛玲，等.血清胱抑素C在急性腦梗死診斷中的意義［J］.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，37（2）：192-193.

［4］Stein JH，Korcarz CE，Hurst RT，et al.Use of carotid ultrasound to identify subclinical vascular disease and evaluate cardiovascular disease risk：A consensus statement from the American Society of Echocardiography Carotid Intima-Media Thickness Task Force［J］.JAm Soc Echoardiogr，2008，21（2）：93-111.

［5］Gomez M，Vila J，Elosua R，et al.Relationship of lipid oxidation with subclinical atherosclerosis and 10-year coronary events in general population［J］.Atherosclerosis，2014，232（1）：134-140.

［6］Imai A，Komatsu S，Ohara T，et al.Serum cystatin C is associated with early stage coronary atherosclerotic plaque morphology on multidetector computed tomography［J］. Atherosclerosis，2011，218（2）：350-355.

［7］Lee M，Saver JL，Huang WH，et al.Impact of elevated cystatin C level on cardiovascular disease risk in predominantly high cardiovascular risk population：A meta-analysis［J］.Circ Cardiovasc QualOutcomes，2010，3（6）：675-683.

［8］Ferraro S，Maranv G，Biganzoli EM，et al.Prognostic value of cystatin C in acute coronary syndromes：Enhancer of atherosclerosis and promising therapeutic target［J］.Clin Chem lab Med，2011，49（9）：1397-1404.

［9］Urbonaviciene G，Shi GP，Urbonavicius S，et al.Higher cystatin C level predicts long-term mortality in patients with peripheralarterialdisease［J］.Atherosclerosis，2011，216（2）：440-445.

［10］Xie L，Terrand J，Xu B，etal.Cystatin C increases in cardiac injury：A role in extracellularmatrix proteinmodulation［J］.Cardiovasc Res，2010，87（4）：628-635.

［11］Kleber ME，Goliasch G，Grammer TB，et al.Evolving biomarkers improve prediction of long-term mortality in patients with stable coronary artery disease：The BIOVILCAD score［J］.J Intern Med，2014，276（2）：184-194.

［12］Negrusz-Kawecka M，Poreba R，Hulok A，et al.Evaluation of the significance of cystatin C levels in patients suffering from coronary artery disease［J］.Adv Clin Exp Med，2014，23（4）：551-558.

［13］Ito R，Yamakage H，Kotani K，et al.Comparison of cystatin C-and creatinine-based estimated glomerular filtration rate to predict coronary heart disease risk in Japanese patientswith obesity and diabetes［J］.Endocr J，2015，62（2）：201-207.

［14］Zeng Q，Lin K，Yao M，et al.Significant correlation betweencystatinC，cerebralinfarction，andpotential biomarker for increased risk of stroke［J］.Curr Neurovasc Res，2015，12（1）：40-46.

［15］Li Q，F(xiàn)ang JY，Wang WP，et a1.Cystatin C and serium ereatine in estimating acute kidney injury of shock patients［J］.World JEmerg Med，2010，1（3）：185-189.

［16］Arboix A，Miguel M，Císcar E，et al.Cardiovascular risk factors in patientsaged 85 or olderwith ischemic stroke［J］. Clin Neurol Neurosurg，2006，108（7）：638-643.

［17］Huang WY，Chen IC，Meng L，et al.The influence of anemia on clinical presentation and outcome of patients with first-ever atherosclerosis-related ischemic stroke［J］. JClin Neurosci，2009，16（5）：645-649.

［18］Albini PT，Segura AM，Liu GH，et al.Advanced atherosclerosis is associated with increased medial degeneration in sporadic ascending aortic aneurysms［J］.Atherosclerosis，2014，232（2）：361-368.

［19］Hasegawa A，Naruse M，Hitoshi S，et al.Regulation of glial development by cystatin C［J］.JNeurochem，2007，100（1）：12-22.

［20］TsaiHT，Wang PH，Tee YT，etal.Imbalanced serum concentration between cathepsin B and evstatin C in patients with pelvic inflammatory disease［J］.Fertil Steril，2009，91（2）：549-555.

［21］Bengtsson E，To F，Grubb A，et al.Absence of the protease inhibitor cystatin C in inflammatory cells results in larger plaque area in plaque regression of apoE-deficient mice［J］.Atherosclerosis，2005，180（1）：45-53.

The impact of serum cystatin C on carotid atherosclerosis formation in physical exam ination people

SHI ZhengxiangZHANG YapingLIU ChunyanHE SongbinTANGWeiguo
Department of Neurology，Zhoushan Hospital Affiliated toWenzhou Medical University，Zhoushan316000，China

R446.6

A

1673-9701（2016）20-0022-04

浙江省舟山市衛(wèi)生局基金資助（2013A13）；浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生一般研究計劃項(xiàng)目（2012KYB224）

2016-03-28）